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1、一、概念：一、概念：指在无游离氧环境中生长或生长最佳的细菌。指在无游离氧环境中生长或生长最佳的细菌。第1页/共33页(一一)根据厌氧菌对氧的敏感程度，可将厌氧根据厌氧菌对氧的敏感程度，可将厌氧菌菌 分为三类：分为三类：1、专性厌氧菌（、专性厌氧菌（obligate anaerobe）：）：在降低氧分压的条件下才能生长。在降低氧分压的条件下才能生长。2、微需氧菌：、微需氧菌：在低氧压（在低氧压（56）生长最好，氧压大于）生长最好，氧压大于10对细菌有抑制作用。对细菌有抑制作用。3、耐氧菌：、耐氧菌：在厌在厌O2环境中生长良好，在空气环境中，环境中生长良好，在空气环境中，在新鲜配制的固体培养基表面
2、微弱生长。在新鲜配制的固体培养基表面微弱生长。第2页/共33页1 1、缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶：细菌在、缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶：细菌在有氧代谢中产生对细菌有毒的代谢产物（氧毒），需氧菌和有氧代谢中产生对细菌有毒的代谢产物（氧毒），需氧菌和兼性厌兼性厌O O2 2菌可产生大量的过氧化物歧化酶、过氧化物酶，这菌可产生大量的过氧化物歧化酶、过氧化物酶，这些酶可清除氧毒，厌氧菌不产生这些酶，因而不能在有氧的些酶可清除氧毒，厌氧菌不产生这些酶，因而不能在有氧的条件下生存。条件下生存。产毒：产毒：解毒：解毒：O O2 2 eOeO2 2-2O2O2 2-2H2H+O
3、O2 2+H+H2 2O O2 2 O O2 2H H2 2O O2 2OHOH-+OH+OH+O+O2 2 H H2 2O O2 2H H2 2O O2 2 2H2H2 2O O +O+O2 2 O O2 2 OHOHOHOH-+O+O2 2 H H2 2O O2 2H H2 2R R 2H 2H2 2O O +R+R注：注：O O2 2-超氧化物阴离子（毒性最强）超氧化物阴离子（毒性最强）（二）厌氧生长的机制：（二）厌氧生长的机制：超氧化物歧化酶过氧化氢酶过氧化物酶第3页/共33页2、缺乏细胞色素和细胞色素氧化酶：、缺乏细胞色素和细胞色素氧化酶：细胞色素和细胞色素氧化酶氧化还细胞色素和细胞
4、色素氧化酶氧化还原电势很高。有氧条件下才能氧化培养基原电势很高。有氧条件下才能氧化培养基中的营养物质，产生能量，维持细菌生长中的营养物质，产生能量，维持细菌生长繁殖，厌氧菌没有这些酶类，故不能在有繁殖，厌氧菌没有这些酶类，故不能在有氧条件下生存。氧条件下生存。（二）厌氧生长的机制：第4页/共33页二、厌氧菌的种类：二、厌氧菌的种类：种类（31属、245种)芽孢厌氧菌 (10)无芽孢厌氧菌 （90）产气荚膜B 气性坏疽 破伤风B 破伤风 肉毒B 肉毒中毒球菌杆菌（50）G G球菌杆菌第5页/共33页三、厌氧菌培养原则：三、厌氧菌培养原则：、标本的收集：、标本的收集：正常无菌的部位采集的标本：血、
5、胸腔抽正常无菌的部位采集的标本：血、胸腔抽出液、心包液、腹腔液、关节液、胆汁、外科手出液、心包液、腹腔液、关节液、胆汁、外科手术取出脓汁、深部脓抽出物、膀胱穿刺抽出的尿术取出脓汁、深部脓抽出物、膀胱穿刺抽出的尿液。液。被正常菌群污染的标本不宜做厌氧培养。被正常菌群污染的标本不宜做厌氧培养。、标本的运送：、标本的运送：注意事项：注意事项：1 1、标本绝对不可被正常菌群污染。、标本绝对不可被正常菌群污染。2 2、标本避免暴露空气或尽量缩短与空气接触时、标本避免暴露空气或尽量缩短与空气接触时间。间。第6页/共33页、厌氧菌培养原则、厌氧菌培养原则第7页/共33页四、无芽孢厌氧菌：四、无芽孢厌氧菌：(
