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1、关于微生物培养关于微生物培养第1页,此课件共47页哦(2)按培养基的物)按培养基的物理形态分:理形态分:液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基固体培养基固体培养基一一 基基础础知知识识:(3)按培养基的)按培养基的功能分:功能分:基基础础培养基培养基选择选择培养基培养基鉴别鉴别培养基培养基(1)按培养基的)按培养基的化学成分分:化学成分分:天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基第2页,此课件共47页哦液体培养基:液体培养基:表面生表面生表面生表面生长长长长均匀混均匀混均匀混均匀混浊浊浊浊生生生生长长长长沉淀生沉淀生沉淀生沉淀生长长长长半固体培养基:半固体培养基:(是否运是否运动动)无无
2、无无动动动动力力力力有有有有动动动动力力力力(弥散弥散弥散弥散)固体培养基:菌落固体培养基:菌落第3页,此课件共47页哦选择培养基选择培养基在培养基中加入(缺少)某种化学物质在培养基中加入(缺少)某种化学物质,以以抑制抑制不需要的微生物的生长不需要的微生物的生长,促进促进所需要的微生物的生长。所需要的微生物的生长。用以菌种的分离用以菌种的分离加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加
3、含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物分离自养型微生物鉴别培养基鉴别培养基在培养基中加入某种在培养基中加入某种指示剂或化学药指示剂或化学药品品。用以菌种的鉴别。用以菌种的鉴别。第4页,此课件共47页哦2.培养基的成分培养基的成分 不管哪种培养基,一般都含有不管哪种培养基,一般都含有水水、无机盐无机盐、碳源碳源和和氮源氮源等营养物质。等营养物质。另外还需要满足微生物生长对另外还需要满足微生物生长对pHpH、特殊营养物特殊营养物质质,生长因子生长因子(如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及以及氧气氧气、二氧化碳二氧化碳、渗透压渗透压等等的要求。的要求。第5页,此课
4、件共47页哦练习练习1.不能作为异养微生物碳源的是(不能作为异养微生物碳源的是()A牛肉膏牛肉膏B含碳有机物含碳有机物C石油石油D含碳无机物含碳无机物2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是(是()A碳源碳源B氮源氮源C无机盐无机盐D生长因子生长因子第6页,此课件共47页哦【典例解析典例解析】例例:关于微生物营养物质的叙述中,正确的关于微生物营养物质的叙述中,正确的是是()()A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量 C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供
5、无机盐 D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量第7页,此课件共47页哦编号成分含量粉状硫10g(NH4)2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml例右表是某微生物培养基成分,例右表是某微生物培养基成分,请据此回答:请据此回答:(1 1)右表培养基可培养的微生物)右表培养基可培养的微生物类型是类型是 。(2 2)若不慎将过量)若不慎将过量NaClNaCl加入加入培养基中。如不想浪费此培养基,培养基中。如不想浪费此培养基,可再加入可再加入 ,用于培,用于培养养 (4 4)表中营养成分共有)表中营养成分共有 类。类。(5 5
6、)不论何种培养基,在各种)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的成分都溶化后分装前,要进行的是是 。自养型微生物自养型微生物 含碳有机物含碳有机物 金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 第8页,此课件共47页哦 有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体休眠体,叫,叫做做芽孢芽孢。特点:特点:1 1、对恶劣的环境,如干旱、高温等,有很强的抵抗力对恶劣的环境,如干旱、高温等,有很强的抵抗力 2 2、小而轻,可随风飘散小而轻,可随风飘散 3 3、当环境适宜(如温度、水分适宜)的条件下,芽孢又可以萌发,当环境适宜(如温度、水分适宜)的条
7、件下,芽孢又可以萌发,形成一个细菌形成一个细菌.在生物体的一定部位产生一种特殊的在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖细生殖细胞胞叫孢子。孢子的叫孢子。孢子的特点特点是能是能直接直接长成新个体长成新个体 孢子孢子第9页,此课件共47页哦思考:思考:1.获得纯净培养物的关键获得纯净培养物的关键?2.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?(外来微生物污染外,还有什么目的?(P15旁栏思考)旁栏思考)3.消毒和灭菌有何不同?消毒和灭菌有何不同?4.常用的消毒和灭菌方法有哪些?常用的消毒和灭菌方法有哪些?无菌技术还能有效避免操作者
8、自身被微无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。生物感染。.无菌技术无菌技术防止外来杂菌的入侵防止外来杂菌的入侵第10页,此课件共47页哦 (1 1)消毒:)消毒:用温和的化学或物理方法,杀死物体用温和的化学或物理方法,杀死物体表面或内部的表面或内部的部份微生物部份微生物的过程。的过程。2.2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两者的区别(2 2)灭菌:)灭菌:以强烈的理化因素杀死物体内外以强烈的理化因素杀死物体内外所所有微生物有微生物,达到,达到完全无菌完全无菌的过程。的过程。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。是最
