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1、(1)(1)植物组织培养植物组织培养(2)(2)动物细胞培养和体细胞克隆动物细胞培养和体细胞克隆(3)(3)动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体细胞工程细胞工程 是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过通过细胞水平或细胞器水平细胞水平或细胞器水平上的操作上的操作，按照人们的，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。门综合科学技术。细细胞胞工工程程应用的原理和方法应用的原理和方法细胞生物学和细胞生物学和分子生物学分子生物学细胞整体水平或胞整体水平或细胞器水平胞
2、器水平按照人们的意愿来改按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质变细胞内的遗传物质或获得细胞产品或获得细胞产品概念概念分类分类植物细胞工程植物细胞工程研究的目的研究的目的研究的水平研究的水平动物细胞工程动物细胞工程前者前者是是细胞水平或胞水平或细胞器水平上生物技胞器水平上生物技术,后者后者是分子水平上的生物技是分子水平上的生物技术。克隆多莉羊技术是克隆多莉羊技术是 水平上的技术，水平上的技术，培育抗虫棉是培育抗虫棉是 水平上的技术。水平上的技术。细胞工程与基因工程相比：细胞工程与基因工程相比：细胞细胞分子分子思考思考:植物细胞工程的理论基础植物细胞工程的理论基础是什么？通常采用的技术手段是什么？通
3、常采用的技术手段有哪些？有哪些？所采用技术所采用技术的理论基础的理论基础 植植物物细细胞胞工工程程通通常常采采用用的的技技 术术 手手 段段 植物组织培养植物组织培养 植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物细胞的全能性植物细胞的全能性2 2、理论基础：、理论基础：细胞的全能性细胞的全能性1 1、植物组织培养的概念、植物组织培养的概念 在无菌和人工控制的条件下在无菌和人工控制的条件下,将离体的植将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工控制的培物器官、组织、细胞，培养在人工控制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。愈伤组织、丛
4、芽，最终形成完整的植株。细胞的全能性细胞的全能性1、概念、概念1）受精卵）受精卵生殖细胞生殖细胞体细胞体细胞：生物体的细胞具有使后代细胞形成生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性，叫做细胞的完整个体的潜能的特性，叫做细胞的全能性。全能性。2、原因、原因3、全能性的比较、全能性的比较：从理论上讲，每个细胞都包含该物种从理论上讲，每个细胞都包含该物种的全部遗传物质（全部基因），所以的全部遗传物质（全部基因），所以每个活细胞都应具有全能性每个活细胞都应具有全能性 。2）植物细胞全能性一般比动物细胞强）植物细胞全能性一般比动物细胞强 在一个生物体内，细胞没有表现出在一个生物体内，细胞没有表
5、现出 全能性，原因是（全能性，原因是（）细胞失去了全能性细胞失去了全能性细胞中的基因部分丢失细胞中的基因部分丢失 细胞中的基因选择性表达细胞中的基因选择性表达细胞中的基因变异不同细胞中的基因变异不同C 科学研究表明，处于科学研究表明，处于离体离体状态的植物状态的植物活细活细胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件胞，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植的植株。人工条件下实现的这一过程，就是植物组织培养。物组织培养。全能性表现的条件？全能性表现的条件？菊花的组织培养菊花的组织培
6、养植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图上面的示意图中还有什么地方不够完善的？上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体(一一)植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程愈伤组织愈伤组织愈伤组织是通过细胞分裂细胞分裂形成的，其细胞排列疏松而无规则疏松而无规则，高度液泡化液泡化呈无定形无定形状态的薄壁薄壁细胞。（二）影响植物组织培养的因素（二）影响植物组织培养的因素 材料的选择、材料的选择、营养成分、激素、
7、一定的外界因素（温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等）。外植体选择外植体选择脱分化难易程度因植物种类，脱分化难易程度因植物种类，器官来源和生长状况不同有很器官来源和生长状况不同有很大差异，一般烟草，胡萝卜，大差异，一般烟草，胡萝卜，植物花和幼嫩组织脱分化较易植物花和幼嫩组织脱分化较易MS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例同微生物培养基相比，同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？培养基的配方有哪些明显的不同？以下培养基出现的现象说明什么问题？激素配比对组织培养的影响激素配比对组织培养的影响在培养基中需要添加在培养基中需要添加生长素生长素和和细胞分裂素细胞分裂素等植物
8、激素，其等植物激素，其浓度浓度、使用的先后顺序使用的先后顺序、用量的比例用量的比例等都影响结果。等都影响结果。高高 利于根分化、抑制芽的形成利于根分化、抑制芽的形成生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素 低低 利于芽的形成利于芽的形成适中适中 利于愈伤组织的形成利于愈伤组织的形成 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。物生长必须的大量元素和微量元素两大类。1.同微生物培养基相比，同微生物培养基相比，MS培养基
9、的配方有哪些明显的不同？培养基的配方有哪些明显的不同？2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的适宜条件是什么？适宜条件是什么？组织的脱分化及愈伤组织的再分化。组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是化的最重要因素是植物激素植物激素。1、外植体带菌、外植体带菌2、培养基及接种、培养基及接种器具灭菌不彻底器具灭菌不彻底3、接种操作时带入、接种操作时带入4、环境不清洁、环境不清洁组织培养污染的主要途径及怎样预防污染？组织培养污染的主要途径及怎样预防污染？污染的预防措施污染的预防措施（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁试评价下列操作正确与否试评价下列操作正确与否植物组织培养过程外植体外植体（离体的植物器官、组织、细胞或原生质体离体的植物器官、组织、细胞或原生质体）脱分化（去分化）脱分化（去分化）愈伤组织愈伤组织再分化再分化根、芽等器官根、芽等器官(或胚状体或胚状体)植物幼苗植物幼苗完整植物体完整植物体