6、一一)、主要无芽孢厌氧菌及其分布（表一）：主要无芽孢厌氧菌及其分布（表一）：无芽孢厌氧菌群无芽孢厌氧菌群皮肤皮肤口腔口腔胃肠道胃肠道泌尿生殖道泌尿生殖道革兰阳性杆菌革兰阳性杆菌 双歧杆菌属双歧杆菌属优杆菌属优杆菌属乳杆菌属乳杆菌属 丙酸杆菌属丙酸杆菌属革兰阳性球菌革兰阳性球菌粪球菌属粪球菌属 消化球菌属消化球菌属 消化链球菌属消化链球菌属第8页/共33页四、无芽孢厌氧菌：四、无芽孢厌氧菌：(一一)、主要无芽孢厌氧菌及其分布（二）：主要无芽孢厌氧菌及其分布（二）：无芽孢厌氧菌群无芽孢厌氧菌群皮肤皮肤口腔口腔胃肠道胃肠道泌尿生殖道泌尿生殖道革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌类杆菌属类杆菌属梭杆菌属梭杆菌属
7、卟啉单胞菌属卟啉单胞菌属 普雷沃菌属普雷沃菌属革兰阴性球菌革兰阴性球菌韦荣菌属韦荣菌属第9页/共33页(二二)、无芽孢厌氧菌的意义、无芽孢厌氧菌的意义：1 1、与需氧菌和兼性厌氧菌构成人体正常菌丛、与需氧菌和兼性厌氧菌构成人体正常菌丛（群），是正常菌群的优势菌（以人体四大菌（群），是正常菌群的优势菌（以人体四大菌库为例）库为例）第10页/共33页、促进、促进FeFe+、VitBVitB的吸收的吸收 EhEh有利于有利于FeFe+的吸收的吸收 (无菌动物则不能吸收无菌动物则不能吸收)PH PH改变，有利于改变，有利于VitDVitD的吸收的吸收 胆固醇、脂肪、蛋白质、类脂、尿素等物质吸收和代谢均
8、有正常菌群参加。胆固醇、脂肪、蛋白质、类脂、尿素等物质吸收和代谢均有正常菌群参加。2、正常菌群与人体生命关系密切：双歧细菌第11页/共33页、与人体免疫的关系：、与人体免疫的关系：H H2 2O O2 2的作用：唾液链球菌产生的作用：唾液链球菌产生H2O2H2O2，可拮可拮抗抗 白喉杆菌、脑双球菌生长白喉杆菌、脑双球菌生长 有机酸作用：脆弱类有机酸作用：脆弱类B B、双歧、双歧B BPHPH、Eh Eh 不利于需氧菌生长。不利于需氧菌生长。占位性保护作用：封闭了致病菌的侵入门占位性保护作用：封闭了致病菌的侵入门户。户。营养竞争作用：营养竞争作用：免疫源性作用：正常菌群（免疫源性作用：正常菌群（
9、AgAg）机体免疫系统成机体免疫系统成熟熟 促癌、抑癌作用。促癌、抑癌作用。与人体衰老的关系：双歧杆菌具有抗衰老作用。与人体衰老的关系：双歧杆菌具有抗衰老作用。生物 拮抗的 作用第12页/共33页3 3、厌氧菌作为肿瘤基因治疗转移的载体。、厌氧菌作为肿瘤基因治疗转移的载体。厌氧菌不仅对肿瘤有直接的溶瘤作用，厌氧菌不仅对肿瘤有直接的溶瘤作用，而且具有良好的肿瘤靶向定植性。而且具有良好的肿瘤靶向定植性。利用厌氧菌将目的基因靶向性导入肿利用厌氧菌将目的基因靶向性导入肿瘤组织，即可最大程度地发挥抑癌效应，瘤组织，即可最大程度地发挥抑癌效应，同时又尽量减少对正常组织地损害。同时又尽量减少对正常组织地损害
10、。第13页/共33页(三三)、无芽孢厌氧菌感染机体的条件、特、无芽孢厌氧菌感染机体的条件、特点及所致疾病：点及所致疾病：1、感染的条件：全身免疫功能下降，如肿瘤、糖尿病、胶原性疾病等 局部防御屏障受到破坏，如拔牙、外科手术、肠穿孔、开放性骨折等。组织缺血、缺氧及Eh降低：局部血管受损、水肿、肿瘤压迫、包扎过紧等。第14页/共33页2 2、无芽孢厌氧菌的致病物质、无芽孢厌氧菌的致病物质毒力因子毒力因子细菌细菌 粘附素粘附素 荚膜荚膜脆弱类杆菌、产黑素普氏菌脆弱类杆菌、产黑素普氏菌 菌毛菌毛脆弱类杆菌、牙龈卟啉单胞菌脆弱类杆菌、牙龈卟啉单胞菌 血凝素血凝素牙龈卟啉单胞菌、核梭杆菌牙龈卟啉单胞菌、核
