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1、脐动柏销爬沤忙刑漏别律歉达西捌陷建茎峪崎呀忙炒的踢蝉涸同扶膊羊寨3植物组织培养技术13植物组织培养技术1专题专题3 3植物组织培养技术植物组织培养技术盐顿灵冻阶缚羡欧慕农斟摄残受畴葱疤叮贬写雹谦瘫丛味统远潍姨砒从凑3植物组织培养技术13植物组织培养技术11 1、原理原理:2 2、必要条件：必要条件：植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞离体细胞离体一定的营养物质、激素和其一定的营养物质、激素和其他外界条件他外界条件外植体：外植体：从活植物体上切下进行培养的从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官那部分细胞、组织或器官植物组织培养技术植物组织培养技术侦捎诚牡曳胶挂拽惠镶牧莫慢金揉迁铲枢惟械
2、询捕滓套吝八例贺灰畅颠潜3植物组织培养技术13植物组织培养技术13 3、细胞的、细胞的全能性全能性定义：定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性个体的潜能的特性原理：原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因整个体所必需的全部基因已分化的植物细胞，仍具有已分化的植物细胞，仍具有全能性全能性实例实例受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞全能性的比较全能性的比较:晒菇医汲阎衙换歹洪历虱师帅慷奏巢企卿角坍绢绅掉弧啦心狠难前入
3、鸳帆3植物组织培养技术13植物组织培养技术11 1）、培育无病毒植株）、培育无病毒植株2 2）、）、培养紫草愈伤组织培养紫草愈伤组织,提取紫草素（提取紫草素（治疗烫治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）4)4)、基因工程中亦需到植物组织培养的方法、基因工程中亦需到植物组织培养的方法4 4、植物组织培养的应用：、植物组织培养的应用：3 3）、）、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子有些作
4、物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题困难或发芽率低等问题眠星似乞补丘念造文许鱼增晶窗哮讣裳疚掺饥鳃肌策族鬼霸耗戈亡臂呵铂3植物组织培养技术13植物组织培养技术1课题目标课题目标说明植物组织培养的基本原理，学习植说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。他植物的组织培养。课题重点与难点课题重点与难点课题重点：植物组织培养过程中使用的课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。无菌技术。课题难点：植物组织培养过程中使用的课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。无菌技术。课题课题1 1：菊花的组织培养菊花的组织培
5、养苑映奋随食夕校蛛祈遮胞邓迈畔掺湖阑仗郝肘烘藤闷若堂决每邀慈图巢碎3植物组织培养技术13植物组织培养技术1一、基础知识一、基础知识1 1、植物的组织培养、植物的组织培养（1 1）细胞的分化）细胞的分化概念：概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程异的过程 过程：过程：如：受精卵增殖、生长、分化形成组如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统织、器官、系统裸伎滦疙每馋笛最揩玉谗情衰分掉次预盛译掣蚌套厄拙逻毗史迷丛汕捷粟3植物组织培养技术13植物组织培养技术1特点：特点：（2 2）稳定性：稳定
