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1、精品学习资源生物化学摸索题答案【篇一：生物化学课后答案】s=txt 第三章 氨基酸提要氨基酸是两性电解质；当ph 接近 1 时，氨基酸的可解离基团全部 质子化，当 ph 在 13 左右时，就全部去质子化；在这中间的某一ph因不同氨基酸而异，氨基酸以等电的兼性离子h3n+chrcoo-状态存在；某一氨基酸处于净电荷为零的兼性离子状态时的介质ph称为该氨基酸的等电点，用pi 表示；参加蛋白质组成的氨基酸中色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸在紫外区有光吸取，这是紫外吸取法定量蛋白质的依据；核磁共振nmr 波谱技术在氨基酸和蛋白质的化学表征方面起重要作用；氨基酸分析别离方法主要是基于氨基酸的酸碱性质和极性大小；
2、常用方法有离子交换柱层析、高效液相层析hplc 等；习题以下氨基酸的单字母和三字母的缩写符号：精氨酸、天冬氨酸、谷氨酰氨、谷氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸； 见表 3-1表 3-1氨基酸的简写符号名称 三字母符号 单字母符号 名称丙氨酸 alanine ala a亮氨酸 leucine三字母符号 单字母符号 leulm 精氨酸 arginine arg r赖氨酸 lysine lys k天冬酰氨asparagines asn n甲硫氨酸 蛋氨酸 methionine met欢迎下载精品学习资源天冬氨酸 aspartic acid asp d asn 和/或 asp asx b半胱氨酸 cyst
3、eine cys c 谷氨酰氨 glutamine gln q 谷氨酸 glutamic acid glu e gln 和/或 glu gls z甘氨酸 glycine gly g苯丙氨酸 phenylalaninepro p丝氨酸serine ser s苏氨酸 threonine thr t phe f脯氨酸 praline 色氨酸tryptophantrp w组氨酸 histidine his h酪氨酸 tyrosine tyr y异亮氨酸 isoleucine ile i缬氨酸 valine val v解： ph = pka + lg20% pka = 10.53 见表 3-3 ， p1
4、334、运算以下物质0.3mol/l溶液的 ph ： a 亮氨酸盐酸盐； b 亮氨酸钠盐； c 等电亮氨酸；a 约 1.46,b 约 11.5, c 约 6.055、依据表 3-3 中氨基酸的 pka 值，运算以下氨基酸的pi 值：丙氨酸、半胱氨酸、谷氨酸和精氨酸；pi:6.02;5.02;3.22;10.76解： pi = 1/2 pka1+ pka2 piala = 1/2 picys = 1/2 piglu = 1/2 欢迎下载精品学习资源piala = 1/26、向 1l1mol/l的处于等电点的甘氨酸溶液加入0.3molhcl，问所得溶液的 ph 是多少？假如加入 0.3mol na
5、oh以代替 hcl 时， ph 将是多少？ ph ： 2.71 ；9.237、将丙氨酸溶液 400ml 调剂到 ph8.0 ，然后向该溶液中加入过量的甲醛，当所得溶液用碱反滴定至 ph8.0 时，消耗 0.2mol/l naoh 溶液 250ml ；问起始溶液中丙氨酸的含量为多少克？ 4.45g9、说明用含一个结晶水的固体组氨酸盐酸盐和1mol/l koh配制 1lph6.5的 0.2mol/l组氨酸盐缓冲液的方法 取组氨酸盐酸盐41.92g0.2mol，加入 352ml 1mol/l koh，用水稀释至 1l10 、为什么氨基酸的茚三酮反映液能用测压法定量氨基酸？11 、l-亮氨酸溶液在 2
6、0cm 旋光管中测得的旋光度为 +1.81o ；运算 l- 亮氨酸在 6mol/l hcl中的比旋 a ；a=+15.1o12 、标出异亮氨酸的 4 个光学异构体的 r， s 构型名称； 参考图3-1513 、甘氨酸在溶剂a 中的溶解度为在溶剂 b 中的 4 倍，苯丙氨酸在溶剂 a 中的溶解度为溶剂 b 中的两倍；利用在溶剂a 和 b 之间的逆流分溶方法将甘氨酸和苯丙氨酸分开；在起始溶液中甘氨酸含量为 100mg，苯丙氨酸为 81mg ，试答复以下问题： 1 利用由 4 个分溶管组成的逆流分溶系统时，甘氨酸和苯丙氨酸各在哪一号分溶管中含量最高？ 2在这样的管中每种氨基酸各为多少毫克？1第4 管