11、梭杆菌 抗有毒氧基团抗有毒氧基团 超氧化物歧化酶超氧化物歧化酶多种无芽孢厌氧菌多种无芽孢厌氧菌 触酶触酶多种无芽孢厌氧菌多种无芽孢厌氧菌 抗吞噬作用抗吞噬作用 荚膜荚膜脆弱类杆菌、产黑素普氏菌脆弱类杆菌、产黑素普氏菌 IgA、IgM、IgG蛋白酶蛋白酶某些卟啉单胞菌和普雷沃菌某些卟啉单胞菌和普雷沃菌 脂多糖脂多糖脆弱类杆菌、某些梭杆菌脆弱类杆菌、某些梭杆菌 挥发性脂肪酶挥发性脂肪酶多种无芽孢厌氧菌多种无芽孢厌氧菌第15页/共33页3 3、所致疾病：、所致疾病：无芽孢厌氧菌感染无特殊的临床表现。无芽孢厌氧菌感染无特殊的临床表现。感染遍及全身各器官及组织。感染遍及全身各器官及组织。化脓性炎症、菌血
12、症、败血症。化脓性炎症、菌血症、败血症。无芽孢厌氧菌感染率达无芽孢厌氧菌感染率达100%100%的疾病有：的疾病有：牙周脓肿、扁桃体周围脓肿、肺脓肿、肛旁脓肿、牙周脓肿、扁桃体周围脓肿、肺脓肿、肛旁脓肿、急性坏死性小肠炎。急性坏死性小肠炎。达达80%80%左右的疾病有：左右的疾病有：慢性乳突炎、口腔和牙源性感染、阑尾炎慢性乳突炎、口腔和牙源性感染、阑尾炎 并发腹并发腹膜炎、膜炎、腹腔术后感染、脑脓肿等。腹腔术后感染、脑脓肿等。第16页/共33页临床标本中常见致病厌氧菌的分离百分临床标本中常见致病厌氧菌的分离百分率率数数分离分离百分率百分率数数分离分离百分率百分率脆弱类杆菌群脆弱类杆菌群1413
13、4.8脆弱类杆菌脆弱类杆菌7719.0多形类杆菌多形类杆菌123.0普通类杆菌普通类杆菌102.4吉氏类杆菌吉氏类杆菌102.4卵园类杆菌卵园类杆菌61.5单行类杆菌单行类杆菌30.7未能定种未能定种235.7其他类杆菌其他类杆菌产色素产色素266.4不产色素不产色素4511.1梭状杆菌梭状杆菌327.9消化链球菌消化链球菌11728.9梭芽孢菌梭芽孢菌92.2无芽孢革兰氏阳性杆菌无芽孢革兰氏阳性杆菌204.9革兰氏阴性球菌革兰氏阴性球菌153.7第17页/共33页各种感染厌氧菌的发生率各种感染厌氧菌的发生率第18页/共33页种类：破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒杆菌。种类：破伤风杆菌、产气荚膜
14、杆菌、肉毒杆菌。特点：特点：外源性感染。外源性感染。创伤感染中重要影响。创伤感染中重要影响。有特定病种，出现典型症状。有特定病种，出现典型症状。四、厌氧芽孢杆菌第19页/共33页 破伤风菌引起破伤风，是一种古老的疾破伤风菌引起破伤风，是一种古老的疾病，病死率高。病，病死率高。WHO1981年报告，全世界每年报告，全世界每年约有年约有100万人死于破伤风。万人死于破伤风。细菌细菌 厌氧伤口繁殖厌氧伤口繁殖外毒素外毒素骨骼骨骼肌痉挛肌痉挛肌张力肌张力,称破伤风或七日风。称破伤风或七日风。破伤风杆菌（Clostridum tetani)创伤、旧法接生第20页/共33页一、主要生物学特性：一、主要生物
15、学特性：形态、染色形态、染色:G G细长杆菌、无荚膜、芽孢呈鼓槌细长杆菌、无荚膜、芽孢呈鼓槌状状.专性厌氧菌：血平板上呈羽毛状菌落，菌落中专性厌氧菌：血平板上呈羽毛状菌落，菌落中央紧密，外周疏松，扁平，边缘不整齐，血平板央紧密，外周疏松，扁平，边缘不整齐，血平板上有溶血环。上有溶血环。抵抗力：强，对热（抵抗力：强，对热（1211512115、1506015060）对干燥及一般化学消毒剂有较强抵）对干燥及一般化学消毒剂有较强抵抗力，在土壤及干燥中存活时间长，可达数十年。抗力，在土壤及干燥中存活时间长，可达数十年。第21页/共33页破伤风芽孢梭菌、鼓槌状芽孢第22页/共33页肉毒芽孢梭菌、网球拍状
