动物实验技术优秀PPT.ppt

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1、动物实验技术第1页，本讲稿共185页2医学实验动物学医学实验动物学前言前言一个一个 、两个、两个中心中心 主题主题第2页，本讲稿共185页3一个中心一个中心标标准准化化第3页，本讲稿共185页4标准化标准化动物动物标准化标准化实验实验标准化标准化第4页，本讲稿共185页5实验动物动物动物实验实验两个主题两个主题第5页，本讲稿共185页6动物标准化动物标准化饲养管理饲养管理（生产）（生产）营营养养基础基础疾病预防疾病预防根本根本选种选种,育种育种关键关键质量控制质量控制遗传控制遗传控制微生物微生物,寄生虫控制寄生虫控制环境控制环境控制营养控制营养控制第6页，本讲稿共185页7实验标准化实验标准化

2、实验条件实验条件实验技术实验技术第7页，本讲稿共185页8动物实验动物实验通过生物学手段，研究动物实验过程中的反应、通过生物学手段，研究动物实验过程中的反应、表现、发生、发展规律以及有关的技术问题表现、发生、发展规律以及有关的技术问题,并将结果并将结果推论到人的过程。推论到人的过程。第8页，本讲稿共185页9动物实验技术动物实验技术：研究动物实验所需的各种条件、方法、技术，以保证取得科学的、完整的、先进的实验结果。第9页，本讲稿共185页10动物实验的要求动物实验的要求.1、科学性、科学性2、经济性、经济性3、伦理性、伦理性第10页，本讲稿共185页11科学性科学性要求要求 标准化的动物标准化

3、的动物 标准化的实验条件标准化的实验条件 标准化的操作规程标准化的操作规程第11页，本讲稿共185页12经济性经济性要求要求 动物动物的选择的选择实验方法实验方法的选择的选择第12页，本讲稿共185页13伦理性伦理性要求要求动物福利动物福利3R原则原则第13页，本讲稿共185页14第一讲第一讲实验前的准备实验前的准备内容内容:1、实验条件的准备、实验条件的准备2、实验技术的准备、实验技术的准备3、实验动物的准备、实验动物的准备第14页，本讲稿共185页15第一节第一节动物实验条件的准备动物实验条件的准备一一动物饲养条件的准备动物饲养条件的准备动动物物实实验验过过程程中中，需需要要一一个个观观察

4、察动动物物反反应应的的饲饲养养场场所所，既既动动物物观观察察室室。不不同同等等级级的的动动物物实验，需要不同环境条件的动物观察室。实验，需要不同环境条件的动物观察室。第15页，本讲稿共185页16（一）（一）普通动物实验观察室环境设施条件要普通动物实验观察室环境设施条件要求求环境特点环境特点:1、开放系统、开放系统2、环境和微生物控等级较低、环境和微生物控等级较低3、不能完全控制传染因子、不能完全控制传染因子。第16页，本讲稿共185页17（二）（二）清洁动物实验观察室环境设施条件要求清洁动物实验观察室环境设施条件要求环境特点环境特点：1、屏障或半屏屏障或半屏障系统障系统2、所有实验用品所有实

5、验用品经灭菌处理经灭菌处理3、实验人员进出要严格按屏障系统操作规程实验人员进出要严格按屏障系统操作规程操作操作必需设备：必需设备：超净工作台超净工作台第17页，本讲稿共185页18(三三）SPF级级以以上上动动物物实实验验观观察察室室环环境境设设施施条条件要求件要求环境特点环境特点：1、屏障系统或隔离系统。、屏障系统或隔离系统。2、所有实验用品经严格灭菌处理。所有实验用品经严格灭菌处理。3、实验人员要严格按隔离系统操作规程操作。实验人员要严格按隔离系统操作规程操作。第18页，本讲稿共185页19清洁级和清洁级和SPF级动物实验饲养设施级动物实验饲养设施1、屏障系统饲养室、屏障系统饲养室2、空气

6、层流架和、空气层流架和IVC系统系统3、有过滤帽的饲养盒、有过滤帽的饲养盒第19页，本讲稿共185页20二、实验场地的准备二、实验场地的准备实验操作室实验操作室动物手术室动物手术室细胞培养室细胞培养室其他特殊观察室其他特殊观察室第20页，本讲稿共185页21三三、实验药品、试剂的准备实验药品、试剂的准备第21页，本讲稿共185页22四、实验器械的准备四、实验器械的准备实验器械准备得充分、适当，有助于实验的顺实验器械准备得充分、适当，有助于实验的顺利完成。利完成。不同类型、部位的实验使用的实验器械种不同类型、部位的实验使用的实验器械种类、数量不尽一致。类、数量不尽一致。实验器械包括完成实验所需要

