《2015版中国药典微生物限度解析ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2015版中国药典微生物限度解析ppt课件.ppt（59页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。微生物限度微生物限度检查检查法法中国中国药药典典2015年版修年版修订订后将分后将分为为三个附三个附录录：1、非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法2、非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法3、非无菌药品微生物限度标准本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发
2、电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.1总则总则：环境、要求1.2计计数方法：数方法：平皿法、薄膜过滤法、最可能数法（MPN法）1.3计计数培养基适用性数培养基适用性检查检查和和供供试试品品计计数方法适用数方法适用性性试验试验：菌种及菌液制备、培养基适用性检查、计数方法适用性试验。1.4供供试试品品检查检查：检验量、供试品检查1.5结结果判断果判断1
3、.6稀稀释释液、冲洗液及培养基液、冲洗液及培养基1.非无菌非无菌产产品微生物限度品微生物限度检查检查：-微生物微生物计计数法数法本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合规定的微生物限度标准时，应按规定进行检验，包括样品的取样量和结果的判断等。除另有规定外，本法不适用于活菌制剂的检查。本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定
4、的检查方法。1.1总则总则：本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.1总则总则：环环境：境：微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。(在不低于GMP现行版要求的D级洁净环境、局部洁净度不低于B级的单向流空气区域内进行)【10版：在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内】。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。本标准适用于已投入商业运行的火力发
5、电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.1总则总则：如供试品有抗菌活性，应尽可能去除或中和。供试品检查时,若使用了中和剂或灭活剂，应确认其有效性及对微生物无毒性。供试液制备时如果使用了表面活性剂，应确认其对微生物无毒性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。平皿法平皿法薄膜薄膜过滤过滤法法最可能数法最可能数法（Most-Probable-N
6、umberMethod，简称MPN法）。MPN法用于微生物计数时精确度较差，但对于某些微生物污染量很小的供试品，MPN法可能是更适合的方法。供试品检查时,应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法，所选的方法必须具备检测充足样品量的能力，以保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。1.2计计数方法：数方法：本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。供试品的微生物计数方法应进行方法
7、适用性试验【10版：方法验证】，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，计数方法应重新进行适用性试验。1.3计计数培养基适用性数培养基适用性检查检查和和供供试试品品计计数方法适用性数方法适用性试验试验本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.3.1菌液制备及使用1.3.2计数培养基适用性检查1.3.3计数方法适用性试验1.3计计数培养基适用性数培养基适用性检查检查和和供供试试品品计计数方法适用性数方法适用性试验试验本标准
8、适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.3.1菌液制备及使用菌种菌种试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。1.3计计数培养基适用性数培养基适用性检查检查和和供供试试品品计计数方法适用性数方法适用性试验试验本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。菌液制备
9、后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在28，可在24小时内使用。稳定的黑曲霉孢子悬液可保存在28，在验证过的贮存期内使用。1.3.1菌液制菌液制备备及使用及使用本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.3.2计计数培养基适用性数培养基适用性检查检查【10版】版】每一试验菌株平行制备2管或2个平皿；接种量接种量50100cfu；同时，用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。结结果判定：果判定：若被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%，
10、且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致，判该培养基的适用性检查符合规定。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.3.2计计数培养基适用性数培养基适用性检查检查【15版】版】每一试验菌株平行制备2管或2个平皿；接种量不大于100cfu；同时，用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。结结果判定：果判定：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致；被检液体培养基管与对照培养基管比较，试验
11、菌应生长良好。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.3.3计计数方法适用性数方法适用性试验试验1.供试液制备2.接种和稀释3.抗菌活性的去除与灭活4.供试品中微生物的回收平皿法薄膜过滤法最可能数法（MPN法）5.结果判断本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.4.1检验检验量量检验量即一次试验所用的供试品量（g、ml或cm）。除另有规定
