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1、实验课程实验课程真菌的显微形态观察及真菌的显微形态观察及 微生物菌落形态观察微生物菌落形态观察 一、实验目的一、实验目的掌握真菌水浸片的制作掌握真菌水浸片的制作显微观察丝状真菌和酵母菌的形态显微观察丝状真菌和酵母菌的形态比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态二、实验材料和菌种二、实验材料和菌种1.1.器材：器材：器材：器材：接种针、滴管、载玻片、盖玻片、酒精灯、显微镜接种针、滴管、载玻片、盖玻片、酒精灯、显微镜2.2.菌种：菌种：菌种：菌种：曲霉、根霉、犁头霉、青霉曲霉、根霉、犁头霉、青霉酿酒酵母、红酵母酿酒酵母、红酵母大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌大肠杆菌、
2、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌放线菌放线菌507（平板一套可打开用于显微观察，一套不用打开用于菌落形态（平板一套可打开用于显微观察，一套不用打开用于菌落形态观察）观察）1 1、实验目的要求、实验目的要求、实验目的要求、实验目的要求 学习并掌握水浸片法制备标本片的方法学习并掌握水浸片法制备标本片的方法 观察根霉、黑曲霉、犁头霉和青霉的菌丝形态观察根霉、黑曲霉、犁头霉和青霉的菌丝形态及特征及特征 观察酵母菌的形态观察酵母菌的形态（一）丝状真菌及酵母显微形态观察（一）丝状真菌及酵母显微形态观察三、实验内容三、实验内容2 2、实验原理、实验原理、实验原理、实验原理 真菌形态结构比细菌复杂。习惯上，真菌形
3、态结构比细菌复杂。习惯上，真菌可分为酵母菌和霉菌。真菌可分为酵母菌和霉菌。霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝构成，菌丝分为基内菌丝、气生菌丝。气构成，菌丝分为基内菌丝、气生菌丝。气生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢子，孢子着生部位、排列方式以及孢子形子，孢子着生部位、排列方式以及孢子形态可作为真菌鉴定的重要依据。态可作为真菌鉴定的重要依据。根霉菌丝特化形成假根等特化菌丝根霉菌丝特化形成假根等特化菌丝根霉菌丝特化形成假根等特化菌丝根霉菌丝特化形成假根等特化菌丝 孢囊孢子孢囊孢子犁头霉（接合孢子）酵母菌是单细胞构造，个体形态多为卵
4、圆形、圆柱形，但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以出芽方式生殖。3、实验材料根霉（假根、孢子囊）犁头霉（接合孢子）黑曲霉（分生孢子头）青霉（分生孢子）酵母（试管悬液）4 4、操作步骤、操作步骤、操作步骤、操作步骤（1 1 1 1）根霉、曲霉和犁头霉的水浸片观察）根霉、曲霉和犁头霉的水浸片观察）根霉、曲霉和犁头霉的水浸片观察）根霉、曲霉和犁头霉的水浸片观察p在载玻片上滴加一滴蒸馏水，用接种针以无菌在载玻片上滴加一滴蒸馏水，用接种针以无菌操作方式挑取少许菌丝于蒸馏水中充分展开，盖操作方式挑取少许菌丝于蒸馏水中充分展开，盖上盖玻片（从一边向另一边覆盖，避免产生气泡）上盖玻片（从一边向另一边
5、覆盖，避免产生气泡）。p镜检：用高倍镜（镜检：用高倍镜（4040）观察细胞形态。）观察细胞形态。（2 2 2 2）青霉（切片法）青霉（切片法）青霉（切片法）青霉（切片法）p在载玻片上滴加一滴水，用手术刀（盖玻片代替）在载玻片上滴加一滴水，用手术刀（盖玻片代替）首先在青霉菌落中心划一刀，接着平行线方向很薄首先在青霉菌落中心划一刀，接着平行线方向很薄的位置再划一刀，用接种针挑取一小片菌苔（包含的位置再划一刀，用接种针挑取一小片菌苔（包含基内菌丝），以横截面的方式放置于水中，盖上盖基内菌丝），以横截面的方式放置于水中，盖上盖玻片。玻片。p用高倍镜观察培养基一边的菌丝结构及孢子形态。用高倍镜观察培养基
6、一边的菌丝结构及孢子形态。（3 3 3 3）酵母）酵母）酵母）酵母水浸片水浸片水浸片水浸片p用吸管吸取一滴酵母液（悬浮细胞），滴加在用吸管吸取一滴酵母液（悬浮细胞），滴加在载玻片上，盖上盖玻片。载玻片上，盖上盖玻片。p镜检：用高倍镜观察细胞形态。镜检：用高倍镜观察细胞形态。5、实验结果、实验结果绘图表示丝状真菌、酵母菌的显微形态标注其中的特征性结构1 1、实验目的要求、实验目的要求、实验目的要求、实验目的要求 p观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物具体观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物具体菌种菌落的形态特征。菌种菌落的形态特征。p总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。总结几类微生物菌落的
7、一般特征并能识别。（二）各类微生物菌落特征观察（二）各类微生物菌落特征观察2 2、实验原理、实验原理、实验原理、实验原理 菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖菌落：单个菌体在固体平面培养基上生长繁殖形成的肉眼可见的群体。形成的肉眼可见的群体。特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、特征描述：形状、大小、颜色、边缘、隆起、光泽、质地等。光泽、质地等。细菌菌落特征：细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。酵母菌菌落特征（与细菌相似酵母菌菌落特征（与细菌相似)：比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、粘稠，易用针挑起。多呈乳白色。放线菌特征放线菌特征:致密
8、、坚硬、多皱、不易用针挑起，不透明。孢子成熟后，表面粉末状，干燥(常有土腥味)。3 3、实验步骤、实验步骤分别观察各类微生物的菌落的大小，表面粗糙及含水分状况，边缘，致密程度、透明程度，及厚度等特征，并填写记录表。名称名称颜色颜色含水情况含水情况表面纹理表面纹理 透明度透明度 隆起状况隆起状况 其他（厚薄、边缘）其他（厚薄、边缘）红酵母红酵母/酿酒酵母酿酒酵母大肠杆菌大肠杆菌金黄色葡金黄色葡萄球菌萄球菌枯草杆菌枯草杆菌细菌和酵母菌落形态比较细菌和酵母菌落形态比较细菌和酵母菌落形态比较细菌和酵母菌落形态比较丝状真菌和放线菌菌落形态比较丝状真菌和放线菌菌落形态比较丝状真菌和放线菌菌落形态比较丝状真菌和放线菌菌落形态比较名称名称正面颜色正面颜色 反面颜色反面颜色致密程度致密程度 其它其它曲霉曲霉根霉根霉犁头霉犁头霉青霉青霉放线菌放线菌