9、重要的技术。第11页,此课件共47页哦1 1、煮沸消毒法煮沸消毒法:100100煮沸煮沸5-6min5-6min2、巴氏消毒法:、巴氏消毒法:70-75 70-75 下煮下煮30min30min或或 80 80 下煮下煮15min15min3、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法:用用75%75%酒精、新洁酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源氯气消毒水源4、紫外线消毒:、紫外线消毒:对实验室空气消毒对实验室空气消毒(1)消毒的方法:消毒的方法:3.3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法第12页,此课件共47页哦灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌:干热灭菌:160-160-1
10、70 170 下加热下加热1-1-2h2h。高压蒸气灭菌:高压蒸气灭菌:100kPa100kPa、121 121 下下维持维持15-30min.15-30min.灭菌的方法:灭菌的方法:第13页,此课件共47页哦比较项目理化因素作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒灭菌列表比较消毒与灭菌列表比较消毒与灭菌较为温和较为温和强强 烈烈能能不能不能部分生活状部分生活状态的微生物态的微生物全部微生物全部微生物第14页,此课件共47页哦1.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?外来微生物污染外,还有什么目的?2.2.
11、请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要,请选择合适的方法。如果需要,请选择合适的方法。(1 1)培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培养皿(2 2)玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管(3 3)实验操作者的双手实验操作者的双手 答:无菌技术还能有效避免操作者自身被答:无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。微生物感染。答:(答:(1)、()、(2)需要灭菌;()需要灭菌;(3)需要消毒)需要消毒。第15页,此课件共47页哦常常识识n1 无菌技术包括:无菌技术包括:n(1)对实验操作)对实验操作空间空间、操作者的、操作者
12、的衣着和手衣着和手进行进行 清洁和消毒清洁和消毒;n(2)将)将培养器皿、接种用具和培养基等培养器皿、接种用具和培养基等器具进行器具进行 灭菌灭菌;n(3)为避免)为避免周围微生物周围微生物污染,实验操作应在污染,实验操作应在 酒精灯火焰附近酒精灯火焰附近 旁进行;旁进行;n(4)避免已灭菌处理的材料用具与)避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品周围物品 相接触。相接触。n2 消毒方法:消毒方法:n(1)日常生活经常用到的是)日常生活经常用到的是 煮沸煮沸 消毒法;消毒法;n(2)对一些)对一些不耐高温不耐高温的液体,则使用的液体,则使用 巴氏巴氏 消毒法(作简要介绍);消毒法(作简要介绍);n
13、(3)对接种室、接种箱或超净工作台对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒首先喷洒 石炭酸或煤酚皂石炭酸或煤酚皂 等溶液以增强消毒效等溶液以增强消毒效果,然后使用果,然后使用 紫外线紫外线 进行物理消毒。进行物理消毒。n(4)实验操作者的)实验操作者的双手双手使用使用 酒精酒精 进行消毒;进行消毒;n(5)饮水水源饮水水源用用 氯气氯气 进行消毒。进行消毒。n3灭菌方法灭菌方法:n(1)接种环、接种针、试管口等使用)接种环、接种针、试管口等使用 灼烧灼烧 灭菌法;灭菌法;n(2)玻璃器皿、金属用具等使用)玻璃器皿、金属用具等使用 干热干热 灭菌法,所用器械是灭菌法,所用器械是 干热灭菌箱干热灭菌箱
14、;n(3)培养基、无菌水等使用)培养基、无菌水等使用 高压蒸汽高压蒸汽 灭菌法灭菌法,所用器械是,所用器械是 高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅。n(4)表面灭菌和空气灭菌等使用)表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线紫外线 灭菌法,所用器械是灭菌法,所用器械是 紫外灯紫外灯。第16页,此课件共47页哦二二.实验操作实验操作(以培养大肠杆菌为例以培养大肠杆菌为例).制备牛肉膏蛋白胨培养基制备牛肉膏蛋白胨培养基1.1.计算计算2.2.称量称量3.3.溶化溶化4.4.灭菌灭菌:将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅,在压力为100kPa100kPa、温度为、温度为121121,灭菌,灭
15、菌151530min30min。5 5.倒平板倒平板:待培养基冷却到待培养基冷却到50 50 左右时,在酒精灯附近左右时,在酒精灯附近倒平板。倒平板。2d2d后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。后观察平板,无杂菌污染才可用来接种。第17页,此课件共47页哦倒倒平平板板操操作作第18页,此课件共47页哦答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形答:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板瓶的温度下降到刚刚不烫手时,就可以进行倒平板了。了。2.2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染
