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1、菌种的接种一、无菌操作二、母种的接种 (一）分离法 1.组织分离 2.孢子分离（二）转管法三、原种、栽培种的接种返回本章学习情景2-2概念：菌种移至新培养基上的过程关键：无菌操作接种在严格消毒灭菌条件下进行的操作概念一、无菌操作接种环境消毒灭菌酒精棉球消毒双手开启的管口、瓶口靠近灯焰拔出的棉塞勿触及任何地方动作快，接种时间勿太长要点必备返回本节返回本节u特点简便，易成功保持原菌种性状重复多易退化不适于耳类1.组织分离组织PDA次生菌丝培养（一）分离法u步骤返回本节步骤选种菇外观典型、大小适中、无病虫害、八成熟、第12茬的子实体取接组织纵剖（撕）菇体尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织放入新斜面中部
2、种菇消毒用燃烧的酒精棉球迅速擦拭返回本节2.孢子分离(有性繁殖）孢子特点菌龄小生命力强变异率高孢 子分离法难度较大单孢分离多孢分离较简易单孢分离的菌落返回本节多孢分离概念使许多孢子在同一培养基上，萌发后自由交配成次生菌丝的方法步骤种菇消毒采收孢子接种孢子整菇插种法钩悬法孢子印法返回本节1.种菇 消毒菌柄去2/3苞被有：75%酒精棉球擦0.25%新洁尔灭浸23min无菌纱布吸干表面水分 无返回本节2.采收孢子整菇插种法种菇插在孢子收集器中使孢子散落于培养皿内的方法用前灭菌25、24h现孢子粉取出分离材料培养皿盖严返回本节钩悬法25、24h现孢子粉取出分离材料返回本节孢子印法返回本节接种孢子用接种
3、环蘸孢子液或孢子粉涂布于平板上返回本节返回本节（二）转管法注意种块勿太大原老种块勿再接入传代次数勿太多将母种移入新的过程概念过程接种环取绿豆粒大母种移入新斜面中部返回本节转管返回本节三、原种、栽培种的接种接原种用接种耙取蚕豆大母种放于瓶中料面上返回本节返回本节接栽培种用接种匙（镊、铲）取枣大原种放于袋的两端或瓶中料面上表面老菌丝及老种块勿接入返回本节栽培种接种返回本节主要内容1.无菌操作2.母种分离与转管3.原种接种4.栽培种接种返回本节1.黄毅.食用菌栽培.北京：高等教育出社，19982.中国食用菌菌种网http:/1.栽培时为何不用母种作菌种？2.母种扩成原种的目的是什么？3.菌种的基本要求是什么？思考、讨论题课外学习资源返回本节参考资料1.中国食用菌杂志.云南：中国食用菌编辑部 2004.16，2005.162.杨新美.食用菌栽培学.第6章.北京：中国农业出版社，19963.张金霞.食用菌生产技术.第48章.北京：中国标准出版社，19994.黄毅.食用菌栽培.第二版.上册.第4章.北京：高等教育出版社，19985.张松.食用菌学.第6章.广州：华南理工大学出版社，20006.中国食用菌菌种网 http:/7.中国食用菌信息网 http:/