7、和第 3 管； 251.2mg gly+24mg phe和 38.4mggly+36mg phe解：依据逆流分溶原理，可得：对于 gly ：kd = ca/cb = 4 = q动相 /p 静相 p+q = 1 = 1/5 + 4/5欢迎下载精品学习资源4 个分溶管分溶 3 次： 1/5 + 4/5 3=1/125+2/125+48/125+64/125对于 phe ： kd = ca/cb = 2 = q动相 /p 静相 p+q = 1 = 1/3 + 2/34 个分溶管分溶 3 次： 1/3 + 2/3 3=1/27+6/27+12/27+8/27故利用 4 个分溶管组成的分溶系统中，甘氨酸
8、和苯丙氨酸各在 4 管和第 3 管中含量最高，其中：14 、指出在正丁醇：醋酸：水的系统中进行纸层析时，以下混合物中氨基酸的相对迁移率：1ile, lys; 2phe, ser 3ala, val, leu; 4pro, val 5glu, asp; 6tyr, ala, ser, his.ile lys ；phe, ser ；leu val ala,； val pro ； gluasp ； tyr alaser his解：依据 p151 图 3-25 可得结果；15 将含有天冬氨酸 pi=2.98 、甘氨酸 pi=5.97 、亮氨酸 pi=6.53和赖氨酸 pi=5.98 的柠檬酸缓冲液，加
9、到预先同样缓冲液平稳过的强阳离交换树脂中，随后用爱缓冲液析脱此柱，并分别收集洗出液， 这 5 种氨基酸将按什么次序洗脱下来？ asp, thr, gly, leu, lys解：在 ph3 左右，氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是减刑氨基酸 a2+ 中性氨基酸 a+ 酸性氨基酸 a0 ；因此氨基酸的洗出次序大体上是酸性氨基酸、中性氨基酸，最终是碱性氨基酸，由于氨基酸和树脂之间仍存在疏水相互作用，所以其洗脱次序为：asp, thr, gly, leu, lys； 第四章 蛋白质的共价结构提要欢迎下载精品学习资源蛋白质分子是由一条或多条肽链构成的生物大分子；多肽链是由氨基酸通过肽键共价
10、连接而成的，各种多肽链都有自己特定的氨基酸序列；蛋白质的相对分子质量介于 6000 到 1000000 或更高；蛋白质分为两大类：单纯蛋白质和缀合蛋白质；依据分子外形可分为纤维状蛋白质、球状蛋白质和膜蛋白质；此外仍可按蛋白质的生物学功能分类；为了表示蛋白质结构的不同组织层次，常常使用一级结构、二级结构、三级结构和四级结构这样一些特地术语；一级结构就是共价主链的氨基酸序列，有时也称化学结构；二、三和四级结构又称空间结构即三维结构或高级结构；蛋白质的生物功能打算于它的高级结构，高级结构是由一级结构即氨基酸序列打算的，二氨基酸序列是由遗传物质dna 的核苷酸序列规定的；肽键 co nh 是连接多肽链
11、主链中氨基酸残缺的共价键，二硫键是使多肽链之间交联或使多肽链成环的共价键；多肽链或蛋白质当发生部分水解时，可形成长短不一的肽段；除部分水解可以产生小肽之外，生物界仍存在很多游离的小肽，如谷胱甘肽等；小肽晶体的熔点都很高，这说明短肽的晶体是离子晶格、在水溶液中也是以偶极离子存在的；测定蛋白质一级结构的策略是：1测定蛋白质分子中多肽链数目；2拆分蛋白质分子的多肽链；3断开多肽链内的二硫桥；4分析每一多肽链的氨基酸组成；5鉴定多肽链的n- 末端和 c- 末端残基； 6断裂多肽链成较小的肽段，并将它们别离开来；7测定各肽段的氨基酸序列；8利用重叠肽重建完整多肽链的一级结构； 9确定半胱氨酸残基形成的s
12、-s 交联桥的位置；序列分析中的重要方法和技术有：测定n- 末端基的苯异硫氰酸酯pitc 法，分析 c- 末端基的羧肽酶法，用于多肽链局部断裂的酶裂解和 cnbr化学裂解，断裂二硫桥的巯基乙醇处理，测定肽段氨基酸欢迎下载精品学习资源序列的 edman化学降解和电喷射串联质谱技术，重建多肽链一级序列的重叠肽拼凑法以及用于二硫桥定位的对角线电泳等；在不同生物体中行使相同或相像功能的蛋白质称同源蛋白质；同源蛋白质具有明显的序列相像性称序列同源 ,两个物种的同源蛋白质， 其序列间的氨基酸差异数目与这些物种间的系统发生差异是成比例的；并依据同源蛋白质的氨基酸序列资料建立起进化树；同源蛋白质具有共同的进化
13、起源；在生物体内有些蛋白质常以前体形试合成，只有按肯定方式裂解除去部分肽链之后才显现生物活性，这一现象称蛋白质的激活；血液凝固是涉及氨基酸序列断裂的一系列酶原被激活的结果，酶促激活的级联放大，使血凝块快速形成成为可能；凝血酶原和血清蛋白原是两个最重要的血凝因子；血纤蛋白蛋白原在凝血酶的作用下转变为血清蛋白凝块血块的主要成分；我国在 20 世纪 60 岁月首次在世界上人工合成了蛋白质 结晶牛胰岛素；近二、三十年进展起来的固相肽合成是掌握合成技术上的一个庞大进步，它对分子生物学和基因工程也就具有重要影响和意 义；至今利用 merrifield固相肽合成仪已胜利地合成了很多肽和蛋白质； 习题1. 假