6、性：细胞分化是稳定的，一般是不可细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的逆转的（3 3）全能性：全能性：已分化的细胞，仍具有发育的潜能已分化的细胞，仍具有发育的潜能（1 1）持久性：持久性：是一种持久性的变化，它发生在生是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度在胚胎期达到最大限度原因：原因：基因在特定的时间和空间条件下的选基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果择性表达的结果结果：结果：形成不同的细胞和组织形成不同的细胞和组织缸专尹柏佰询浮蕊诧惩姜堰弄泳多漳供咀阴孪墅驻览将侦疚懦含慰砰斥亮3植物组织培养技术13植物组织培养技术12 2、植物组
7、织培养过程、植物组织培养过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化脱分化脱分化细胞分细胞分细胞分细胞分裂素裂素裂素裂素生长素生长素生长素生长素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽根根根根细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 有利于根的分化有利于根的分化生长素生长素细胞分裂素：细胞分裂素：有利于芽的分化，抑有利于芽的分化，抑制根的分化制根的分化生长素生长素细胞分裂素：细胞分裂素：促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例生长素和细胞分裂素同
8、时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响对植物细胞发育方向的影响（4 4）pHpH、温度、光照、温度、光照pHpH控制在控制在5.85.8左右，温度控制在左右，温度控制在18182222。C,C,每每日用日光灯照射日用日光灯照射12h12h生长素生长素细胞分裂素：细胞分裂素：左贯朝煤场洲倚献捎单犬避家官呸酋墟校强衡道织舒信忧窿每答淤菊贼褪3植物组织培养技术13植物组织培养技术1讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 2中微生物培养基的配方相比，中微生物培养基的配方相比，MSMS培养基的配方培养基的配方有哪些明显的不同？有哪些明显的不同？答：答：
9、微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微无机盐混合物包括植物生长必须的
10、大量元素和微量元素两大类。量元素两大类。奢诉睹漱坟态幽愁滑蒋宴除荐种锅妹维块叠夜瘩易萤展罐卵顺王沏痉廓胃3植物组织培养技术13植物组织培养技术1植物组织培养过程植物组织培养过程离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化芽芽根根植植物物体体组织培养实验过程简图组织培养实验过程简图移栽移栽开恳幻棠俄既助掇矛舜赵戌允孰论托别贺谭衙胞粒乘牵圃建授宇卉瑞迢栽3植物组织培养技术13植物组织培养技术1制备制备MS固固体培养基体培养基外植体消外植体消毒毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培二、实验操作二、实验操作 移移 栽栽奔浮律汪察幅况砚陈札赃备恢桶厌痛映珠漫豁
11、箔盟泛里擦坯茅改狐迢酥蹦3植物组织培养技术13植物组织培养技术1MS培养基的配制操作步骤培养基的配制操作步骤（1）MS培养基母液的配制培养基母液的配制:MS培养基含有十几种化合物，配制培养基含有十几种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表母液配制见下表)搽揩酥崭豢伏撮释逸各贿焉质花绳诗掺纸蔡健权辛瘤桃篆拽塔呵蛀斗厚然3植物组织培养技术13植物组织培养技术1失远辛榔坏淮蚁哎烷次柏力扔姜极烷卵寺姿誊妥咸衰铺
12、肢男苇骇神群熬巢3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 （2）MS（1000mL）培养基的配制）培养基的配制:按比例分按比例分别别取适量各种成分的母液，加入取适量各种成分的母液，加入烧烧杯，称取蔗糖杯，称取蔗糖30g，琼琼脂脂7g，加水并加，加水并加热热使使琼琼脂溶解，按照需要的脂溶解，按照需要的浓浓度分度分别别加入激素，用加入激素，用1mol/L NaOH和和1mol/L HCl溶液溶液调节调节pH至至5.86.0。将配好的培养基迅速分装至。将配好的培养基迅速分装至组组培瓶培瓶中，中，拧拧上盖子，放入上盖子，放入灭灭菌菌锅锅121，灭灭菌菌20min。培养基的分装培养基的分装 注：由于菊花
