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1、血糖(血糖(Glu)的测定)的测定Assays for Serum Glucose吴民泸吴民泸吴民泸吴民泸血糖(血糖(Glu)的测定)的测定(葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法)一、原理一、原理 二、测定方法二、测定方法 三、参考值三、参考值 四、临床意义四、临床意义 五、方法学评价五、方法学评价 六、注意事项六、注意事项一、原理一、原理-D-D-葡萄糖葡萄糖+O+O2 2+H+H2 2O D-O D-葡萄糖酸葡萄糖酸+H+H2 2O O2 2 (GODGOD:葡萄糖氧化酶):葡萄糖氧化酶)H H2 2O O2 2+4-AAP+4-AAP+酚酚 2H 2H2 2+红色醌类化合物红色醌类化合物 (4-
2、AAP4-AAP:4 4氨基氨替比林)氨基氨替比林)(PODPOD:过氧化物酶):过氧化物酶)红色醌类化合物生成量与样品中葡萄糖含量成正比,红色醌类化合物生成量与样品中葡萄糖含量成正比,与经过同样处理的葡萄糖校准液进行比较,即可计算出与经过同样处理的葡萄糖校准液进行比较,即可计算出样品中葡萄糖的含量。样品中葡萄糖的含量。血糖的来源与去路。血糖的来源与去路。二、测定方法二、测定方法1、加样、加样 各管充分混匀置37水浴10分钟后,室温冷却测定 试剂蒸样品管(U)标准管(S)空白管(B)血 清(ml)0.02标 准液(ml)0.02蒸 馏水(ml)2.002.002.02工作试剂(ml)2.002
3、.002.002、分光光度计测定方法:波长505nm,以空白管调零,测定标准管和样品管吸光度值,按公式计算测定结果。计算公式:Glu含量(mmol/L)=Cs其中:Cs=5.55 mmol/L 三、参考值:三、参考值:3.61 6.11mmol/L四、临床意义四、临床意义1、生理性或暂时性高血糖:餐后12h 摄入高糖饮食、情绪激动等。2、病理性高血糖:糖尿病其它内分泌系统的疾病:垂体前叶功能亢进(巨人症、肢端肥巨人症、肢端肥 大症大症)肾上腺皮质功能亢进(库欣病)、甲状腺功能亢进、嗜鉻细胞瘤等;应急性高血糖:如颅脑损伤、颅内高压、脑卒中等;脱水引起的血液浓缩,如呕吐、腹泻、高热;严重的肝硬化使
4、葡萄糖不能转化为肝糖原储存;胰腺病变。3、生理性或暂时性低血糖:饥饿和剧烈运动。4、病理性低血糖:胰岛细胞增生或肿瘤引起的胰岛素分泌过多;对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体、肾上腺皮质或甲状腺机能减退而使生长素、肾上腺素分泌减少;严重肝病使肝的生糖作用降低或肝糖原储存缺乏,肝脏不能有效地调节血糖。5、药物的影响:某些药物可以诱导血糖升高或降低。引起血糖升高的药物有:某些利尿药、口服避孕药、儿茶酚胺、吲哚美幸、咖啡因、甲状腺素、肾上腺素等;使血糖降低的药物:降糖药、中毒剂量对乙酰氨基酚、抗组胺药、致毒量阿司匹林、酒精、胍乙啶、普奈洛尔等。五、方法学评价五、方法学评价1、线性范围 22.24mmol/L,回收率 94-105%,CV 0.7-2.0%,批间2%,日间 2-3%2、本法特异性强 左旋多巴、尿酸、vitc、胆红素、谷胱甘肽等达一定浓度时可竞争过氧化氢使结果偏低 半胱氨酸(促G生成)使结果偏高。六、注意事项六、注意事项 1、样品为空腹血清、血浆;2、制备血清时防止红细胞溶血;3、样品应在低温条件下运输保存;4、试剂使用后立即盖紧瓶盖,避免污染。