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1、分离以尿素为氮源的微生物分离以尿素为氮源的微生物诸暨中学生物组诸暨中学生物组楼楼汝汝1 1、尿素、尿素 人和其他哺乳动物的尿中都含有人和其他哺乳动物的尿中都含有尿素(或称尿素(或称脲),脲),大量尿素的存在会对环境造成大量尿素的存在会对环境造成污染污染,且尿,且尿素素不能直接不能直接被农作物被农作物吸收吸收。有一些以尿素为氮源。有一些以尿素为氮源的细菌含有的细菌含有脲酶脲酶,脲酶能分解尿素并形成,脲酶能分解尿素并形成氨氨,可,可被植物利用,也有利于自然界的氮循环。被植物利用,也有利于自然界的氮循环。2 2、脲酶、脲酶土壤中的某些细菌能够合成土壤中的某些细菌能够合成脲酶,脲酶,并且并且向胞外分泌
2、。向胞外分泌。CO(NHCO(NH2 2)2 2脲酶脲酶+CO+CO2 22NH2NH3 3+H+H2 2O O实验室中微生物的筛选原理:实验室中微生物的筛选原理:培养基的培养基的唯一氮源唯一氮源为尿素为尿素,只有能合成,只有能合成脲酶脲酶的的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而脲酶的微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。养基就能够选择出分解尿素的微生物。选择性培养基选择性培养基培养方法培养方法怎么怎么
3、分离分离出能分解尿素的微生物呢?出能分解尿素的微生物呢?怎样证明此培养基具有选择性呢?怎样证明此培养基具有选择性呢?以尿素为以尿素为唯一氮源唯一氮源的培养基的培养基LB固体固体培养基培养基是是分离分离尿素尿素细菌细菌判断该判断该培养基培养基有无选有无选择性择性实验组实验组对照组对照组培养基类型培养基类型是否是否接种接种目的目的结果结果只生长能只生长能利用尿素利用尿素的细菌的细菌生长多种生长多种微生物微生物是是鉴别方法鉴别方法CO(NHCO(NH2 2)2 2脲酶脲酶+CO+CO2 22NH2NH3 3+H+H2 2O O如何判断分解尿素的细菌确实能将尿素分解成氨?如何判断分解尿素的细菌确实能将尿素分解成氨?中性中性碱性碱性酚红颜色:酚红颜色:黄色黄色红色红色取材取材菌种可能在什么环境中较多?菌种可能在什么环境中较多?哺乳动物排泄物的地方哺乳动物排泄物的地方只要能利用尿素的细菌才能正常生长繁殖只要能利用尿素的细菌才能正常生长繁殖器材器材250mL锥形瓶锥形瓶、100mL锥形瓶锥形瓶试管架试管架、试管、培养皿、超净台、试管、培养皿、超净台移液器、玻璃刮刀、酒精灯、烧杯移液器、玻璃刮刀、酒精灯、烧杯G6玻璃砂漏斗、紫外灯玻璃砂漏斗、紫外灯配制培养基配制培养基全营养全营养LB固体培养基固体培养基尿素固体培养基尿素固体培养基