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1、实验二 酵母核糖核酸的水解及组分鉴定 原理:酵母核酸中 RNA 含量较多。加硫酸煮沸可使 RNA 水解,可以生成戊糖,碱基和磷酸。各种成分以下列反应鉴定 1,核糖与苔黑酚试剂反应呈鲜绿色。脱氧核糖与二苯胺试剂反应生成蓝色化合物,而核糖无此反应。2,嘌呤碱与硝酸银能产生白色的嘌呤银化物沉淀。3,磷酸与钼酸铵试剂作用能产生黄色的磷钼酸铵沉淀。思考题(2)现有三瓶未知溶液,分别是蛋白质,糖和 RNA,常用什么试剂或方法进行鉴定?糖应该是用斐林试剂 会出现砖红色沉淀;蛋白质是双缩脲试剂 会出现紫色反应 RNA 是用吡罗红检测的 会出现红色反应 实验三 天然产物中重要营养功能成分的提取和测定 原理:在强
2、碱性溶液中,双缩脲与硫酸铜形成紫色的络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能通过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都具有双缩脲反应。蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。其颜色的深浅与蛋白质分子量级氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。思考题(1)怎样分离卵磷脂和简单脂可以用丙酮分离卵磷脂和简单脂,因为卵磷脂溶于有机溶剂但不溶于丙酮。(2)写出卵磷脂的结构式,指出哪一部分是极性部分,哪一部分是非极性部分?(3)OH l R-CH-O-P=O l OR(4)为什么卵磷脂是良好的乳化剂?卵磷脂属于一种混合物,是存在于动植物组织以及卵黄之中的一组黄褐色的油脂性物质
3、,其构成成分包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。卵磷脂有时还是纯磷脂酰胆碱的同义词。从化学名称可见卵磷脂主要成分为纯磷脂酰胆碱,是一种含有两亲基团的离子型表面活性剂,亲油端为长链的油脂、磷脂、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯等,亲水端为胆碱的部分基团,胆碱在化学上为(-羟乙基)三甲基氨的氢氧化物。胆碱胆碱呈无色味苦的水溶性白色浆液,有很强的吸湿性,暴露于空气中能很快吸水。胆碱是季胺碱。符合表面活性剂中乳化剂的条件。实验四 温度和调节剂对酶活性的影响 原理:酶促反应开始时,反应速度随温度升高增快。达到最大反应速度是的温度称为某种酶的最适温度。当达到最适温度后,继续升高温度,引起
4、蛋白质变性,酶促反应速度反而逐步下降,以致完全停止。氯化钠喂唾液淀粉酶的激活剂,硫酸铜为其抑制剂。思考题(1)何谓酶的最适温度和最适 PH?最适温度:酶促反应开始时,反应速度随温度升高增快。达到最大反应速度是的温度称为某种酶的最适温度。最适 PH:在一定 pH 值范围内酶的活性是随温度的变化而变化的,其趋势是先上升在下降,之间的最高点既是最适 pH 值(2)说明温度,PH 和抑制剂对酶反应速度的影响 pH、温度、抑制剂通过影响酶的活性来影响酶促反应的速率。pH 和温度的变化情况不同,既可以降低酶的活性,也可以提高,所以它们既可以加快酶促反应的速度,也可以减慢;抑制剂都会降低酶的活性,使酶促反应的速度降低