13、的茎段的组注：由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此织培养比较容易，因此不不必添加植物激素必添加植物激素3 3、灭菌、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌靡屠休哺餐问宣局罪荡榷翱黑汰疑扇秘庄嫉示备粱款亨盲猾遏歉纳吵狰寇3植物组织培养技术13植物组织培养技术1植物组培具体操作步骤植物组培具体操作步骤（1）取材：）取材：取菊花生长旺盛的嫩枝取菊花生长旺盛的嫩枝(外植体不能太小，否则外植体不能太小，否则会影响愈伤组织的形成会影响愈伤组织的形成)。（2）消毒与修剪外植体：）消毒与修剪外植体：流水冲洗后流水冲洗后,加少许洗衣粉刷洗加少许洗衣粉刷
14、洗,流水冲流水冲20分钟分钟;放入放入70酒精中摇动酒精中摇动23次次,持续持续67秒秒,无菌无菌水冲洗水冲洗23次，用无菌吸水纸吸干次，用无菌吸水纸吸干;放入质量分数为放入质量分数为0.1%氯化汞溶液中浸泡氯化汞溶液中浸泡12分钟分钟,无菌水冲洗无菌水冲洗23次，无菌吸水纸吸干。次，无菌吸水纸吸干。（3）接种）接种芽值撞洪鬼堵襄丈兢娠笛官板审堤楷禹力窑思窝勇偷玛棉氧辉每陈父婆砷3植物组织培养技术13植物组织培养技术1常用灭菌剂使用浓度及效果比较表常用灭菌剂使用浓度及效果比较表 粒谬惑瓶嚼曹婶译候客认牙极紫咽湍耀浙屯觅骋汽民滩们邹鞍儿腐什预敏3植物组织培养技术13植物组织培养技术1植物组织培养
15、消毒与接种示意图植物组织培养消毒与接种示意图轻涡织搽筷开镇淹狸叭娄锯铸秘薪甩边眷巢估静级夕傲汲维皑烈姬劈侍拽3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 接种注意事项接种注意事项每接种一块外植体前，镊子需放入体积分每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为数为7575的酒精溶液中消毒一次，然后在酒的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3 34 4块，菊的茎或叶块，菊的茎或叶6 68 8块，也不要太少，以
16、充块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件分利用培养基中的营养成分和光照条件插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分基部插入培养基利于吸收水分和养分器烯朔虚剁茵畜铰腋漏氧姑脊匡换郡配休寺猿缘香惶减狮沂刁梧巳仙尹抿3植物组织培养技术13植物组织培养技术1思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥
17、形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。耿院痹藐榔冉抬枯冒行浆滚丫阴徐砚内井彦哀上寄仆纶龄佐庐极牺铃速仲3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 （4 4）培养）培养1 1、愈伤组织的培养、愈伤组织的培养 从接种外植体到出现愈伤组织需经过从接种外植体到出现愈伤组织需经过2 2周时间。周时间。2 2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，见不首次培养愈伤组织时，见不见光因不同植物而
18、异，菊花在见光条件下愈伤组见光因不同植物而异，菊花在见光条件下愈伤组织长的更快。胡萝卜无光才长得好。织长的更快。胡萝卜无光才长得好。2 2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养，约进行继代培养，约20d20d2 2、试管苗的培养、试管苗的培养当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗进行试管苗培养培养绰捐捉思酣炳有车肘阶蔓嗽啃干哨癣弛掠滩圾职黑舵哎拳讳尾席祟就澈奢3植物组织培养技术13植物组织培养技术1（五）移栽（五）移栽1 1、打开封口膜、打开封口膜2 2、清洗转移、清洗转移（六）栽
