叶绿体色素提取与分离(精品).ppt

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1、叶绿体中色素的提取和分离一、实验原理一、实验原理1、叶绿体中的色素可以溶解在有机溶剂丙酮中,因此可、叶绿体中的色素可以溶解在有机溶剂丙酮中,因此可以用丙酮提取叶绿体中的色素。以用丙酮提取叶绿体中的色素。2、叶绿体中的色素在层析液中溶解度高的随着展层液在、叶绿体中的色素在层析液中溶解度高的随着展层液在滤纸上扩散快,溶解度低的随着展层液在滤纸上扩散滤纸上扩散快,溶解度低的随着展层液在滤纸上扩散慢,不同的色素能通过在滤纸上的扩散速度不同而分慢,不同的色素能通过在滤纸上的扩散速度不同而分离开来。离开来。叶绿体中的色素组成叶绿体中的色素组成二、材料用具l干菠菜叶(取新鲜菠菜叶去叶柄,干菠菜叶(取新鲜菠菜

2、叶去叶柄,50 烘干或阴干);烘干或阴干);l研磨过滤器,干燥定性滤纸条研磨过滤器,干燥定性滤纸条(1*8 cm),展层瓶,点样棒;,展层瓶,点样棒;l丙酮,四氯化碳,无水硫酸钠。丙酮,四氯化碳,无水硫酸钠。三、实验步骤l1、提取、提取 取干菠菜叶取干菠菜叶0.5 g,丙酮丙酮2mL,充分研磨,充分研磨12 min,研磨用力适度。研磨用力适度。l2、点样、点样 蘸取提取液,距滤纸一端蘸取提取液,距滤纸一端1.5 cm点样,可重点样,可重复点样复点样1至至3次次,点样线宽度,点样线宽度2mm为宜。为宜。l3、分离。、分离。将滤纸条放入展层瓶中(已加好展层液和少将滤纸条放入展层瓶中(已加好展层液和

3、少量无水量无水Na2SO4),盖紧展层盖,静止展层。,盖紧展层盖,静止展层。4、结果、结果 滤纸上显示四条色素带(如下图)实验图:1:石油醚:丙酮:苯(20:2:1)2:四氯化碳 实验示意图四、注意事项(一)提取(一)提取1.研磨杆轻提数次,使混合充分。研磨杆轻提数次,使混合充分。2.在桌面上固定研磨,勿直接在手中进行研磨。在桌面上固定研磨,勿直接在手中进行研磨。(二)点样(二)点样 1.手拿滤纸上端两侧,防止污染滤纸。手拿滤纸上端两侧,防止污染滤纸。2.蘸取提取液,在空中停留片刻,有利于色蘸取提取液,在空中停留片刻,有利于色素浓缩。素浓缩。(三)分离(三)分离 滤纸不可贴展层瓶内壁。滤纸不可贴展层瓶内壁。附:研磨过滤器使用方法(一)、提取(一)、提取(二)、展层注意事项(1)使用本品后请及时清洗;使用本品后请及时清洗;(2)如滤布不易清洗,可将研磨头拆下取出滤如滤布不易清洗,可将研磨头拆下取出滤布;布;(3)请勿将有机溶剂溅洒在盒的封面、展层玻请勿将有机溶剂溅洒在盒的封面、展层玻璃与底盘连接部位;璃与底盘连接部位;(4)展层瓶为玻璃与塑料结合物,请轻拿轻放。展层瓶为玻璃与塑料结合物,请轻拿轻放。(5)在桌面上固定研磨,勿直接在手中进行研在桌面上固定研磨,勿直接在手中进行研磨。磨。谢谢!

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