14、如一个相对分子质量为12000 的蛋白质，含 10 种氨基酸，并假设每种氨基酸在该蛋白质分子中的数目相等，问这种蛋白质有多少种可能的排列次序？ 10100解： 1012000/120=101002、有一个 a 肽，经酸解分析得知为lys 、his 、asp 、glu2 、ala 以及 val 、tyr 突然两个 nh3 分子组成；当 a 肽与 fdnb 试剂反应后得dnp-asp ；当用羧肽酶处理后得游离缬氨酸；假如我们在试验中将a 肽用胰蛋白酶降解时，得到两种肽，其中一种lys 、asp 、glu 、ala 、tyr 在 ph6.4 时，净电荷为零，另一种 his 、glu 以及 val 可
15、给除 dnp-his ，在 ph6.4 时，带正电荷；此外，a 肽用糜蛋白酶降欢迎下载精品学习资源解时，也得到两种肽，其中一种asp 、ala 、tyr 在 ph6.4 时全中性，另一种 lys 、his 、glu2 以及 val 在 ph6.4 时带正电荷；问a 肽的氨基酸序列如何？ asn-ala-tyr-glu-lys-his-gln-val解： 1、n- 末端分析： fdnb 法得： asp- ；2、c- 末端分析：羧肽酶法得： -val ；3、胰蛋白酶只断裂赖氨酸或精氨酸残基的羧基形成的肽键，得到的是以 arg 和 lys 为 c- 末端残基的肽断；酸水解使asnasp+ nh4+，
16、 由已知条件 lys 、asp 、glu 、ala 、tyr 可得： asn- - - -lys- - -val ；4、fdnb 法分析 n- 末端得 dnp-his ，酸水解使 gln glu+nh4+ 由已知条件 his 、glu 、val 可得： asn- - - -lys-his-gln-val；5、糜蛋白酶断裂 phe 、trp和 tyr等疏水氨基酸残基的羧基端肽键；由题，得到的一条肽 asp 、ala 、tyr 结合 3、 4可得该肽的氨基酸序列为： asn-ala-tyr-glu-lys-his-gln-val它们的氨基酸组成分别是arg 、pro 和 phe 、tyr 、lys
17、 、ser 、ala ；试问此七肽的一级结构怎样？ 它是一个环肽，序列为： -phe-ser- ala-tyr-lys-pro-arg-2糜蛋白酶断裂phe 、trp 和 tyr 等疏水氨基酸残基的羧基端肽键，由已知两肽段氨基酸组成ala 、tyr 、ser 和 pro 、phe 、lys 、arg 可得： - - -tyr-和- - - -phe-；3由 2得的两肽段分别与 fdnb 反应，分别产生dnp-ser和dnp-lys可知该两肽段的 n- 末端分别为 -ser- 和-lys- ，结合 2可得：-ser-ala-tyr-和-lys- - -phe-；4胰蛋白酶专一断裂 arg 或 l
18、ys 残基的羧基参加形成的肽键，由题生成的两肽段氨基酸组成arg 、pro 和 phe 、tyr 、lys 、ser 、ala 可得： -pro-arg-和- - - - -lys； 综合 2、 3、 4可得此肽一级结构为： -lys-pro-arg-phe-ser-ala-tyr-欢迎下载精品学习资源6、一个多肽可复原为两个肽段，它们的序列如下：链1 为 ala-cys- phe-pro-lys-arg-trp-cys-arg- arg-val-cys ；链 2 为 cys-tyr-cys-phe-cys；当用嗜热菌蛋白酶消化原 多肽具有完整的二硫键时可用以下各肽：1 ala 、cys2 、
19、val ； 2 arg 、lys 、phe 、pro ； 3arg2 、cys2 、trp 、tyr ； 4cys2 、phe ；试指出在该自然多肽中二硫键的位置；结构如以下图 s-sala-cys-phe-pro-lys-arg-trp-cys-arg-arg-val_cys sscys-tyr-cys-phe-cys解：嗜热菌蛋白酶作用专一性较差，依据题中已知条件：1消化原多肽得到 ala 、cys2 、val ，说明链 1 在 2 位 cys后及 11 位 val 前发生断裂， 2 位 cys 与 12 位 cys 之间有二硫键；2由链 1 序列可得该肽段序列为： -phe-pro-ly
20、s-arg-；3由 1 2可知该肽段 arg2 、cys2 、trp 、tyr 中必有一cys 来自链 2，另一 cys 为链 1 中 8 位 cys ，即链 1 中 8 位 cys 与链 2 中的一个 cys 有二硫键；4嗜热菌蛋白酶能水解tyr 、phe 等疏水氨基酸残基，故此肽cys2 、phe 来自链 2，结合 3中含 tyr ，可知 3中形成的二硫键为链 1 8 位 cys 与链 2 中 3 位 cys 与链 2 中 3 位 cys 之间；4中 cys2 、phe 说明链 2 中 1 位 cys 与 5 位 cys 中有二硫键； 综合 1、 2、 3、 4可得结果；7、一个十肽的氨基