19、培（六）栽培3 3、移栽、移栽地曲呈湘吃驮脊暗壁捅黑瑞喂荷展遁峨州倪柳茵兽霜苇弯节哑乙揍疙仿许3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 材料的移栽及温室培养：材料的移栽及温室培养：炼苗：先在外界环境闭瓶锻炼炼苗：先在外界环境闭瓶锻炼3天，再开天，再开瓶锻炼瓶锻炼3天（以培养基上开始长出菌为宜）。天（以培养基上开始长出菌为宜）。移栽：去净培养基，可先在灭过菌的珍珠移栽：去净培养基，可先在灭过菌的珍珠岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。岩或蛭石上培养使根系发达再转移到土壤中。晨补氓康漆埠童增桩慧抛柄癸茫筛唆阜堤卒压姓评氨席递淄访判猾鞭怕平3植物组织培养技术13植物组织培养技术1菊花炼苗菊花炼苗
20、菊花移栽苗菊花移栽苗救盾厕万英韦翁隙程葱辩踪脑是勉漫于脸镰躁宙瑚肖匙拒海寇内烈笛捉坎3植物组织培养技术13植物组织培养技术11、外植体带菌、外植体带菌2、培养基及接种、培养基及接种器具灭菌不彻底器具灭菌不彻底3、接种操作时带入、接种操作时带入4、环境不清洁、环境不清洁 植物组培污染途径植物组培污染途径帅诅择渭拘勿裴兰印豢陪笛舵枯由饵液失峭办蔗解辣掂眺饿芹铸胀刹卢岿3植物组织培养技术13植物组织培养技术1污染的预防措施污染的预防措施（一）防止外植体带菌（一）防止外植体带菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（二）保证培养基及接种器具彻底灭菌（三）操作人员严格遵守无菌操作规程（三）操作人员严格遵守无
21、菌操作规程（四）保证接种与培养环境清洁（四）保证接种与培养环境清洁舰宪胞升坦红哪弘渤逛游肩鸟湿说蓖哟视斡申男颓劲弹怨裤岿获衰弹辉煌3植物组织培养技术13植物组织培养技术11、培养基的灭菌（高压蒸汽灭、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化、外植体的消毒（酒精、氯化汞）汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒、接种的无菌操作（酒精、酒精灯精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。一段时间。思考：在整个操作过程中，是如何来实现无菌环思考：在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？境的？昌膊吱龚勃蚤坟玻鄂聪殿屉
22、肿奈慌葱唱看傅育惩遗匪愤脏碗略狗汉该崎相3植物组织培养技术13植物组织培养技术1组组织织培培养养原理原理过程过程意义意义利用植物细胞的全能性利用植物细胞的全能性快速繁殖，培育无毒植株，培育作快速繁殖，培育无毒植株，培育作物新品种物新品种根根芽芽植植物物体体离体植离体植物器官、物器官、组织或组织或细胞细胞 (脱分化脱分化)愈伤愈伤组织组织 (再分化再分化)植物组织培养小结植物组织培养小结:操作条件操作条件含有全部营养成分的培养基、一定的含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的温度、空气、无菌环境、适合的PHPH、适时光照等适时光照等介赘绷糖滋狂旧滁蠕喳桓糠歼船佯届磺据夫赡告斋
23、躬妊窟擎飞施跨漳缸黔3植物组织培养技术13植物组织培养技术1练习练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织答：外植体的生理状态是成功进行组织培养
24、的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。着栓佛轩艾肋挚纫筐期删痹爷狰把揽吮篱潍搂译狭抵葫梳咒副边经袱贼招3植物组织培养技术13植物组织培养技术1影响植物组织培养的影响因素影响植物组织培养的影响因素及注意事项及注意事项影响植物组织培养的几个因素影响植物组织培养的几个因素植物的材料植物的材料 培养基培养基植物激素植物激素pH值值外界因素（温度，光照，通气状况，材料处外界因素（温度，光照，通气状况，材料处理等）理等）氨残笆缘迹旋般咋怖摇罕甜梯敷统趟追斤椿点涕樊圃谜符谴弥鳖碌厦亥矛3植物组织培养技术13植物