7、的检测仪器、实实验器械包括完成实验所需要的检测仪器、实验时动物的固定器械、动物外科手术器械验时动物的固定器械、动物外科手术器械.第22页，本讲稿共185页23（一）（一）实验仪器设备根据实验的目的、要实验仪器设备根据实验的目的、要求、内容不同而不同。求、内容不同而不同。实验前应检查是否实验前应检查是否准备就绪。准备就绪。第23页，本讲稿共185页24(二二)常用动物外科手术器械常用动物外科手术器械（三）手术器械的消毒（三）手术器械的消毒1、煮沸灭菌法、煮沸灭菌法、2、高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法3、化学药品灭菌法。、化学药品灭菌法。第24页，本讲稿共185页25（四）敷料、手术巾、手术衣、帽、

8、口（四）敷料、手术巾、手术衣、帽、口罩的消毒罩的消毒第25页，本讲稿共185页26五五.手术人员的准备手术人员的准备为为了了保保证证无无菌菌手手术术的的进进行行,手手术术人人员员应应作作一一系系列列的的无无菌菌的的准准备备。不不管管做做什什么么等等级级动动物物的手术，都应该遵循无菌手术的基本原则。的手术，都应该遵循无菌手术的基本原则。（一）手术所需人数（一）手术所需人数（二）（二）更衣更衣（三）（三）手、臂的清洁和消毒手、臂的清洁和消毒第26页，本讲稿共185页27第二节第二节动物实验技术的准备动物实验技术的准备一一动物实验理论知识的准备动物实验理论知识的准备（一）了解实验用动物的基础知识（一

9、）了解实验用动物的基础知识实实验验用用动动物物包包括括实实验验动动物物、家家畜畜家家禽禽及及部部分分野野生生动动物物。特特别别是是要要熟熟悉悉动动物物的的生生物物学学特特性性，解解剖剖生生理理结结构构，这这对对开开展展动动物物实实验验研研究究是是十十分分有益的。有益的。第27页，本讲稿共185页28（二二）掌掌握握动动物物实实验验的的基基础础知知识识和和基基本本技能技能动物实验是一项系统的工作，涉及各种实验技术、实验方法、实验手段、以及相关的技术标准。第28页，本讲稿共185页29二二、实验技能的准备、实验技能的准备 全程预试验：全程预试验：演习整个实验过程演习整个实验过程局部预试验：局部预试

10、验：训练技术难点训练技术难点预试验预试验.第29页，本讲稿共185页30第三节第三节实验动物的选择实验动物的选择实实验验动动物物的的选选择择是是医医学学研研究究中中首首要要考考虑虑的的问问题题。选选择择恰恰当当与与否否关关系系到到课课题题的的质质量量，经经费费开开支支，研研究究途途径径及及方方法法的的简简繁繁，甚甚至至影影响到课题的成败及研究结果的正确性。响到课题的成败及研究结果的正确性。第30页，本讲稿共185页31一一选择原则选择原则（一）相似性原则（一）相似性原则在在医医学学研研究究中中选选用用那那些些生生物物学学特特性性和和解解剖剖生理特点与人类相似的实验动物更具有实际意义。生理特点与

11、人类相似的实验动物更具有实际意义。第31页，本讲稿共185页321、结构和功能的相似性、结构和功能的相似性在可能的情况下，尽量选用那些在可能的情况下，尽量选用那些生物学特性生物学特性和和解剖生理特解剖生理特点与点与人类相似人类相似的实验动物。一般说的实验动物。一般说来，实验动物愈高等，进化程度愈高，其机能、来，实验动物愈高等，进化程度愈高，其机能、代谢、结构愈复杂，反应就愈接近人类。代谢、结构愈复杂，反应就愈接近人类。第32页，本讲稿共185页332、年龄状态的相似性、年龄状态的相似性实验动物的寿命与人具有很大的差异，实验动物的寿命与人具有很大的差异，但都可以找到与人的生长发育阶段相对应的但都

12、可以找到与人的生长发育阶段相对应的时期。时期。第33页，本讲稿共185页343、群体分布的相似性、群体分布的相似性人类群体属于人类群体属于自然分布自然分布群体类型。在以群体类型。在以群体为研究对象的课题中，要考虑选择与人群体为研究对象的课题中，要考虑选择与人类群体类群体基因型基因型及及表现型表现型分布类型相似的动物。分布类型相似的动物。第34页，本讲稿共185页354.生态或健康状况的相似性生态或健康状况的相似性在动物的在动物的遗传、环境和营养控制相同遗传、环境和营养控制相同的的情况下，其情况下，其微生物控制和健康状况微生物控制和健康状况对实验对实验的影响就非常重要。的影响就非常重要。一般无菌

13、动物是饲养在一般无菌动物是饲养在超常生态超常生态环境条环境条件的动物，用于一些特殊的研究。件的动物，用于一些特殊的研究。SPF动物和清洁动物是饲养在动物和清洁动物是饲养在健康生态健康生态环境条件下的动物，用于多数科学研究。环境条件下的动物，用于多数科学研究。第35页，本讲稿共185页365.疾病特点的相似性疾病特点的相似性实实验验动动物物有有许许多多自自发发或或诱诱发发性性疾疾病病能能局局部部或或全全部部地地反反映映与与人人类类类类似似的的疾疾病病过过程程和和特特点点，可可用于研究相关的人类疾病。用于研究相关的人类疾病。第36页，本讲稿共185页376.操作实感的相似性操作实感的相似性体型大的