21、酸分析说明其水解液中存在以下产物： nh4+ asp glu tyr argmet pro lysser phe欢迎下载精品学习资源并观看以下事实： 1用羧肽酶 a 和 b 处理该十肽无效； 2胰蛋白酶处理产生两各四肽和游离的lys ； 3梭菌蛋白酶处理产生一个四肽和一个六肽； 4溴化氢处理产生一个八肽和一个二肽， 用单字母符号表示其序列位np ； 5胰凝乳蛋白酶处理产生两个三肽和一【篇二：生化课后习题答案】学讨论的对象和内容是什么？解答：生物化学主要讨论 :1生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能； 2生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化； 3生物遗传信息的储存、传递和表达；4生
22、物体新陈代谢的调剂与掌握；2. 你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关；提示：生物化学是生命科学的基础学科，留意从不同的角度，去懂得并运用生物化学的学问；3. 说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相像的规侓；解答： 生物大分子在元素组成上有相像的规侓性；碳、氢、氧、氮、磷、硫等 6 种是 解答 蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素；碳原子具有特别的成键性质，即碳原子最外层的4 个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳仍可与氮、氧和氢原子形成共价键；碳与被键合原子形成4 个共价键的性质 ,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基 nh2
23、、羟基oh 、羰基 c 、羧基 cooh 、巯基 sh 、磷酸基 po4等功能基团；这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质 的很多关键作用亲密相关；生物大分子在结构上也有着共同的规律欢迎下载精品学习资源性； 生物大分子均由相同类型的构件通过一定的共价键聚合成链状， 其主链骨架出现周期性重复；构成蛋白质的构件是20 种基本氨基 酸；氨基酸之间通过肽键相连；肽链具有方向性n 端c 端 ,蛋白质主链骨架呈 肽单 位重复；核酸的构件是核苷酸 ,核苷酸通过 3, 5- 磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性 5 、3 核, 酸的主链骨架呈 磷酸-核糖或脱氧核糖重复；构成
24、脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖 间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复；二 蛋白质化学1. 用于测定蛋白质多肽链n 端、 c 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？解答： 1 n- 末端测定法：常采纳2, 4二硝基氟苯法、 edman 降解法、丹磺酰氯法； 2, 4二硝基氟苯 dnfb或 fdnb 法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与2, 4二硝基氟苯 2, 4dnfb 反应 sanger反应 生成 dnp多肽或 dnp 蛋白质； ， 由于 dnfb与氨基形成的键对酸水解远比 肽键稳固，因此dnp 多肽经酸水解后，
25、只有n 末端氨基 酸为黄色 dnp 氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸； 丹磺酰氯 dns 法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯dnscl 反应 生成 dns 多肽或 dns 蛋白质； 由于 dns与氨基形成的键对酸水解 远比肽键稳固，因此 dns 多肽经酸水解后，只有n 末端氨基酸为剧烈的荧光物质 dns 氨基酸，其余的都 是游离氨基酸； 苯异硫氰酸脂 pitc 或 edman降解法：多肽或蛋白质的游离末端氨基 与异硫氰 酸苯酯 pitc 反应 edman反应 ，生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质；在酸性有机溶剂中加热时， n 末端的 ptc 氨基酸发生环化， 生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽
26、链上掉下来，除去n 末端氨基酸后剩下的肽链仍旧是完整的； 氨肽酶法： 氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的 n 端逐个地向里切；欢迎下载精品学习资源依据不同的反应时间测出酶水说明放的氨基酸种类和数量， 按反应时间和残基释放量作动力 学曲线，就能知道该蛋白质的 n 端残基序列；2c 末端测定法：常采纳肼解法、复原法、羧肽酶法；肼解法： 蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除c 端氨基酸以游离形式存 在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物； 复原法： 肽链 c 端氨基酸可用硼氢2. 测得一种血红蛋白含铁0.426% ，运算其最低相对分子质量；一种纯酶按质量运算含 亮氨酸 1.6
27、5% 和异亮氨酸2.48% ，问其最低相对分子质量是多少？由于亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量相等，所以亮氨酸和异亮氨 酸的残基数之比为： 1.65%:2.48%=2:3，因此，该酶分子中至少含有 2 个亮氨酸， 3 个异亮氨酸； 24 何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区分？解答：蛋白质变性的概念：自然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的 生物活性，并相伴着物理化学性质的转变，这种作用称为蛋白质的变性；变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态，一级结构不破坏；蛋白质变性后的表现： 生物学活性消逝； 理化性质转变：溶解度下降，黏度增 加，紫
28、外吸取增加，侧链反应增强，对酶的作用敏锐，易被水解； 蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳固的胶体；假如在蛋白质溶液中加入适当的试剂， 破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，就蛋白质胶体溶液就不稳固而显现沉淀现象；沉淀机理：破坏蛋白质【篇三：高校 生物化学摸索题答案】化学讨论的对象和内容是什么？欢迎下载精品学习资源解答：生物化学主要讨论 :1生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能；2生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化；3生物遗传信息的储存、传递和表达；4生物体新陈代谢的调剂与掌握；2. 你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关；提示：生物化学是生命科学的基础学科，留意
29、从不同的角度，去懂得并运用生物化学的学问；3. 说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相像的规侓；解答：生物大分子在元素组成上有相像的规侓性；碳、氢、氧、氮、磷、硫等 6 种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素；碳原子具有特别的成键性质，即碳原子最外层的4 个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳仍可与氮、氧和氢原子形成共价键；碳与被键合原子形成4 个共价键的性质 , 使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物；特别的成键性质适应了生物大分子多样性的需要；氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基 nh2 、羟基 oh 、羰基 c 、羧基 cooh 、巯基 sh 、