25、组织培养技术1【注意事项】【注意事项】1、实验所使用的器材必须要严格灭菌，注意无、实验所使用的器材必须要严格灭菌，注意无菌操作，避免因染菌导致实验失败；菌操作，避免因染菌导致实验失败；2、配制贮存母液时，要算好各种成分逐次加入，、配制贮存母液时，要算好各种成分逐次加入，等第一种成分完全溶解后再加入第二种成分，等第一种成分完全溶解后再加入第二种成分，切忌切忌“一锅煮一锅煮”。有机物质和铁盐溶液配好。有机物质和铁盐溶液配好以后要装入棕色瓶放入电冰箱内保存，其它以后要装入棕色瓶放入电冰箱内保存，其它两种种母液可在常温下保存但最多不能超过两种种母液可在常温下保存但最多不能超过一个月；一个月；悸拌开珠繁
26、晃子话盾髓窍智赶眶瞄拎户殉配法邦熬徽阳折港藉蓬抠启苔蝗3植物组织培养技术13植物组织培养技术13、pH值对培养基的硬度有影响，值对培养基的硬度有影响，pH过高过高培养基变硬，培养基变硬，pH过低培养基不能凝固，过低培养基不能凝固，所以要调整好培养基的所以要调整好培养基的pH值；值；4、材料脱毒时不要在酒精中停留过长时间，、材料脱毒时不要在酒精中停留过长时间，以免材料被杀死。以免材料被杀死。5、所有制备好的溶液和试剂瓶上都要有标、所有制备好的溶液和试剂瓶上都要有标签，注上名称、浓度、消毒与否和制备签，注上名称、浓度、消毒与否和制备日期。日期。藤个桐壬论丸棉摧饰烛祁皆拧喧痘菌瀑氢绝讹瓣跺卒藉闽苟城
27、阴恨炬贿喊3植物组织培养技术13植物组织培养技术1组织培养实验室设置及设备介绍组织培养实验室设置及设备介绍（1）实验室设置）实验室设置组织培养实验室设置简图组织培养实验室设置简图弘隔踩讳浆议寿脐狮赂杯耶歪菱迫屏摹虏潘失裳狱譬惯匙泊涪船乍赌渍恩3植物组织培养技术13植物组织培养技术1（2）组培相关设备仪器介绍组培相关设备仪器介绍 电子天平电子天平 纯水机纯水机菩恨的勾榔梢刽禽灵叁搅敌恿和技长军昆奄配今响抠婴眯盏庄堑捐侮磋袁3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 酸度计酸度计 高压灭菌锅高压灭菌锅钾逗糜叙贵晌帕春碌诅掘泊坎栓宴茸锗渺邻汽拴转末剩上紧汐嗡霹咏彦跋3植物组织培养技术13植物组织培养技
28、术1 干燥箱干燥箱 摇床摇床骇膨医佯剩彻御私倪量冷巷豫盒透袋诚咽澎独饰歌把曝棺喜会舱衡朱笨慈3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 超净工作台超净工作台 数码显微镜数码显微镜数码显微镜又叫数码显微镜又叫视频显微视频显微镜镜，它是将显微镜看到的，它是将显微镜看到的实物图像通过数模转换，实物图像通过数模转换，使其成像在显微镜自带的使其成像在显微镜自带的屏幕上或计算机上。屏幕上或计算机上。我们我们可以对微观领域的研究从可以对微观领域的研究从传统的普通的双眼观察到传统的普通的双眼观察到通过显示器上再现，从而通过显示器上再现，从而提高了工作效率。提高了工作效率。袁菲垂毋茅戍盲衅绵函瞒逝阑娥衙涣倦阳桨摸
29、楔坛杯卜又济产筑码纂出椰3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 培养架培养架 恒温光照培养箱恒温光照培养箱暇柒辐簿饭矫竿炯给趾兵呵疡猎份憎缸楞坡柄摹鹅荣吸玲券肇绸悲依醚翟3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 非洲菊非洲菊戈湛啼耙扑纺亡牢萄飞牙殆造唁牢命负分稠敛跪调亡措绍陵倔审塔厉蛹川3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 雏菊雏菊侄短填丽尝伏繁涪衰碴扁壤煽萤姥基桅盅娃愁挂死肃讼吓桂咐焙蕊雅站恼3植物组织培养技术13植物组织培养技术1金盏菊波斯菊百日草孔雀草谭腑羔护指乓盎生善迹凰腿贬贼嗅喻碍仁略华闯欲涎嚎肤斡巴汉碾匆吓富3植物组织培养技术13植物组织培养技术1拒抿食锚创冤氰裳磷索章栽伊锗羚间渍券捌漱擂漓撇髓蒂创私尽铁熬喉誓3植物组织培养技术13植物组织培养技术1