12、外,一般供试品的检验量为10g或10ml；膜剂为100cm；贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。检验时,应从2个以上最小包装单位中抽取供试品,大蜜丸还不得少于4丸,膜剂还不得少于4片。一般应随机抽取供试品，取规定容器数，混合，取规定量供试品进行检验。1.4供供试试品品检查检查本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。按计数方法适用性试验确认的计数方法进行供试品中需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的测定。胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基用于测定需氧菌总数；沙氏葡萄糖
13、琼脂培养基用于测定霉菌和酵母菌总数。阴性阴性对对照照试验试验以稀释剂代替供试液进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。如果阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。1.4.2供供试试品品检查检查本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。供供试试液制液制备备根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45。供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1小时。常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用，
14、应建立其他适宜的方法。1.4.2供供试试品品检查检查本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。供供试试液制液制备备水溶性供水溶性供试试品品取供试品，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，或pH7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。若需要，调节供试液pH值至68。必要时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。1.4.2供供试试品品检查检查本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电
15、机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.4.2供供试试品品检查检查供供试试液制液制备备水不溶性非油脂水不溶性非油脂类类供供试试品品取供试品，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，或pH7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基制备成1:10供试液。分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。若需要，调节供试液pH值至68。必要时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。
16、燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.4.2供供试试品品检查检查供供试试液制液制备备油脂油脂类类供供试试品品取供试品，加入无菌十四烷酸异丙酯使溶解，或与最少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无抑菌性的无菌表面活性剂充分混匀。表面活性剂的温度一般不超过40（特殊情况下，最多不超过45），小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加入预热的稀释液使成110供试液，保温，混合，并在最短时间内形成乳状液。必要时，用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃
17、机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.4.2供供试试品品检查检查供供试试液制液制备备需用特殊方法制需用特殊方法制备备供供试试液的供液的供试试品品膜剂供试品肠溶及结肠溶制剂供试品气雾剂、喷雾剂供试品贴膏剂供试品本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.平皿法平皿法平皿法包括倾注法和涂布法。除另有规定外，取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定，每稀释级每种培养基至少制备2个平皿。培养和计数除另有规定外，胰酪大豆胨琼脂
18、培养基平板在3035培养35天，沙氏葡萄糖琼脂培养基平板在2025培养57天，观察菌落生长情况,点计平板上生长的所有菌落数，必要时可适当延长培养时间至7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平皿不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平皿的菌落数平均值不小于15，则两个平皿的菌落数不能相差1倍或以上。1.4.2供供试试品品检查检查本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。菌数菌数报报告告规则规则需氧菌总数测定宜选取平
19、均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总数测定宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告（取两位有效数字）的依据。取最高的平均菌落数，计算1g、1ml或10cm供试品中所含的微生物数。如各稀释级的平皿均无菌落生长，或仅最低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1时，以1乘以最低稀释倍数的值报告菌数。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.薄膜薄膜过滤过滤法法除另有规定外，按计数方法适用性试验确认的方法进行供试液制备。取相当于1g、1ml或10c
20、m供试品的供试液，若供试品所含的菌数较多时，可取适宜稀释级的供试液，照方法适用性试验确认的方法加至适量稀释液中，立即过滤，冲洗，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上培养。培养和计数培养条件和计数方法同平皿计数法，每张滤膜上的菌落数应不超过100cfu。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。菌数菌数报报告告规则规则以相当于1g、1ml或10cm2供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以1报告菌数（每张滤膜过滤1g、1ml或10c
21、m2供试品）,或1乘以最低稀释倍数的值报告菌数。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。3.MPN法法取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和供试品接种，所有试验管在3035培养35天，如果需要确认是否有微生物生长，按方法适应性试验确定的方法进行。记录每一稀释级微生物生长的管数，从表3查对每1g或1ml供试品中需氧菌总数的最可能数。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以