16、培答:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。养基。问题讨论问题讨论1.1.培养基灭菌后,需要冷却到培养基灭菌后,需要冷却到50 50 左右时,才能左右时,才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?第19页,此课件共47页哦3.3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置?平板冷凝后,为什么要将平板倒置?4.4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?为什么?答:答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的
17、培平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上防止皿盖上的水珠落入培养基的水珠落入培养基,造成污染。,造成污染。答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基答:空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。上滋生,因此最好不要用这个平板培养微生物。第20页,此课件共47页哦 关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中,错误的是()关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述中,错误的是()A.A.操作顺序为
18、计算、称量、溶化、倒平板、灭菌操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.B.牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻棒取出称量纸牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻棒取出称量纸C.C.待培养基冷却至待培养基冷却至5050左右时,进行倒平板左右时,进行倒平板D.D.待平板冷却凝固约待平板冷却凝固约5min5min10min10min后,将平板倒过来放置后,将平板倒过来放置第21页,此课件共47页哦.纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌平板划线法平板划线法和和稀释涂布平板法稀释涂布平板法。微生物的接种的微生物的接种的常用接种方法有常用接种方法有:1.1.平板划线的操作方法平板划线的操作方法第22页,此课件共47页哦第2
19、3页,此课件共47页哦答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环,能及时杀划线结束后灼烧接种环
20、,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。操作者。问题讨论问题讨论1.1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?环吗?为什么?第24页,此课件共47页哦2.2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。答:以免接种环温度太高,杀死菌种。3.3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是在作第二次以及
21、其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?从上一次划线的末端开始划线?答:答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。到由单个细菌繁殖而来的菌落。第25页,此课件共47页哦答:答:应从操作的各个细节保证应从操作的各个细节保证“无菌无菌”。例。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要
22、在酒精灯火焰周要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。围等等。问题讨论问题讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第想一想,第2 2步应如何进行无菌操作?步应如何进行无菌操作?2.2.稀释涂布平板的操作方法稀释涂布平板的操作方法第26页,此课件共47页哦三三.结果分析与评价结果分析与评价 .培养基的制作是否合格培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 12
23、d2d后无菌落生长,说后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。.接种操作是否符合无菌要求接种操作是否符合无菌要求如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。.是否进行了及时细致的观察与记录是否
24、进行了及时细致的观察与记录培养培养12h12h12h12h与与与与24h24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。微的变化。第27页,此课件共47页哦4.4.菌种的保存菌种的保存固体斜面培养基上固体斜面培养基上44保存,菌种易被保存,菌种易被污染或产生变异污染或产生变异3.3.微生物的恒温培养微生物的恒温培养.长期保存:长期保存:2020甘油管在甘油管在冷冻箱中保藏冷冻箱中保藏.临时保藏:临时保藏:第28页,此课件共47页哦例例1 1某小组同学为
25、了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。验相关的问题。(1 1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和和 。除此之外,培养基还必须含有。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是的基本成分是 和和 。(2 2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是 。(3 3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水)为了尽快观