30、磷酸基 po4 等功能基团；这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的很多关键作用亲密相关；生物大分子在结构上也有着共同的规律性；生物大分子均由相同类 型的构件通过肯定的共价键聚合成链状，其主链骨架出现周期性重 复；构成蛋白质的构件是20 种基本氨基酸；氨基酸之间通过肽键相连；肽链具有方向性 n 端c端 ,蛋白质主链骨架呈 “肽单位 ”重复； 核酸的构件是核苷酸 ,核苷酸通过 3, 5-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性 5 、3,核酸的主链骨架呈 “磷酸 -核糖或脱氧核糖”欢迎下载精品学习资源重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也 是一
31、种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连， 淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复；2蛋白质化学1. 用于测定蛋白质多肽链 n 端、 c 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？解答： 1 n- 末端测定法：常采纳 2,4 二硝基氟苯法、 edman 降解法、丹磺酰氯法； 2,4 二硝基氟苯 dnfb 或 fdnb 法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与 2,4 二硝基氟苯 2,4 dnfb 反应sanger反应，生成 dnp 多肽或 dnp 蛋白质；由于 dnfb 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳固，因此dnp 多肽经酸水解后， 只有 n 末端氨基酸为黄色 dnp 氨基酸衍生物，
32、其余的都是游离氨基酸； 丹磺酰氯 dns 法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯dnscl 反应生成 dns 多肽或 dns 蛋白质；由于 dns 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳固，因此dns 多肽经酸水解后，只 有 n 末端氨基酸为剧烈的荧光物质dns 氨基酸，其余的都是游离氨基酸； 苯异硫氰酸脂 pitc 或 edman 降解法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯 pitc 反应 edman反应，生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质；在酸性有机溶剂中加热时，n 末端的ptc 氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，除去 n 末端氨基酸后剩下的肽链仍旧是完整的； 氨肽酶
33、法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的n 端逐个地向里切；依据不同的反应时间测出酶水说明放的氨基酸种类和数量，按反应时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的 n 端残基序列；2c 末端测定法：常采纳肼解法、复原法、羧肽酶法；欢迎下载精品学习资源肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除c 端氨基酸以游离形式存在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物； 羧肽酶法：是一类肽链外切酶，专一的从肽链的c 末端开头逐个降解，释放出游离的氨基酸；被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化；依据释放的氨基酸量摩尔数与反应时间的关系， 便可以知道该肽链的 c 末端氨基酸序列；2
34、. 测得一种血红蛋白含铁0.426% ，运算其最低相对分子质量；一种纯酶按质量运算含亮氨酸1.65% 和异亮氨酸 2.48% ，问其最低相对分子质量是多少？解答：1血红蛋白：2酶：由于亮氨酸和异亮氨酸的相对分子质量相等，所以亮氨酸和异亮氨酸的残基数之比为：1.65%:2.48%=2:3，因此，该酶分子中至少含有2 个亮氨酸， 3 个异亮氨酸；3. 指出下面 ph 条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向移动，即正极，负极，仍是保持原点？1胃蛋白酶，在 ph 5.0 ；2血清清蛋白，在ph 6.0 ；解答： 1胃蛋白酶 pi 1.0 环境 ph 5.0 ，带负电荷，向正极移动；2血清清蛋白 pi 4.
