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1、第二十章高效液相第1页，本讲稿共12页定义定义：以高压输送流动相，采用高效固定相，及：以高压输送流动相，采用高效固定相，及 高灵敏度检测器高灵敏度检测器，发展而成的现代液相色谱分析方，发展而成的现代液相色谱分析方法。法。优点：优点：1、柱效高，分离效率高。、柱效高，分离效率高。2、分析速度快（几、分析速度快（几-几十分钟内即可完成）几十分钟内即可完成）3、大大提高了灵敏度（、大大提高了灵敏度（紫外检测器最小检测紫外检测器最小检测限可达限可达 10-9g，荧光检测器最小检测限可达，荧光检测器最小检测限可达 10-12g。4、应用范围广、应用范围广 5、分离选择性高、分离选择性高 第2页，本讲稿共
2、12页第一节第一节 高效液相色谱法高效液相色谱法 的主要类型和原理的主要类型和原理 一、一、高效液相色谱法高效液相色谱法 的主要类型的主要类型LLC ,LSC最长见的：化学键合相色谱法最长见的：化学键合相色谱法 离子抑制色谱法离子抑制色谱法 离子对色谱法离子对色谱法二、化学键合相色谱法（二、化学键合相色谱法（BPC)以化学键合相为固定相的色谱法（键合相色谱法）以化学键合相为固定相的色谱法（键合相色谱法）适用于分离几乎所有类型的化合物。适用于分离几乎所有类型的化合物。第3页，本讲稿共12页（一）正相化学键合相色谱法（一）正相化学键合相色谱法采用极性键合相为固定相，以非极性或弱极性溶剂作流动相采用
3、极性键合相为固定相，以非极性或弱极性溶剂作流动相（二）反相化学键合相色谱法（二）反相化学键合相色谱法（三）反相离子对色谱法（三）反相离子对色谱法三、其他三、其他高效液相色谱法高效液相色谱法（一）离子色谱法（一）离子色谱法（二）手性色谱法（二）手性色谱法（三）亲合色谱法（三）亲合色谱法第4页，本讲稿共12页第二节第二节高效液相色谱法高效液相色谱法 的固定相和流动相及其选择的固定相和流动相及其选择一、一、化学键合相色谱法的固定相化学键合相色谱法的固定相二、化学键合相色谱法的流动相二、化学键合相色谱法的流动相三、分离条件的选择三、分离条件的选择（一）高效液相色谱中的速率理论（一）高效液相色谱中的速率
4、理论 H=A+Cmu+smuu（二）正相键合相色谱法的分离条件（二）正相键合相色谱法的分离条件（三）反相键合相色谱法的分离条件（三）反相键合相色谱法的分离条件 (四）反相离子对色谱法的分离条件四）反相离子对色谱法的分离条件四、其他固定相四、其他固定相第5页，本讲稿共12页第6页，本讲稿共12页1、键合型离子交换剂、键合型离子交换剂2、手性固定相、手性固定相3、亲和色谱固定相、亲和色谱固定相第三节第三节 高校液相色谱仪高校液相色谱仪一、输液系统一、输液系统（一）高压输液泵（一）高压输液泵（二）梯度洗脱装置（二）梯度洗脱装置二、分离和进样系统二、分离和进样系统（一）进样器（一）进样器（二）色谱柱（
5、二）色谱柱第7页，本讲稿共12页高高效效液液相相色色谱谱仪仪方方框框图图柱恒温箱自动进样器样品进样器预柱分析柱检测器级分收集器记录器 微机贮液瓶泵第8页，本讲稿共12页 三、检测系统（一）检测器的主要性能（二）紫外检测器（三）荧光检测器第9页，本讲稿共12页四、数椐记录处理和计算机控制系统第四节第四节 高校液相色谱分析方法高校液相色谱分析方法一、定性分析方法一、定性分析方法1、色谱鉴定法、色谱鉴定法2、化学鉴定法、化学鉴定法3、两谱联用鉴定法、两谱联用鉴定法二、定量分析方法二、定量分析方法1、外标法、外标法2、内标法、内标法第10页，本讲稿共12页三、高校液相色谱分离方法的选择第11页，本讲稿共12页第12页，本讲稿共12页