26、察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于样品的平板置于 中培养,培养的温度设定中培养,培养的温度设定氮源氮源氮源氮源碳源碳源碳源碳源无机盐无机盐无机盐无机盐水水水水高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌恒温箱恒温箱恒温箱恒温箱第29页,此课件共47页哦在在3737。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。作为对照进行实验。(4 4)培养)培养2020小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有明湖水样品中有 种细菌。一般说来,
27、菌落总数越多,湖水种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越遭受细菌污染的程度越 。(5 5)如果提高培养基中)如果提高培养基中NaClNaCl的浓度,可以用于筛选耐的浓度,可以用于筛选耐 细菌,这种培养基被称为细菌,这种培养基被称为 。无菌水无菌水无菌水无菌水多多多多高高高高选择培养基选择培养基选择培养基选择培养基盐盐盐盐第30页,此课件共47页哦练习对买回来的菌进行扩大培养,首先制备试管培养基,写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料:_其中提供氮源的主要是_;提供能源的主要物质是_;琼脂的作用是_,它不提供营养。牛肉膏、蛋白胨、水、无机盐、琼脂蛋白胨牛肉膏凝固剂第31页,此
28、课件共47页哦练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.第32页,此课件共47页哦练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.比例第33页,此课件共47页哦练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.比例搅拌第34页,此课件共47页哦练习微生物在生长过程中对各种成分所需量不同,故制备培养基时各成分要有合适的_,在烧杯加入琼脂后要不停地_,防止_.比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂第35页,此
29、课件共47页哦练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌,压力为_,温度为_,时间_,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力_,将试管取出。第36页,此课件共47页哦练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌,压力为_,温度为_,时间_,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力_,将试管取出。高压灭菌锅第37页,此课件共47页哦练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌,压力为_,温度为_,时间_,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力_,将试管取出。高压灭菌锅100KPa第38页,此课件共47页哦练习将配制好的培养基
30、转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌,压力为_,温度为_,时间_,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力_,将试管取出。高压灭菌锅100KPa121 第39页,此课件共47页哦练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌,压力为_,温度为_,时间_,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力_,将试管取出。高压灭菌锅100KPa121 15 30min第40页,此课件共47页哦练习将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入_中灭菌,压力为_,温度为_,时间_,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力_,将试管取出。高压灭菌锅100KPa121 15
31、30min自然降至零后 第41页,此课件共47页哦练习使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入 _,把锅内水加热煮沸并将基中原有冷空气彻底排除后将锅密闭.第42页,此课件共47页哦练习使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入 _,把锅内水加热煮沸并将基中原有冷空气彻底排除后将锅密闭.适量水第43页,此课件共47页哦练习从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯_焰灭菌.并且待接种环_后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管放入_冰箱中保藏.第44页,此课件共47页哦练习从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯_焰灭菌.并且待接种环_后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管放入_冰箱中保藏.外第45页,此课件共47页哦练习从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯_焰灭菌.并且待接种环_后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管放入_冰箱中保藏.外冷却第46页,此课件共47页哦感谢大家观看第47页,此课件共47页哦