35、9 环境 ph 6.0 ，带负电荷，向正极移动；欢迎下载精品学习资源4. 何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区分？解答：蛋白质变性的概念：自然蛋白质受物理或化学因素的影响后， 使其失去原有的生物活性，并相伴着物理化学性质的转变，这种作 用称为蛋白质的变性；变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从紧密有序的状态变成松散无序的状态，一级结构不破坏；蛋白质变性后的表现：. 生物学活性消逝； . 理化性质转变：溶解度下降，黏度增加，紫外吸取增加，侧链反应增强，对酶的作用敏锐，易被水解；蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳固的胶体；假如在蛋白质溶液中加入适当的试剂，破坏了蛋白质的
36、水膜或中和了蛋白质的电荷，就蛋白质胶体溶液就不稳固而显现沉淀现象；沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和外表的净电荷；蛋白质的沉淀可以分为两类：1可逆的沉淀：蛋白质的结构未发生显著的变化，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原先的溶剂中，并保持自然性质；如盐析 或低温下的乙醇或丙酮短时间作用蛋白质；2不行逆沉淀：蛋白质分子内部结构发生重大转变，蛋白质变性而沉淀，不再能溶于原溶剂；如加热引起蛋白质沉淀，与重金属或 某些酸类的反应都属于此类；蛋白质变性后，有时由于维护溶液稳固的条件仍旧存在，并不析出；因此变性蛋白质并不肯定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都 已经变性；1测定小肽的氨基酸序列；2鉴定肽的
37、氨基末端残基；欢迎下载精品学习资源3不含二硫键的蛋白质的可逆变性；假设有二硫键存在时仍需加什么试剂？4在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键；5在甲硫氨酸残基羧基侧水解肽键；6在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键；解答： 1异硫氰酸苯酯； 2丹黄酰氯； 3脲； .- 巯基乙醇复原二硫键； 4胰凝乳蛋白酶； 5cnbr ； 6胰蛋白酶；6由以下信息求八肽的序列；1酸水解得 ala ， arg ， leu ， met ， phe ， thr ， 2val ；2sanger试剂处理得 dnp-ala ；3胰蛋白酶处理得 ala ， arg ， thr 和 leu ， met ， phe ， 2val ；当以 s
38、anger试剂处理时分别得到 dnp-ala和 dnp-val ；4溴化氰处理得ala ， arg ，高丝氨酸内酯， thr ， 2val ，和 leu ，phe ，当用 sanger试剂处理时，分别得 dnp-ala和 dnp-leu ；解答：由 2推出 n 末端为 ala ；由 3推出 val 位于 n 端第四， arg 为第三，而 thr 为其次；溴化氰裂解，得出n 端第六位是 met ， 由于第七位是 leu ，所以 phe 为第八；由 4，第五为 val ；所以八肽为： ala-thr-arg-val-val-met-leu-phe；8. 当一种四肽与fdnb 反应后，用 5.7mo
39、l/lhcl水解得到 dnp-val 及其他 3 种氨基酸；当这四肽用胰蛋白酶水解时发觉两种碎片段； 其中一片用 libh4 下标复原后再进行酸水解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸；试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的？解答： 1四肽与 fdnb 反应后，用 5.7mol/lhcl水解得到 dnp-val ， 证明 n 端为 val ；欢迎下载精品学习资源2libh4 复原后再水解，水解液中有氨基乙醇，证明肽的c 端为gly ；3水解液中有在浓 h2so4条件下能与乙醛酸反应产生紫红色产物的氨基酸，说明此氨基酸为trp ；说明 c 端为 gly