14、动物用于体型大的动物用于外科手术外科手术或或教学示教教学示教中比体型小的动物在操作实中比体型小的动物在操作实感更接近人类。感更接近人类。小香猪第37页，本讲稿共185页38（二）特殊性原则（二）特殊性原则1、动物解剖、生理的特殊性、动物解剖、生理的特殊性不不同同种种系系的的动动物物的的解解剖剖生生理理特特征征既既有有共共性性又又存存在在差差异异，充充分分利利用用这这些些共共性性和和差差异异，并并符符合合实实验验目目的的要求，是保证实验成功的关键。要求，是保证实验成功的关键。第38页，本讲稿共185页392、对刺激反应的特殊性、对刺激反应的特殊性不同种系的实验动物对相同因素的不同种系的实验动物对

15、相同因素的刺激反应既有刺激反应既有共同性的一面，也存在一些特殊反应共同性的一面，也存在一些特殊反应，同样的刺激同样的刺激对一些动物敏感，但对另外一些动物可能不敏感。对一些动物敏感，但对另外一些动物可能不敏感。因此在实验研究中选用那些有特殊反应、对实验因此在实验研究中选用那些有特殊反应、对实验研究敏感的动物作为实验对象，也是保证实验成研究敏感的动物作为实验对象，也是保证实验成功的重要因素。功的重要因素。第39页，本讲稿共185页40（三）标准化原则（三）标准化原则标标准准化化原原则则是是指指动动物物实实验验中中选选择择与与课课题题研研究究的的目目的的、内内容容、水水平平相相匹匹配配的的标标准准化

16、化的的实实验验动动物物。只只有有选选用用经经微微生生物物、寄寄生生虫虫学学、遗遗传传学学、环环境境及及营营养养控控制制的的标标准准化化实实验验动动物物，才才能能排排除除生生物物因因素素、遗遗传传因因素素、环环境境及及营营养养因因素对实验结果的干扰。素对实验结果的干扰。第40页，本讲稿共185页41（四）规格化原则（四）规格化原则规规格格化化原原则则是是指指选选择择与与实实验验要要求求一一致致的的动动物物规规格格。动动物物的的规规格格是是指指对对动动物物在在年年龄龄、体体重重、性性别别、生生理理及及健健康康状状况况等等量量和和质质的的规规定定。同同种种动动物不同的规格对外界刺激的反应存在差异物不

17、同的规格对外界刺激的反应存在差异。第41页，本讲稿共185页421、不同的动物年龄，有不同的生物学特性，不同的动物年龄，有不同的生物学特性，对实验刺激的反应也随着年龄的不同而有明显变化对实验刺激的反应也随着年龄的不同而有明显变化。2 标准化的健康实验动物的体重与年标准化的健康实验动物的体重与年龄一般呈正相关，选择动物时，可按体重选龄一般呈正相关，选择动物时，可按体重选择。择。年龄年龄体重体重第42页，本讲稿共185页433 同种动物不同性别对外界刺激的反应不一致。同种动物不同性别对外界刺激的反应不一致。因此，一般而言，实验若对动物性别无特殊要求，则因此，一般而言，实验若对动物性别无特殊要求，则

18、宜选用雌雄各半。以避免由性别差异造成的差异。宜选用雌雄各半。以避免由性别差异造成的差异。4、动物不同的生理状态，机体对动物不同的生理状态，机体对某些刺激的反应有较大的差异某些刺激的反应有较大的差异。性别性别 生理和健康状况生理和健康状况 第43页，本讲稿共185页44（五）（五）经济性原则经济性原则 经经济济原原则则是是指指在在不不影影响响实实验验质质量量的的前前提提下下，尽尽量选用容易获得、价格便宜和饲养经济的动物。量选用容易获得、价格便宜和饲养经济的动物。第44页，本讲稿共185页45二二常用试验中动物的选择常用试验中动物的选择第45页，本讲稿共185页46毒理学研究中的选择毒理学研究中的

19、选择在在试试验验品品毒毒性性试试验验研研究究中中，选选择择何何种种实实验验动动物物取取决决于于该该动动物物对对试试验验品品的的反反应应，以以及及试试验验品品在在该该动动物物体体内内的的吸吸收收、分分布布、代代谢谢和和排排泄泄与与人人类类的的异异同同程程度度。因因此此，作作动动物物实实验验时时，选选择择动动物应当注意以下几个方面的问题。物应当注意以下几个方面的问题。第46页，本讲稿共185页471、不同种属的动物对试验品的毒性反应有质、不同种属的动物对试验品的毒性反应有质与量的区别。同一试验品对不同种属动物与量的区别。同一试验品对不同种属动物的毒性反应是有差异的，甚至有本质的不的毒性反应是有差异