22、及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。1.5结结果判断果判断需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数（包括真菌菌落数）；霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的总菌落数（包括细菌菌落数）。若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的细菌使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含抗生素（如氯霉素、庆大霉素）的沙氏葡萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基（如玫瑰红钠琼脂培养基）进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。若采用MPN法，测定结果为需氧菌总数。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评
23、价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。各品种项下规定的微生物限度标准解释如下：101cfu：可接受的最大菌数为20；102cfu：可接受的最大菌数为200；103cfu：可接受的最大菌数为2000：依此类推。若供试品的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的检查结果均符合该品种项下的规定，判供试品符合规定；若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供试品不符合规定。1.5结结果判断果判断本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.1总则总则：环境、要求
24、2.2培养基适用性培养基适用性检查检查和和控制菌控制菌检查检查方法适用性方法适用性试试验验：菌种及菌液制备、培养基适用性检查、控制菌检查方法适用性试验、2.3供供试试品品检查检查：阴性对照试验、阳性对照试验、耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希菌、沙门菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、梭菌、白色念珠菌2.4稀稀释释液液2.非无菌非无菌产产品微生物限度品微生物限度检查检查：-控制菌控制菌检查检查法法本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.1总则总则控制菌检查法系用于在规定的试验
25、条件下，检查供试品中是否存在特定的微生物。当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料是否符合相应的微生物限度标准时，应按下列规定进行检验，包括样品取样量和结果判断等。本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法。供试液制备及实验环境要求同“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。如果供试品具有抗菌活性，应尽可能去除或中和。供试品检查时,若使用了中和剂或灭活剂，应确认有效
26、性及对微生物无毒性。供试液制备时如果使用了表面活性剂，应确认其对微生物无毒性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.2培养基适用性培养基适用性检查检查和控制菌和控制菌检查检查方方法适用性法适用性试验试验2.2.1菌液制备2.2.2培养基的适用性检查2.2.2控制菌检查用培养基的适用性检查2.2.3控制菌检查方法适用性试验本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、
27、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在28，可在24小时内使用。生孢梭菌孢子悬液可替代新鲜的菌悬液，稳定的孢子悬液可保存在28，在验证过的贮存期内使用。2.2.1菌液制菌液制备备本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.2.2控制菌控制菌检查检查用培养基的适用性用培养基的适用性检查检查控制菌检查用培养基的适用性检查，检查项目包括促生促生长长能力能力抑制能力抑制能力指示能力指示能力各培养基的检测项目及所
28、用菌株见表1。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.2.2控制菌控制菌检查检查用培养基的适用性用培养基的适用性检查检查表表1控制菌控制菌检查检查用培养基的促生用培养基的促生长长能力、抑制能力及指示特性能力、抑制能力及指示特性本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。液体培养基促生液体培养基促生长长能力能力检查检查分别接种不大于100cfu的试
29、验菌于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养，与对照培养基管比较，被检培养基管试验菌应生长良好。固体培养基促生固体培养基促生长长能力能力检查检查用涂布法分别接种不大于100cfu【10版：50100cfu】的试验菌于被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养，被检培养基与对照培养基上生长的菌落大小、形态特征应一致。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。培养基抑制能力培养
30、基抑制能力检查检查接种不少于不少于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基中，在相应控制菌检查规定的培养温度及不短于规定的最长培养时间下培养，试验菌应不得生长。培养基指示特性培养基指示特性检查检查用涂布法分别接种不大于不大于100cfu的试验菌于被检培养基和对照培养基平板上，在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养，被检培养基上试验菌生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基一致。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.2.3
31、控制菌控制菌检查检查方法适用性方法适用性试验试验试验试验菌菌根据各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择相应试验菌株，确认耐胆盐革兰阴性菌检查方法时,采用大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为试验菌。结结果判断果判断上述试验若检出试验菌，按此供试液制备法和控制菌检查方法进行供试品检查；若未检出试验菌，应消除供试品的抑菌活性，并重新进行方法适用性试验。如果经过试验确证供试品对试验菌的抗菌作用无法消除，可认为受抑制的微生物不可能存在于该供试品中，选择抑菌成份消除相对彻底的方法进行供试品的检查。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、