40、 trp 4依据胰蛋白酶的专一性，得知n 端片段为 val arg lys ， 以 1、 2、 3结果可知道四肽的次序：n val arg lys trp gly c；9. 概述测定蛋白质一级结构的基本步骤；解答： 1测定蛋白质中氨基酸组成；2蛋白质的 n 端和 c 端的测定；3应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白质肽链断裂，各得意到一系列大小不同的肽段；4别离提纯所产生的肽，并测定出它们的序列；5从有重叠结构的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸排列次序；假如蛋白质含有一条以上的肽链，就需先拆开成单个肽链再按上述原就确定其一级结构；如是含二硫键的蛋白质，也必需在测定其氨 基酸排
41、列次序前，拆开二硫键，使肽链分开，并确定二硫键的位置；拆开二硫键可用过甲酸氧化，使胱氨酸部分氧化成两个半胱氨磺酸；3 核酸1. 电泳别离四种核苷酸时，通常将缓冲液调到什么ph ？此时它们是向哪极移动？移动的快慢次序如何. 将四种核苷酸吸附于阴离子交换柱上时，应将溶液调到什么ph ？ 假如用逐步降低ph 的洗脱液对阴离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱别离，其洗脱顺序如何？为什么？欢迎下载精品学习资源解答： 电泳别离 4 种核苷酸时应取 ph3.5的缓冲液，在该 ph 时， 这 4 种单核苷酸之间所带负电荷差异较大，它们都向正极移动，但移动的速度不同，依次为： umpgmpampcmp； 应取 p
42、h8.0 ，这样可使核苷酸带较多负电荷，利于吸附于阴离子交换树脂柱；虽然ph 11.4时核苷酸带有更多的负电荷，但ph 过高对别离不利； 当不考虑树脂的非极性吸附时，依据核苷酸负电荷的多少来打算洗脱速度，就洗脱次序为 cmpamp gmp ump，但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附，嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的 3 倍；静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱次序为： cmp amp ump gmp；2. 为什么 dna 不易被碱水解，而 rna 简单被碱水解 .解答：由于 rna 的核糖上有 2.-oh基，在碱作用下形成 2.,3.- 环磷酸酯，连续水解产生 2.
43、- 核苷酸和 3.- 核苷酸； dna 的脱氧核糖上无2.-oh 基，不能形成碱水解的中间产物，故对碱有肯定抗性；3. 一个双螺旋 dna 分子中有一条链的成分 a = 0.30 ，g = 0.24 ， 请估计这一条链上的 t 和c 的情形； 互补链的 a ，g ，t 和c 的情形；解答： t + c = 10.30 0.24 = 0.46 ； t = 0.30，c = 0.24，a + g = 0.46；4. 对双链 dna 而言， 假设一条链中 a + g/t + c= 0.7，就互补链中和整个 dna 分子中 a+g/t+c 分别等于多少？ 假设一条链中a + t/g + c= 0.7，
44、就互补链中和整个 dna 分子中 a + t/g + c分别等于多少 ？8. 概述超螺旋 dna 的生物学意义；解答： 超螺旋 dna 比放松型 dna 更紧密，使 dna 分子的体积更小，得以包装在细胞内； 超螺旋会影响双螺旋分子的解旋才能,从而影响到 dna 与其他分子之间的相互作用； 超螺旋有利于 dna 的转录、复制及表达调控；欢迎下载精品学习资源9. 为什么自然界的超螺旋dna 多为负超螺旋？解答：环状dna自身双螺旋的过度旋转或旋转不足都会导致超螺旋， 这是由于超螺旋将使分子能够释放由于自身旋转带来的应力；双螺旋过度旋转导致正超螺旋，而旋转不足将导致负超螺旋；虽然两种超螺旋都能释放应力，但是负超螺旋时，假如发生dna 解链即氢链断开，部分双螺旋分开就能进一步释放应力，而dna 转录和复制需要解链；因此