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1、白色念珠菌简介简介1 1n n白色念珠菌的典型特征n n显微镜下特征n n白色念珠菌菌落形态n n鉴定依据n n检查步骤n n白色念珠菌与酵母菌的鉴别2 2白色念珠菌的典型特征n n白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形，直径为36m，革兰染色为阳性，但菌体着色不均匀，以出牙方式繁殖，在适宜的培养基上出芽生孢子及假菌丝生长，在假菌丝间其末端形成厚膜孢子。n n白色念珠菌具有-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL，使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。2023/1/13 3显微镜下特征2023/1/14 42023/1/1白色假丝酵母菌的镜下形态（假菌丝）5 52023/1/1白色假丝酵母菌的镜下形态（厚膜孢子
2、）6 62023/1/1白色假丝酵母菌的镜下形态（芽管）7 72023/1/1白色假丝酵母在血平板的镜下形态（芽管）8 8白色念珠菌菌落形态培养基培养基培养基培养基 菌落形态菌落形态菌落形态菌落形态沙氏琼脂培沙氏琼脂培养基养基乳白色偶见谈黄色，表面光滑有浓乳白色偶见谈黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变浓，质地变硬或有皱褶。大，颜色变浓，质地变硬或有皱褶。吐温吐温80-80-玉玉米琼脂培养米琼脂培养基基灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变浓，质地变硬或有
3、皱褶。颜色变浓，质地变硬或有皱褶。血平板血平板呈灰色或奶油色，表面光滑有浓酵呈灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变浓，质地变硬或有皱褶。颜色变浓，质地变硬或有皱褶。TTCTTC呈乳白色或淡红色，菌落小呈乳白色或淡红色，菌落小2023/1/19 9念珠菌在显色培养基上的菌落颜色念珠菌念珠菌念珠菌念珠菌菌落颜色菌落颜色菌落颜色菌落颜色白色念珠菌白色念珠菌绿色，翠绿色（直径约绿色，翠绿色（直径约2nm2nm）热带念珠菌热带念珠菌蓝色，铁蓝色（直径约蓝色，铁蓝色（直径约1.5nm)1.5nm)克柔念珠菌克柔念珠菌粉红色（直径约粉红色（直径约
4、4.5nm4.5nm）光滑念珠菌光滑念珠菌紫色（直径约紫色（直径约2nm)2nm)其他念珠菌其他念珠菌白色（直径不定）白色（直径不定）2023/1/110102023/1/1白色假丝酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态11112023/1/1鉴定依据n n1、菌落特征n n2、显色培养基反应n n3、厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成典型的厚膜孢子n n4、芽管形成 有孢子长出短小芽管n n5、生化试验n n6、注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别。1212检查步骤n n增菌n n分离培养n n初步判断n n芽管试验n n结果判断13132023/1/1增菌n n白色念珠菌（Candida al
5、bicans）取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2）直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉汤培养基中，培养4872 小时。1414分离培养n n取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，培养2448 小时（必要时延长至72 小时）。1515初步判断未检出无菌生长与其菌落形态特征不符的与其菌落形态特征相符或疑似挑选23个菌落念珠菌显色培养基平板无绿色或翠绿色的菌落生长菌落为绿色或翠绿色未检出1%吐温80-玉米琼脂培养基培养物进行染色，镜检及芽管试验挑选23个菌落2448h2448h16162023/1/1芽管试验n n 挑取1%吐温80-玉米琼脂培养基
6、上的培养物，接种于加有一滴血清的载玻片上，盖上盖玻片，置湿润的平皿内，置3537、13 小时，置显微镜下观察，可见到由孢子长出短小芽管。n n若上述疑似菌为非革兰阳性菌，显微镜未见厚膜孢子、假菌丝、芽管，判供试品未检出白色念珠菌。17172023/1/1结果判断n n供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。18182023/1/1沙氏葡萄糖液体培养基n n用途：用于药品抑菌剂效力检测中细菌检测、真菌的培养 n n葡萄糖 40gn n 水 1000mln n蛋白胨 10gn n除葡萄糖外。取上述成分，混合，微温溶解，滤过。加入葡萄糖，溶解，分装，灭菌。19192023/1/
7、1沙氏葡萄糖琼脂培养基n n用途：用于真菌的分离培养 n n葡萄糖 40g n n琼脂 1518gn n蛋白胨 10g n n水 1000mln n除琼脂和葡萄糖外。混合，微温溶解，滤过。加入琼脂和葡萄糖，溶解，分装，灭菌。2020n n原理：原理：n n 蛋白胨提供氮源，维生素，生长因子；葡蛋白胨提供氮源，维生素，生长因子；葡萄糖提供碳源；琼脂是凝固剂。萄糖提供碳源；琼脂是凝固剂。沙氏葡萄糖琼脂培养基21212023/1/1念珠菌显色培养基(CHROMagar)n n蛋白胨 10.2g n n琼脂 15gn n氯霉素 0.5gn n灭菌水 1000mln n色素 22.0gn n除琼脂外，取
8、上述成分，混合，微温溶解，调节pH 值至6.30.2。滤过，加入琼脂，加热煮沸,不断搅拌至琼脂完全溶解，倾注平皿。2222念珠菌显色培养基(CHROMagar)念珠菌显色培养基根据酶底物法，白色念珠菌具有-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL，使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。23232023/1/11%吐温80-玉米琼脂培养基n n黄色玉米粉 40g n n琼脂 1015gn n聚山梨酯80 10mln n 水 1000mln n取玉米粉、吐温80 及蒸馏水500ml,混合，65加热30 分钟,混匀，用纱布滤过,补足原水量。取琼脂，水500ml,混合，加热溶解。将以上两种溶液混合，摇匀，分装，灭菌。24242023/1/1白色念珠菌与酵母菌的鉴别n n1、酵母菌在显色培养基上不显色，为乳白色。n n2、酵母菌无假菌丝和厚膜孢子n n3、酵母菌可发酵蔗糖不能发酵麦芽糖。n n以上实验结果和特征可与念珠菌进行鉴别。25252023/1/1酵母菌在显色培养基上的颜色和菌落形态2626常见念珠菌及酵母菌生化试验结果细菌名细菌名细菌名细菌名称称称称 生化试验生化试验生化试验生化试验蔗糖试蔗糖试验验葡萄糖发葡萄糖发酵酵麦芽糖发麦芽糖发酵酵尿素酶分尿素酶分解解白色念白色念珠菌珠菌-+-热带念热带念球菌球菌+-啤酒酵啤酒酵母菌母菌+-酿酒酵酿酒酵母菌母菌+-2023/1/127272828