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1、ICS 65.100.01 B17 中华人民共和国农业行业标准NY IT 1708-2009 水稻褐飞虱抗药性监测技术规程Technological rules for monitoring insecticide resistance in rice brown lanthopper,Nilaparval lugens(S出)2009-03-09发布2009-05-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T 1708-2009 前言同本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位:全国农业技术推广服务中心、南京农业大学。本标准主要起草人:梁桂梅、沈晋良、李永平
2、、高聪芬、苏建亚.I NY/T 1708-2009 水稻褐飞虱抗药性监测技术规程1 范回本标准规定了稻茎浸渍法和稻苗浸渍法监测稻褐飞虱NiLaparva阳lugens(Stl)抗药性的方法。本标准适用于杀虫剂对稻褐飞虱室内毒力测定和稻褐飞虱的抗药性评估。2 术语和定义下列术语和定义适用于本标准.2.1 杭药性resis阳回一种农药当用其标签推荐的剂量防治某种害虫时，即使重复试验也无法达到所期望的防治效果，该种群的敏感性所出现的遗传变化称作抗药性。2.2 敏感基线susceptibillty baseline 在某种农药使用之前，该种药剂对褐飞虱敏感品系的毒力基线及LDs，或LCso.2.3 稻
3、茎漫溃法rice-stem dipping method 稻褐飞虱接触、取食浸药稻茎而中毒死亡的毒力测定方法，适用于稻褐飞虱对杀虫作用较快、具有触杀和内收作用的有机磷酸酷、氨基甲酸醋、氯化烟碱类、昆虫生长调节剂、苯基毗嗖类、有机氯类等杀虫剂的抗药性监测.2.4 稻苗漫渍法日rice-dling dipping method 稻褐飞虱接触、取食浸药的杯栽稻菌而中毒死亡的毒力测定方法，适用于稻褐飞虱对杀虫作用特慢而持效期长的毗睫甲亚胶杂环类等杀虫剂的抗药性的监测。3 试剂与材料3.1 生物试树3.1.1 稻揭飞虱田间采集，经室内饲养1代-2代的3龄中期若虫.3.1.2供试水稻TNl或汕优63(温室
4、笼罩内盆栽的元虫、未用药处理的水稻).3.2 试验药剂原药或母药(分析纯).4 仪揭设备4.1 实验室通常使用仪器设备4.2 电子天平感量。1mg)。4.3 培养杯直径7cm.高27cm).4.4 塑料小杯(直径5cm.高4.5 cm).1 NY/T 1708-2009 4.5 恒温培养箱、恒温养虫室或人工气候箱。4.6 塑料圆筒(直径16cm，商15cm)。4.7 吸虫器。5 试验步骤5.1 试材准备5.1.1 试虫5.1.1.1 试虫采集选当地具有代表性的稻田3块5块。每块回随机多点采集生长发育较一致的稻褐飞虱成虫或若虫或卵，每地采集虫(卵)1000头(粒)以上，供室内饲养。5.1.12
5、试虫饲养采集的成虫接入供试水稻上分批产卵(2 d3 d一批)。采集的若虫或卵在供试水稻上饲养到成虫后再分批产卵，取3龄中期若虫供试。5.1.2 供试水稻5.1.2.1 稻茎连根挖取分藤至孕穗初期、长势一致的健壮稻株，洗净，剪成10cm长的带根稻茎.3株一组，于阴凉处晾至表面无水痕，供测试用.5.1 2.2稻苗在温室内用塑料小杯播种水稻，每杯20株30株稻苗，选择生长至10cm高的稻苗供试。5.2 药剂配制原药用有机溶剂(如丙嗣、乙醇等)溶解，加入10%(m/v)用量的Triton-X 100(或吐温80).加工成制剂，并用蒸馆水稀释。根据预备试验结果，按照等比例方法设置5个7个系列质量浓度。每
6、质量浓度药液量不少于400mL。5.3 处理方法5.3.1 稻茎漫渍将供试稻茎在配制好的药液中浸渍30s，取出晾干，用湿脱脂棉包住根部保湿，置于培养杯中，每杯3株.按试验设计剂量从低到高的顺序重复上述操作，每浓度处理至少4次重复，并设不含药剂的处理做空白对照。53.2 稻苗浸渍在稻苗高约lOcm的塑料小杯土表加约2mL1.5%琼脂水溶液，静宣1h待凝固。将杯栽供试稻苗倒置在配制好的药液中，浸溃到稻前基部30s，取出惊干，将杯放人搁物架并盖上通气的盖子。按试验设计剂量从低到高的顺序重复上述操作，每浓度处理至少4次重复，并设不含药剂的处理做空白对照。5.3.3 接虫与培养用吸虫器将试虫移人培养杯或