20、的，甚至有本质的不同。同。因此在毒理研究中，选择动物时，应因此在毒理研究中，选择动物时，应至少选择两种动物进行实验且种属差异越至少选择两种动物进行实验且种属差异越大越好。一般应选择一种啮齿类动物和一大越好。一般应选择一种啮齿类动物和一种大动物。种大动物。第47页，本讲稿共185页482、通常情况下，动物的进化程度愈高，、通常情况下，动物的进化程度愈高，对试验品毒性反应愈敏感。对试验品毒性反应愈敏感。第48页，本讲稿共185页493、在选择动物规格方面，选择未成年的动、在选择动物规格方面，选择未成年的动物、雌雄各半较为合适（对年龄有物、雌雄各半较为合适（对年龄有特殊要求的除外）。特殊要求的除外）

21、。生长期动物对毒生长期动物对毒性反应比老年动物敏感。动物的性性反应比老年动物敏感。动物的性别不同对试验品的毒性反应存在差异。别不同对试验品的毒性反应存在差异。第49页，本讲稿共185页50二二实验动物的购入实验动物的购入在在动动物物实实验验的的各各项项准准备备工工作作中中，动动物物的的购购入入是是一一个个重重要要的的环环节节。在在购购入入动动物物前前，应应确确定定购购入入动动物物的的种种类类、品品系系、规规格格、数数量量及及动动物物微微生生物物控控制制等等级级等。购入动物时应注意以下几个方面的问题。等。购入动物时应注意以下几个方面的问题。第50页，本讲稿共185页511、购入或领取动物前，应检

22、查各项准备工、购入或领取动物前，应检查各项准备工作是否就绪，如饲养动物的作是否就绪，如饲养动物的器具、器材器具、器材是否是否准备好，饲养室的准备好，饲养室的卫生和消毒卫生和消毒情况；此外，还情况；此外，还应检查动物的应检查动物的笼卡、实验记录本、垫料、饲笼卡、实验记录本、垫料、饲料、秤料、秤等实验必须品是否准备好。等实验必须品是否准备好。第51页，本讲稿共185页522、购入动物时，应向供应单位及时索取动物、购入动物时，应向供应单位及时索取动物的的遗传背景、微生物背景、质量合格证、动物遗传背景、微生物背景、质量合格证、动物的年龄、体重的年龄、体重等资料。等资料。第52页，本讲稿共185页533

23、、购入动物时，无论运输距离的远近，都应、购入动物时，无论运输距离的远近，都应考虑运输环境的考虑运输环境的温度、湿度、饮食以及途中污温度、湿度、饮食以及途中污染和窒息死亡染和窒息死亡等问题。等问题。第53页，本讲稿共185页544、购入清洁级以上的动物，应采用带有空气过、购入清洁级以上的动物，应采用带有空气过滤膜的滤膜的无菌运输罐无菌运输罐或或带过滤帽的笼盒带过滤帽的笼盒运输，严运输，严格检查其密封状况。格检查其密封状况。第54页，本讲稿共185页555、新购进的动物不能直接进入动物实验室，、新购进的动物不能直接进入动物实验室，应将动物应将动物雌雄分开雌雄分开，并分笼在，并分笼在隔离隔离区饲养区

24、饲养一段时间，以便动物得以恢复体能并适应一段时间，以便动物得以恢复体能并适应新的环境。新的环境。第55页，本讲稿共185页566、无论购入何种实验动物，都应同时、无论购入何种实验动物，都应同时购入相应数量的购入相应数量的饲料和垫料。饲料和垫料。第56页，本讲稿共185页57三、动物模型准备三、动物模型准备第57页，本讲稿共185页58（一）（一）概念概念人人类类疾疾病病动动物物模模型型是指医学研究中建立的具有人类疾病表现的动物实验对象和相关材料。使用动动物物模模型型是当代生生物物学学、医医学学、药药学学研究中一种便于认识客观事物的实验方法和手段。通过模型的研究可以有意识地改变那些在自然条件下不

25、可能或不容易排除的因素，以观察模型的反应。第58页，本讲稿共185页59（二二）使用动物模型的意义使用动物模型的意义1、避免在人身上进行实验所带来的避免在人身上进行实验所带来的风险。风险。如：如：外伤、中毒、肿瘤和辐射病等。外伤、中毒、肿瘤和辐射病等。第59页，本讲稿共185页602、应用动物模型可以随时复制的特、应用动物模型可以随时复制的特点，得到平时临床上不易见到的疾点，得到平时临床上不易见到的疾病。病。如：如：放射病、毒气中毒、烈性传放射病、毒气中毒、烈性传染病、战伤等。染病、战伤等。第60页，本讲稿共185页613、用动物提供的模型可以克服人类某些疾病、用动物提供的模型可以克服人类某些

