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1、作业中的问题作业中的问题实验三、土壤中微生物含量的计算实验三、土壤中微生物含量的计算CFU的计算的计算稀释度10-310-410-5菌落数123平均123平均123平均三角瓶中每毫升悬液中总活细菌=平均菌落数x5x稀释倍数稀释倍数稀释倍数稀释倍数=102稀释倍数稀释倍数=103稀释倍数稀释倍数=104cfu/克湿重土壤每克湿重土壤所含微生物量等同于三角瓶中每克湿重土壤所含微生物量等同于三角瓶中10ml悬液所悬液所含微生物量。含微生物量。cfu/克湿重土壤=从三个稀释度所求得三角从三个稀释度所求得三角瓶中每毫升悬液中总活菌数瓶中每毫升悬液中总活菌数 x 10真菌真菌实验结果记录作业中的问题作业中
2、的问题实验四、革兰氏染色实验四、革兰氏染色对对CFU的认识的认识实验五实验五 真菌形态及真菌形态及微生物菌落形态的观察微生物菌落形态的观察 一、实验目的一、实验目的掌握真菌水浸片的制作掌握真菌水浸片的制作显微观察酵母菌的基本形态及出芽生殖显微观察酵母菌的基本形态及出芽生殖显微观察常见丝状真菌的基本形态显微观察常见丝状真菌的基本形态比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态二、实验菌种酵母：酿酒酵母（白酵母）、红酵母丝状真菌：根霉、曲霉、青霉、犁头霉细菌：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、八叠球菌放线菌：S-10，S-14菌落形态观察菌落形态观察制片观察：制片观察：（平板：一套可打开
3、用于制片观察，一套不能打开用于菌落形态观察）（平板：一套可打开用于制片观察，一套不能打开用于菌落形态观察）酿酒酵母、根霉、曲霉、青霉、犁头霉三、实验原理三、实验原理（一）、真菌形态观察（一）、真菌形态观察 通常把真菌分为酵母菌和丝状真菌(霉菌)。霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝构成，菌丝分为基质菌丝和气生菌丝。气生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢子。孢子着生部位、排列方式以及孢子形态是真菌鉴定的重要依据。曲曲霉霉青青霉霉分生孢子梗分生孢子梗青霉：分生孢子梗青霉：分生孢子梗足细胞足细胞曲霉：分生孢子头曲霉：分生孢子头根霉：孢子囊、匍匐枝和假根根霉：孢子囊、匍匐枝和假根犁头霉：接合孢子犁头霉：接
4、合孢子 A.异宗接合异宗接合 B.同宗接合同宗接合 酵母菌是单细胞构造，个体形态多为卵圆形、圆柱形，但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以出芽方式生殖。酵母菌：出芽酵母菌：出芽酿酒酵母白色念珠菌（假丝酵母）Schizosaccharomyces pombe(fission yeast)裂殖酵母裂殖酵母Saccharomyces cerevisiae(budding yeast)出芽酵母出芽酵母有关酵母菌教材外知识有关酵母菌教材外知识Candidiasis albicans 念珠菌念珠菌 Symptom 症状实例症状实例 有关酵母菌教材外知识有关酵母菌教材外知识四、实验方法四、实验方法直
5、接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。载玻片上滴加一滴水载玻片上滴加一滴水用接种针挑取菌丝用接种针挑取菌丝加盖玻片加盖玻片均匀涂布于水滴中，尽量分散均匀涂布于水滴中，尽量分散作图作图10倍或倍或40倍物镜观察倍物镜观察制作犁头霉水浸标本片时，在制作犁头霉水浸标本片时，在+/-处先去掉表面菌丝，再向下处先去掉表面菌丝，再向下挑（稍微带一点培养基也可），用挑（稍微带一点培养基也可），用50%酒精滴洗，去掉孢子。酒精滴洗，去掉孢子。制作青霉水浸标本时，取菌落边缘白色区域并带一定的培养制作青霉水浸标本时，取菌落边缘白色区域并带一定的培养基，加盖玻片后压片
6、。基，加盖玻片后压片。根霉水浸标本片时可以不用酒精洗。根霉水浸标本片时可以不用酒精洗。1、实验目的要求、实验目的要求 观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物具体菌种菌落的形态特征。总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。（二）各类微生物菌落特征观察（二）各类微生物菌落特征观察v菌落形态：形状，边缘情况菌落形态：形状，边缘情况v大小：大小：v表表面面状状况况：湿湿润润、粘粘稠稠或或干干燥燥，隆隆起起或或扁扁平平，厚厚或或薄薄，是是否否粉末状粉末状v质地：致密或疏松质地：致密或疏松v蔓延程度：蔓延程度：v与培养基结合程度与培养基结合程度v颜色（正面、反面、边沿、中心）颜色（正面、反面、边沿、中心）v
7、气味气味微生物在固体培养基上的群体生长微生物在固体培养基上的群体生长点状点状圆状圆状丝状丝状不规则状不规则状根状根状纺锤状纺锤状全缘全缘波状波状裂片状裂片状缺刻状缺刻状丝状丝状卷曲状卷曲状细菌菌落特征：细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。酵母菌菌落特征（与细菌相似酵母菌菌落特征（与细菌相似)：比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、粘稠，易用针挑起。多呈乳白色，少数呈红色。YeastBacteria放线菌特征放线菌特征:致密、坚硬、多皱、不易用针挑起，不透明。孢子成熟后，表面粉末状，干燥(常有土腥味)。霉菌的菌落特征霉菌的菌落特征比细菌菌落大，由菌丝
8、组成疏松的绒毛比细菌菌落大，由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状，有的无固定大小，状、絮状或蜘蛛网状，有的无固定大小，延至整个培养基中，产色素，使菌落显延至整个培养基中，产色素，使菌落显色。色。2、实验步骤、实验步骤分别观察各类微生物的菌落的大小，表面粗糙及含水分状况，边缘，致密程度、透明程度，及厚度等特征，并填写记录表（格式见实验指导书.74或下一张幻灯片）。（二）、不同微生物菌落形态观察（可参考（二）、不同微生物菌落形态观察（可参考P72)形态特征单细胞生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌形状大小表面隆起透明度边缘颜色结合强度气味五、注意事项五、注意事项u低或高背镜观察即可u盖盖玻片时不要产生气泡u无菌操作六、结果与讨论六、结果与讨论1.绘出五种真菌的形态特征图并注明绘出五种真菌的形态特征图并注明各主要部位名称各主要部位名称2.列表比较微生物的形态特征（细菌、列表比较微生物的形态特征（细菌、酵母菌、放线菌及丝状真菌）酵母菌、放线菌及丝状真菌）3.讨论实验的成败讨论实验的成败