32、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3供供试试品品检查检查供试品的控制菌检查应按经方法适用性试验确认的方法进行。供供试试品品检检出控制菌或其他致病菌出控制菌或其他致病菌时时,按一次按一次检检出出结结果果为为准准,不再复不再复试试。阳性阳性对对照照试验试验阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查,对照菌的加量应不大于100cfu。阳性对照试验应检出相应的控制菌。阴性阴性对对照照试验试验以稀释剂代替供试液照相应控制菌检查法检查，阴性对照试验应无菌生长。如果阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统
33、计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。控制菌检查过程：使用无选择性增菌培养基（胰酪大豆胨液体培养基）培养，使受损的细菌得到修复，提高检出率。增菌培养-选择性增菌-选择性琼脂2.3供供试试品品检查检查本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.1耐胆盐革兰阴性菌【10版：大肠菌群】2.3.2大肠埃希菌2.3.3沙门菌2.3.4铜绿假单胞菌2.3.5金黄色葡萄球菌2.3.6梭菌2.3.7白色念珠菌2.3供供试试品品检查检查本标准适用于
34、已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.1耐胆耐胆盐盐革革兰兰阴性菌【阴性菌【15版新增】版新增】供供试试液制液制备备和和预预培养培养取供试品，用胰酪大豆胨液体作为稀释剂照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）制成1：10供试液，混匀，在2025培养，培养时间应使供试品中的细菌充分恢复但不增殖（约2小时）。定性定性试验试验除另有规定外，取相当于1g或1mL供试品的上述预培养物接种至肠道菌增菌液体培养基中，3035培养2448小时后，划线接种于紫红胆盐葡萄
35、糖琼脂培养基平板上，3035培养1824小时。如果平板上无菌落生长，判供试品未检出耐胆盐革兰阴性菌。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.1耐胆耐胆盐盐革革兰兰阴性菌【阴性菌【15版新版新增】增】定量定量试验试验选择和分离培养取相当于0.1g、0.01g和0.001g（或0.1mL、0.01mL和0.001mL）供试品的预培养物或其稀释液分别接种至肠道菌增菌液体培养基中，3035培养2448小时。上述每一培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上，30
36、35培养1824小时。结结果判断果判断若紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上有菌落生长，则对应培养管为阳性，否则为阴性。根据各培养管检查结果，从表2查对1g或1ml供试品中含有耐胆盐革兰阴性菌的最大可能数。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。取供试液10ml（相当于供试品lg、lml、10cm)，直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的胆盐乳糖培养基中，培养1824小时，必要时可延长至48小时。取上述培养物0.2ml，接种至含5mlMUG培养基的试管内，培养，于5小时
37、、24小时在366nm紫外光下观察，同时用未接种的MUG培养基作本底对照。若管内培养物呈现荧光，为MUG阳性；不呈现荧光，为MUG阴性。观察后，沿培养管的管壁加人数滴靛基质试液，液面呈玫瑰红色，为靛基质阳性；呈试剂本色，为靛基质阴性。本底对照应为MUG阴性和靛基质阴性。2.3.1大大肠肠菌群【菌群【10版】版】本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。如MUG阳性、靛基质阳性，判供试品检出大肠埃希菌；如MUG阴性、靛基质阴性，判供试品未检出大肠埃希菌；如MUG阳性、靛基质
38、阴性，或MUG阴性、靛基质阳性，则应取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂培养基或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养1824小时。若平板上无菌落生长或生长的菌落与表3所列的菌落形态特征不符，判供试品未检出大肠埃希菌。若平板上生长的菌落与表3所列的菌落形态特征相符或疑似，应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的鉴定试验，确认是否为大肠埃希菌。2.3.1大大肠肠菌群【菌群【10版】版】本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.2大大肠肠埃希菌埃希菌供供试试液制液制备备
39、和和增菌培养增菌培养取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）制成1：10供试液。取相当于1g或1mL供试品的供试液，接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，3035培养1824小时。选择选择和分离培养和分离培养取上述预培养物1mL接种至100mL麦康凯液体培养基中，4244培养2448小时。取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上，3035培养1872小时。结结果判断果判断若麦康凯琼脂培养基平板上有菌落生长，应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验,确证是否为大肠埃希菌；若麦康凯琼脂培养基平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结
40、果为阴性，判供试品未检出大肠埃希菌。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.3沙沙门门菌菌含药材原粉化学药和中药制剂及脏器提取物的口服制剂【10版：含动物组织及动物类原药材粉的口服制剂】每10g或10ml不得检出沙门菌供供试试液制液制备备和和增菌培养增菌培养取10g或10mL供试品直接或处理后接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀，3035培养1824小时。选择选择和分离培养和分离培养取上述预培养物0.1mL接种至10mLRV沙门
41、增菌液体培养基中，3035培养1824小时。取少量RV沙门菌增菌液体培养物划线接种于木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上，3035培养1848小时。沙门菌在木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上生长良好，菌落为淡红色或无色、透明或半透明、中心有或无黑色。用接种针挑选疑似菌落于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种，培养1824小时，或采用其它适宜方法进一步鉴定。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.3沙沙门门菌菌结结果判断果判断若木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼
42、脂培养基平板上有疑似菌落生长，且三糖铁琼脂培养基的斜面为红色、底层为黄色，或斜面黄色、底层黄色或黑色，应进一步进行适宜的鉴定试验,确证是否为沙门菌。如果平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或三糖铁琼脂培养基的斜面未见红色、底层未见黄色；或斜面黄色、底层未见黄色黑色，判供试品未检出沙门菌。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.4铜绿铜绿假假单单胞菌胞菌供供试试液制液制备备和增菌培养和增菌培养取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（
43、通则1105）制成1：10供试液。取相当于1g或1mL供试品的供试液，接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀。3035培养1824小时。选择选择和分离培养和分离培养取上述预培养物划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上，3035培养1872小时。取上述平板上生长的菌落进行氧化酶试验，或采用其它适宜方法进一步鉴定。氧化氧化酶酶试验试验将洁净滤纸片置于平皿内,用无菌玻棒取上述平板上生长的菌落涂于滤纸片上，滴加新配制的1二盐酸二甲基对苯二胺试液，在30秒内若培养物呈粉红色并逐渐变为紫红色为氧化酶试验阳性,否则为阴性。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮
44、发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.4铜绿铜绿假假单单胞菌胞菌结结果判断果判断若溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上有菌落生长，且氧化酶试验阳性，应进一步进行适宜的鉴定试验,确证是否为铜绿假单胞菌。如果平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或氧化酶试验阴性，判供试品未检出铜绿假单胞菌。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.5金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌供供试试
45、液制液制备备和增菌培养和增菌培养取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）制成1：10供试液。取相当于1g或1mL供试品的供试液，接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的胰酪大豆胨液体培养基中，混匀。3035培养1824小时。选择选择和分离培养和分离培养取上述预培养物划线接种于甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上，3035培养1872小时。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。结结果判断果判断若甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上有黄色菌落或外周有黄色环
46、的白色菌落生长，应进行分离、纯化及适宜的鉴定试验,确证是否为金黄色葡萄球菌；若平板上没有与上述形态特征相符或疑似的菌落生长，或虽有相符或疑似的菌落生长但鉴定结果为阴性，判供试品未检出金黄色葡萄球菌。2.3.5金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.6梭菌梭菌供供试试液制液制备备和和热处热处理理取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）制成1：10供试液。取相当于1g或1mL供试品的供试液2份，其中1份置80
47、保温10分钟后迅速冷却。选择选择和分离培养和分离培养将上述2份供试液分别接种至适宜体积（经方法适用性试验确定的）的梭菌增菌培养基中，置厌氧条件下3035培养48小时。取上述每一培养物少量，分别涂抹接种于哥伦比亚琼脂培养基平板上，置厌氧条件下3035培养4872小时。过过氧化氧化氢氢酶酶试验试验取上述平板上生长的菌落，置洁净玻片上，滴加3%过氧化氢试液，若菌落表面有气泡产生,为过氧化氢酶试验阳性,否则为阴性。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.6梭菌梭菌结结果
48、判断果判断若哥伦比亚琼脂培养基平板上有带或不带芽孢的厌氧杆菌生长，且过氧化氢酶反应阴性的，应进一步进行适宜的鉴定试验,确证是否为梭菌。如果哥伦比亚琼脂培养基平板上没有厌氧杆菌生长，或虽有相符或疑似的菌落生长但鉴定结果为阴性，或过氧化氢酶反应阳性，判供试品未检出梭菌。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。2.3.7白色念珠菌白色念珠菌供供试试液制液制备备和增菌培养和增菌培养取供试品，照“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）制成1：10供试液。取相当于
49、1g或1mL供试品的供试液，接种到100mL沙氏葡萄糖液体培养基中，混匀，3035培养35天。选择选择和分离和分离取上述预培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，3035培养2448小时。白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落呈乳白色，偶见淡黄色,表面光滑有浓酵母气味,培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱褶。挑取疑似菌落接种至念珠菌显色培养基平板上，培养2448小时（必要时延长至72小时），或采用其它适宜方法进一步鉴定。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，
50、并增补指标。2.3.7白色念珠菌白色念珠菌结结果判断果判断若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上有疑似菌落生长，且疑似菌在念珠菌显色培养基平板上生长的菌落阳性反应，应进一步进行适宜的鉴定试验,确证是否为白色念珠菌若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上没有菌落生长，或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性，或疑似菌在念珠菌显色培养基平板上生长的菌落呈阴性反应，判供试品未检出白色念珠菌。本标准适用于已投入商业运行的火力发电厂纯凝式汽轮发电机组和供热汽轮发电机组的技术经济指标的统计和评价。燃机机组、余热锅炉以及联合循环机组可参照本标准执行，并增补指标。3.非无菌非无菌药药品微生物限度品微生物限度标标准准1.非无菌化学药品制剂、生