26、疾病的潜伏期长，病程长和发病率低的缺点。的潜伏期长，病程长和发病率低的缺点。潜伏期长的疾病潜伏期长的疾病：肿瘤、慢性气管炎、动肿瘤、慢性气管炎、动脉粥样硬化、遗传病等。脉粥样硬化、遗传病等。发病率低的疾病发病率低的疾病：免疫性、代谢性、内分免疫性、代谢性、内分泌和血液病等。泌和血液病等。第61页，本讲稿共185页624、可以严格控制实验条件，排除各种干可以严格控制实验条件，排除各种干扰。扰。临床上疾病较复杂，影响因素多，如：身患临床上疾病较复杂，影响因素多，如：身患多种多种疾病、病人的年龄、性别、体重、遗传、生活地区疾病、病人的年龄、性别、体重、遗传、生活地区和规律，营养状况和规律，营养状况等

27、各不相同。等各不相同。动物复制的疾病模型，可以选择相同动物复制的疾病模型，可以选择相同品种、品系、品种、品系、性别、年龄、体重，以及相同的质量控制和饲养条件性别、年龄、体重，以及相同的质量控制和饲养条件等。等。第62页，本讲稿共185页635、样品收集方便。样品收集方便。收集动物疾病模型的样品不受时间和条件收集动物疾病模型的样品不受时间和条件的限制，可根据实验需要随时采集的限制，可根据实验需要随时采集。第63页，本讲稿共185页64（三）三）动物模型的分类动物模型的分类1、按产生的原因分类按产生的原因分类.（1）诱发性或实验性动物模型）诱发性或实验性动物模型（Experimental Anim

28、al Models）（2）自发性动物模型）自发性动物模型（Spontaneous Animal Models）（3）转基因和基因敲除动物模型）转基因和基因敲除动物模型(Transgenic animal,gene knock-out animal)(Transgenic animal,gene knock-out animal)第64页，本讲稿共185页65诱发性或实验性动物模型诱发性或实验性动物模型：是指实验者使用物理的、化学的和生物是指实验者使用物理的、化学的和生物的致病因素作用于动物造成动物组织、器官的致病因素作用于动物造成动物组织、器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病或全身一定的

29、损害，出现某些类似人类疾病时的功能、代谢障碍或形态结构方面的病变。时的功能、代谢障碍或形态结构方面的病变。第65页，本讲稿共185页 .机械损伤、放射线损伤、气压、手术等机械损伤、放射线损伤、气压、手术等 化学药致癌、化学毒物中毒、强酸强碱烧化学药致癌、化学毒物中毒、强酸强碱烧 伤、某种有机成分的增加或减少导致营养伤、某种有机成分的增加或减少导致营养 性疾病等。性疾病等。细菌、病毒、寄生虫、生物毒素等细菌、病毒、寄生虫、生物毒素等 。物理因素物理因素:化学因素化学因素 ：生物因素生物因素 ：复合因素复合因素 ：多种因素诱导多种因素诱导.第66页，本讲稿共185页67自发性动物模型：自发性动物模

30、型：是指在自然情况下所形成的疾病模型或者经有意是指在自然情况下所形成的疾病模型或者经有意识的人工处置发生的疾病，并能稳定遗传给后代的识的人工处置发生的疾病，并能稳定遗传给后代的疾病模型。包括人工培育的突变系和近交系的各种疾病模型。包括人工培育的突变系和近交系的各种疾病模型。疾病模型。如：无胸腺裸鼠、高血压大鼠、肥胖症小鼠等。如：无胸腺裸鼠、高血压大鼠、肥胖症小鼠等。第67页，本讲稿共185页68 需要指出：需要指出：1、以上两种动物模型各有其、以上两种动物模型各有其优缺点优缺点。其优。其优 缺点只是缺点只是相对的相对的。2、很多疾病模型可用、很多疾病模型可用不同方式获得。不同方式获得。第68页

31、，本讲稿共185页693、不同方法复制的动物模型在、不同方法复制的动物模型在发病机理发病机理和和 疾病内在特征疾病内在特征方面存在着各自的特点。方面存在着各自的特点。4、大部分自发性动物模型是通过人为、大部分自发性动物模型是通过人为定向定向 培育培育而成的，与人类自然发生的疾病在而成的，与人类自然发生的疾病在 很多方面很多方面有差异有差异。第69页，本讲稿共185页70转基因和基因敲除动物模型：转基因和基因敲除动物模型：转基因动物：转基因动物：是指用基因工程技术将外源目的基因通是指用基因工程技术将外源目的基因通过过生殖细胞或早期胚胎生殖细胞或早期胚胎导入胚胎染色体基因组内，使之稳定导入胚胎染色

32、体基因组内，使之稳定整合并能传给后代的一类动物。整合并能传给后代的一类动物。基因敲除动物：基因敲除动物：是指用相应的分子生物学技术将结是指用相应的分子生物学技术将结构已知但功能未知的基因去除，或用其他序列相近的基构已知但功能未知的基因去除，或用其他序列相近的基因将其取代的一类动物因将其取代的一类动物。第70页，本讲稿共185页712、按实验所用对象分类按实验所用对象分类.（1）整体动物模型）整体动物模型（2）离体器官，组织动物模型离体器官，组织动物模型（3）细胞株动物模型）细胞株动物模型第71页，本讲稿共185页72（四）（四）动物模型的设计原则动物模型的设计原则1、相似形相似形人人类类疾疾病