16、芽孢第23页/共33页二、致病性与免疫性二、致病性与免疫性 发病条件：创伤（脐带）发病条件：创伤（脐带）厌氧伤口感染。厌氧伤口感染。厌氧性伤口形成条件：厌氧性伤口形成条件：1 1、伤口窄而深：子弹盲管伤，锈钉伤等；、伤口窄而深：子弹盲管伤，锈钉伤等；2 2、脏及伴血循环障碍，有异物（泥土、杂物）、脏及伴血循环障碍，有异物（泥土、杂物）、坏死组织多；坏死组织多；3 3、混合感染：需氧菌与厌氧菌混合感染。、混合感染：需氧菌与厌氧菌混合感染。第24页/共33页 致病因素与致病条件：致病因素与致病条件：1 1、致病因素：破伤风痉挛毒素、致病因素：破伤风痉挛毒素(tetanospasmin)(tetan
17、ospasmin)破伤风溶血毒素破伤风溶血毒素(tetanolysin)(tetanolysin)2 2、破伤风痉挛毒素的结构与致病过程。、破伤风痉挛毒素的结构与致病过程。3 3、所致疾病：破伤风、所致疾病：破伤风 表现：全身骨骼肌兴奋性增高，张口困难，表现：全身骨骼肌兴奋性增高，张口困难，牙关紧闭，苦笑面容，颈项强直，角弓反张，呼牙关紧闭，苦笑面容，颈项强直，角弓反张，呼吸困难，最后窒息死亡。吸困难，最后窒息死亡。免疫性：病后免疫力不牢固，可再感染、患病免疫性：病后免疫力不牢固，可再感染、患病后仍需接种破伤风类毒素。后仍需接种破伤风类毒素。第25页/共33页 破伤风杆菌痉挛毒素结构破伤风杆菌
18、痉挛毒素结构 破伤风痉挛毒素由质粒编码，破伤风痉挛毒素由质粒编码，M.W160KDM.W160KD蛋白质，蛋白质，不耐热（不耐热（65306530即破坏），毒素由二条肽链组成，即破坏），毒素由二条肽链组成，即重链（即重链（105105KDKD）和轻链（和轻链（5555KDKD）。）。重链和轻链中有连重链和轻链中有连接肽对蛋白质敏感。接肽对蛋白质敏感。第26页/共33页 破伤风杆菌痉挛毒素结构破伤风杆菌痉挛毒素结构 轻链为毒性部分，为锌内肽酶（轻链为毒性部分，为锌内肽酶（Zine Zine endopeptidase),endopeptidase),重链为具有结合和运输功能，重链为具有结合和运输
19、功能，HcHc能与能与神经细胞表面受体特异性结合；使毒素进入神经细胞。神经细胞表面受体特异性结合；使毒素进入神经细胞。第27页/共33页破伤风杆菌繁殖分泌痉挛毒素运动神经 终板吸收中枢神经与脊髓内抑制性中间神经元突触前体膜上GMI结合阻断甘氨酸能中间神经元-氨基酸能神经元甘氨酸 -氨基酸骨骼肌痉挛创伤性感染 (厌氧性伤口)神经纤维 间隙扩散淋巴吸收血液释放导致第28页/共33页 破破伤伤风风毒毒素素的的致致病病作作用用第29页/共33页三、防治原则三、防治原则 一般预防：正确处理伤口（伤口清创、扩创、迅速破一般预防：正确处理伤口（伤口清创、扩创、迅速破坏厌氧性伤口）；新法接生。坏厌氧性伤口）；
20、新法接生。特异性预防：特异性预防：人工自动免疫：类毒素人工自动免疫：类毒素(白、百、破三联疫苗白、百、破三联疫苗)易感人群：儿童易感人群：儿童 3 36 6个月、军人、建筑工人等，间个月、军人、建筑工人等，间隔隔6 6周或周或6 6个月加强免疫一次，免疫力维持个月加强免疫一次，免疫力维持1212年。年。人工被动免疫：应急情况下使用人工被动免疫：应急情况下使用TATTAT或类毒素或类毒素TATTAT 治疗：治疗：1 1、早期使用足量、早期使用足量TAT(10TAT(102020万万)、皮试，阳性者、皮试，阳性者使用脱过敏疗法。使用脱过敏疗法。2 2、抗生素。、抗生素。3 3、对症治疗：定期使用镇静剂。、对症治疗：定期使用镇静剂。第30页/共33页第31页/共33页谢谢 谢谢!第32页/共33页感谢您的观看！第33页/共33页