7、塑料小杯中，每杯10头15头，杯口用纱布或盖子罩住，转移至温度为25C土1C、相对湿度为60%80%、光周期为L0=16 h 8 h条件下饲养和观察，特殊情况可适当调整试验环境条件，应如实记录。5.4 结果检查稻茎浸渍法于处理后5d、稻苗浸渍法于处理后10d15 d检查试虫死亡情况，记录总虫数和死虫数。6 敏据统计与分析6.1 计算方法2 NY!T 1708-2009 根据调查数据，计算各处理的校正死亡率。按式(1)和式(2)计算，计算结果均保留到小数点后两位:Pi=5100 式中zP，-:死亡率，单位为百分率(%);k一一表示死亡虫数，单位为头5N一表示处理总虫数，单位为头.P R-P，-丁
8、L-EJ旦XIOO(2)式中zP，一一校正死亡率，单位为百分率(%);P Po一一空白对!照照死亡率，单位为百分率(%)。若对照死亡率20%.试验需重做.6.2 统计分析采用SAS、EPA、POLO、BA、DPS等统计分析系统软件的几率值分析法进行统计分析，求出每个药剂的毒力回归方程式、LCso值及其95%置信限、b值及其标准误.7 抗性水平评估7.1 水稻揭飞虱敏罐毒力基线的制定水稻褐飞虱抗性监测的毒力基线参照附录A.7.2 抗性水平的分级标准抗性水平的分级标准见表1.亵1水稻揭飞虱抗性水平的分级标准抗性水平分级抗性倍数敏感运主3敏感性下降(或早期抗性)3.1-5 低水平抗性5.1-10 中
9、等水平抗性10.1-40 高水平抗性40.1-160 极高革平抗性;160.1 7.3 抗性水平的计算与评估根据敏感品系的LCso值和测试种群的LCso值，计算测试种群的抗性倍数.按式。)计算，计算结果均保留到小数点后一位z测试种群的LCso抗性倍数=EU-HH-HH-HH-HH-E(3敏感品系的LCso按照抗性水平的分级标准，对测试种群的抗性水平做出评估。8 监测报告编写根据统计结果和抗性水平评估，写111正式抗性检(监测报告，并列出原始数据.3 NY/T 1708-2009 附录A(资料性附录)水稻榈飞虱敏感毒力基线表A.1 杀虫剂对江浦敏感品系(JPS)和杭州敏感晶系(HZS)的毒力基线
10、敝据药押lLD-P Line I正与(95%CLJmg.i./L 备注阿维菌素EC9.0306+2.396 9x 0.021(0.018-0.24)氟虫脯EC8.0397+2.149 3x 0.039(0.03-0.05)囔嚓嗣(5%配)10.019 0+4.2486x 0.066(0.06-0.07)嚓嚓嗣(25%WP)6.6499+2.886 5x 0.268(0.21-0.32)囔虫嗦E7.1340+2.184 Ox 0.105(0.09-0.12)映虫胶SL7.3537+2.7162x 0.136(0.ll-O.18)毗虫琳EC6.6766+1.5119x 0.078(0.05-0.1
11、0)稽茎浸渍法咣虫啡(lO%WP)7.1422+2.079 2x 0.09(0.08-0.11)氯幢琳EC6.0030+2.0985x 0.333(0.27-0.40)烯院虫胶EC5.7085+2.173 8x。.472(0.25-9.51)院血脉E2.8362+2.465 2x 7.546(6.42-9.01)毒1f蝉EC4.2591+3.1139x 1.721(1.40-12.81)异同威EC3.6570+2.280 9x 3.880(3.29-4.59)硫丹E6.649 6+2.642 4 x 0.238(0.19-0.30)咣野田EC4.8103+0.6604x 1.938(1.17-3.48)稻苗浸溃法注1，江浦敏感品系(jJ宅的毒力基线制定，1993年来集于江苏省江浦县植保站预测圆水稻田的第一代褐飞虱成虫，在室内经单对纯代筛选得敏感品盔，在不援触任何药剂的情况下用汕优63杂交稻在室内饲养.注2，杭州敏感晶矗H2S)的毒力基线制定，2005年7月陶杭州化工集团提供.该品系于1995年采自杭州市蒋家湾材单季水稻大剧，在室内不援触任何药剂的情况下用汕优63杂交稻饲养.4