33、病动动物物模模型型应应尽尽可可能能地地相相似似于于人人类疾病。类疾病。如：大鼠的自发性高血压。如：大鼠的自发性高血压。复制动物模型时，应注意动物的选择复制动物模型时，应注意动物的选择第72页，本讲稿共185页732、重复性重复性理想的动物模型应该是可以重复的。理想的动物模型应该是可以重复的。保证动物模型具有重复性的措施保证动物模型具有重复性的措施.（1）选用标准化的实验动物）选用标准化的实验动物（2）选用标准化的实验设施）选用标准化的实验设施（3）保证复制因素的一致性）保证复制因素的一致性第73页，本讲稿共185页743、可靠性可靠性复制的动物模型应可靠地反映人类疾病，复制的动物模型应可靠地反

34、映人类疾病，疾病的主要症状和体征明显，不能出现与实疾病的主要症状和体征明显，不能出现与实验无关的疾病。验无关的疾病。注意动物的注意动物的选择选择和动物的和动物的质量质量第74页，本讲稿共185页754、适用性和可控性适用性和可控性疾病模型应尽量考虑在今后临床上的应用和疾病模型应尽量考虑在今后临床上的应用和便于控制其发展，以利于研究。便于控制其发展，以利于研究。如：雌激素终止大、小鼠早期妊娠的模型无实如：雌激素终止大、小鼠早期妊娠的模型无实用性。用性。动物动物+制模因子制模因子=结果散发或死亡结果散发或死亡无法控无法控制模型的发展方向和速度，无价值。制模型的发展方向和速度，无价值。第75页，本讲

35、稿共185页765、易行性和经济性易行性和经济性复制动物模型应尽量做到方法简单、复制动物模型应尽量做到方法简单、容易，合乎经济的原则。容易，合乎经济的原则。第76页，本讲稿共185页77（五（五）影响动物模型制作的因素影响动物模型制作的因素第77页，本讲稿共185页781、致模因素对动物模型复制的影响：、致模因素对动物模型复制的影响：致致摸摸因因素素的的剂剂量量及及在在相相关关动动物物上上的的反反应应影影响动物模型的复制。响动物模型的复制。因此造模时应注意因此造模时应注意.（1）致模因素的选择）致模因素的选择（2）致模因素的剂量致模因素的剂量（3）致模因素与模型的相关信息致模因素与模型的相关信

36、息第78页，本讲稿共185页792、动物因素对动物模型复制的影响、动物因素对动物模型复制的影响（1）动物种类的影响动物种类的影响（2）动物品系的影响动物品系的影响（3）年龄和体重的影响年龄和体重的影响（4）性别因素的影响）性别因素的影响（5）生理状态和健康因素影响生理状态和健康因素影响第79页，本讲稿共185页80动物种类的影响：动物种类的影响：不同种的动物存在许多不同的特点，动物种不同种的动物存在许多不同的特点，动物种类选择不当将影响动物模型的复制类选择不当将影响动物模型的复制。第80页，本讲稿共185页81动物品系的影响：动物品系的影响：同种不同品系的动物对致模因素的反应不同种不同品系的动

37、物对致模因素的反应不一致一致。第81页，本讲稿共185页82年龄和体重的影响：年龄和体重的影响：动物的寿命差异较大，解剖生理特征和反动物的寿命差异较大，解剖生理特征和反应随年龄而明显变化，一般幼龄动物比成年应随年龄而明显变化，一般幼龄动物比成年动物敏感，动物敏感，应根据实验要求，选择相应年龄应根据实验要求，选择相应年龄的动物复制模型（健康动物年龄与体重有相的动物复制模型（健康动物年龄与体重有相关性）。关性）。第82页，本讲稿共185页83性别因素的影响：性别因素的影响：同种、同品系，不同性别的动物，对某同种、同品系，不同性别的动物，对某些反应不一致。些反应不一致。第83页，本讲稿共185页84

38、生理状态和健康因素影响生理状态和健康因素影响:动物处在不同的生理状态和不同的健康状况动物处在不同的生理状态和不同的健康状况对致模因素的反应差异很大。对致模因素的反应差异很大。如：如：肝功能衰竭肝功能衰竭动物模型，不能选用患严动物模型，不能选用患严重重球虫病球虫病的家兔，因球虫病影响肝功能。的家兔，因球虫病影响肝功能。第84页，本讲稿共185页853、实验技术因素对动物模型复制的影实验技术因素对动物模型复制的影响响（1）实验季节）实验季节不不同同季季节节，动动物物对对某某些些反反应应可可能能不不一一致致，对跨季节的动物模型实验可能产生影响。对跨季节的动物模型实验可能产生影响。第85页，本讲稿共1

39、85页86（2）昼夜不同的影响）昼夜不同的影响实验动物的实验动物的体温、血糖、基础代谢体温、血糖、基础代谢的、的、内分泌等随昼夜的不同呈有节律的变化，内分泌等随昼夜的不同呈有节律的变化，在复制模型时要注意昼夜不同对模型的影在复制模型时要注意昼夜不同对模型的影响。响。第86页，本讲稿共185页87（3）麻醉深度的影响）麻醉深度的影响不同的不同的麻醉药麻醉药、剂量剂量对动物麻醉效果有对动物麻醉效果有差异，这种差异会影响模型的复制。差异，这种差异会影响模型的复制。第87页，本讲稿共185页88（4）手术技巧的影响）手术技巧的影响手术熟练，将减少对动物的刺激手术熟练，将减少对动物的刺激，损损伤和出血能

40、提高模型的成功率。伤和出血能提高模型的成功率。第88页，本讲稿共185页89（5）实验给药的影响）实验给药的影响给药给药途径途径、剂量剂量和和熟练程度熟练程度不同会对不同会对造模产生影响。造模产生影响。第89页，本讲稿共185页90（6）对照组对造模的影响）对照组对造模的影响对照是检测模型是否成功的重要手对照是检测模型是否成功的重要手段。段。第90页，本讲稿共185页914、环境、营养因素对复制动物模型的影响环境、营养因素对复制动物模型的影响环环境境因因素素是是影影响响造造模模及及其其实实验验结结果果的的重重要要因因素素，居居住住条条件件、光光照照、噪噪声声、氨氨浓浓度度、温温度度、湿湿度度、

41、气气流流速速度度等等任何一项都不容忽视任何一项都不容忽视.营营养养因因素素对对复复制制动动物物模模型型，特特别别是是长长期期实实验验，影影响响显显著著，应应予予以以重重视视。造造模模过过程程中中应应注注意意给给水水量量充充分分和和给予符合卫生标准的饮水。给予符合卫生标准的饮水。第91页，本讲稿共185页92（六）动物模型的制作（六）动物模型的制作1、制模前的准备工作。、制模前的准备工作。2、制模动物的选择。、制模动物的选择。3、制模材料的选择。、制模材料的选择。4、制模方法的确定。、制模方法的确定。5、制模环境的确定。、制模环境的确定。准备就绪，开始制模准备就绪，开始制模。第92页，本讲稿共1

42、85页93实验准备工作就绪，接下来开始作实验准备工作就绪，接下来开始作动物实验，下堂课讲实验过程中的基本动物实验，下堂课讲实验过程中的基本技术和方法。技术和方法。第93页，本讲稿共185页94第三讲第三讲 动物实验中的基本技术和方法动物实验中的基本技术和方法第94页，本讲稿共185页95 第一节第一节实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定 抓抓取取与与固固定定是是动动物物实实验验的的一一项项基基本本技技术术，其其目目的的是是使使动动物物保保持持在在安安静静的的状状态态下下，顺顺利利地地进进行行各各项项实实验。验。不同种类的动物的抓取与固定方法不尽一致。不同种类的动物的抓取与固定方法不尽一致。

43、同同种种动动物物不不同同实实验验目目的的、实实验验内内容容，抓抓取取与与固固定定方方法法也也可可以不同。以不同。不同实验者的操作习惯上也存在差异。不同实验者的操作习惯上也存在差异。第95页，本讲稿共185页96一、小鼠一、小鼠（一）、抓取（一）、抓取 用右手拇用右手拇指和食指的指腹指和食指的指腹抓住尾部中央提抓住尾部中央提起或用两手捧起。起或用两手捧起。第96页，本讲稿共185页97（二）、固定（二）、固定1、徒手固定、徒手固定（1）将小鼠提起放在饲养盒盖子上，轻轻向后拉住。（将小鼠提起放在饲养盒盖子上，轻轻向后拉住。（2）用左手拇指和食指抓住颈、背部中央皮肤。用左手拇指和食指抓住颈、背部中央

44、皮肤。第97页，本讲稿共185页98（3）翻转抓住颈背部的左手，右手拉住鼠）翻转抓住颈背部的左手，右手拉住鼠尾再用尾再用 左手的小指压住尾根部，使整个小左手的小指压住尾根部，使整个小鼠呈一条直线。鼠呈一条直线。第98页，本讲稿共185页992、固定板（器）固定、固定板（器）固定 （1）将小鼠麻醉后，用细绳捆住小鼠四肢。）将小鼠麻醉后，用细绳捆住小鼠四肢。（2）准备一个）准备一个15-20cm，边缘钉有，边缘钉有5个钉子个钉子 的方木板。的方木板。（3）将四肢用细绳固定在木版两侧的钉子）将四肢用细绳固定在木版两侧的钉子 上，在上颚切上，在上颚切 齿处用细绳齿处用细绳 固定在木版前方的钉子上。固定

45、在木版前方的钉子上。第99页，本讲稿共185页100 固定板固定适用于大多数动物手术。固定板固定适用于大多数动物手术。小鼠固定器适用于尾静脉注射。小鼠固定器适用于尾静脉注射。第100页，本讲稿共185页101二、大鼠和地鼠二、大鼠和地鼠（一）抓取（一）抓取 1、周龄较小的大鼠和地鼠，可以像小鼠一样抓周龄较小的大鼠和地鼠，可以像小鼠一样抓住尾部提起。住尾部提起。第101页，本讲稿共185页1022、周龄较大的大鼠可张开左手虎口，迅速将拇、食指、周龄较大的大鼠可张开左手虎口，迅速将拇、食指插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠插入大鼠的腋下，虎口向前，其余三指及掌心握住大鼠身体中段，并将

46、其保持仰卧位，然后调整左手拇指的位身体中段，并将其保持仰卧位，然后调整左手拇指的位置，紧抵在下颌骨上即可进行实验操作置，紧抵在下颌骨上即可进行实验操作。第102页，本讲稿共185页103注意：注意：操作者第一次抓取大鼠时，最好戴防护手套；操作者第一次抓取大鼠时，最好戴防护手套；不能捉提尾尖，也不能长时间将大鼠悬在空中。不能捉提尾尖，也不能长时间将大鼠悬在空中。第103页，本讲稿共185页104（二）固定（二）固定1、徒手固定：、徒手固定：对体重较对体重较小的大鼠可用拇指、食小的大鼠可用拇指、食指捏住大鼠耳部及颈部指捏住大鼠耳部及颈部皮肤，余下三指紧捏住皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心，背

47、部皮肤，置于掌心，调整好大鼠在手中的姿调整好大鼠在手中的姿势即可进行实验操作。势即可进行实验操作。如：灌胃、腹腔注射、如：灌胃、腹腔注射、肌肉注射、皮下注射等肌肉注射、皮下注射等实验实验。第104页，本讲稿共185页1052、固定板固定：、固定板固定：方法与小鼠固定板固定相同，方法与小鼠固定板固定相同，只是需选择更大一些的固定板。只是需选择更大一些的固定板。3、固定器（盒）固定：固定器（盒）固定：方法与小鼠固定器（盒）方法与小鼠固定器（盒）固定相同，只是固定器较小鼠的大。固定相同，只是固定器较小鼠的大。同样适用同样适用 于大鼠尾静脉注射。于大鼠尾静脉注射。第105页，本讲稿共185页106三、

48、豚鼠三、豚鼠（一）抓取（一）抓取 抓取幼龄豚鼠时，用两手捧起；成熟豚鼠可以用左手抓取幼龄豚鼠时，用两手捧起；成熟豚鼠可以用左手大把抓起。大把抓起。第106页，本讲稿共185页107 注意：注意：豚鼠性情温和，一般不伤人，但胆小易惊，易造豚鼠性情温和，一般不伤人，但胆小易惊，易造成自伤。抓取时，不能太粗野，更不能抓腰腹部，成自伤。抓取时，不能太粗野，更不能抓腰腹部，在操作过程中，如果豚鼠挣扎，手不要越握越紧，在操作过程中，如果豚鼠挣扎，手不要越握越紧，否则会造成豚鼠呼吸困难，甚至死亡。否则会造成豚鼠呼吸困难，甚至死亡。第107页，本讲稿共185页108（二）固定（二）固定1、徒手固定：、徒手固定

49、：用左手的食指和中指放在豚鼠用左手的食指和中指放在豚鼠颈背部两侧，拇指和无名指放在肋部，分别用手指挟住颈背部两侧，拇指和无名指放在肋部，分别用手指挟住左右前肢抓起，然后反转左手，用右手的拇指和无名指左右前肢抓起，然后反转左手，用右手的拇指和无名指挟住右后肢，用中指和无名指挟住左后肢，使鼠体成为挟住右后肢，用中指和无名指挟住左后肢，使鼠体成为一条直线。一条直线。第108页，本讲稿共185页1092、固定板（器）固定：、固定板（器）固定：与大、小鼠，豚鼠固与大、小鼠，豚鼠固定板固定基本一致。定板固定基本一致。第109页，本讲稿共185页110四、实验兔四、实验兔（一）抓取（一）抓取 抓住颈背部皮肤

50、及两耳提起，并用左手托住兔抓住颈背部皮肤及两耳提起，并用左手托住兔腹部或臀部，使其重量主要落在左手上。腹部或臀部，使其重量主要落在左手上。第110页，本讲稿共185页111 注意：注意：家兔温顺，一般不会咬人，但脚爪较锐利，要家兔温顺，一般不会咬人，但脚爪较锐利，要防止被抓伤。另外抓取时不能只提兔耳或四肢，防止被抓伤。另外抓取时不能只提兔耳或四肢，也不能用单手只抓颈背部皮肤。也不能用单手只抓颈背部皮肤。第111页，本讲稿共185页112（二）固定（二）固定1、徒手固定：、徒手固定：用一只手抓住兔的颈背部皮肤，另一用一只手抓住兔的颈背部皮肤，另一只手抓住兔的两后肢，固定在实验台上。只手抓住兔的两