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1、专题重点专题难点培养基的基础知识培养基对微生物的选择作用纤维素酶的种类及作用无菌技术的操作微生物的数量测定从土壤中分离出分解纤维素的微生物专题 2微生物的培养与应用课题 1 微生物的实验室培养培养基1概念营养物质人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2营养构成碳源特殊营养物质(1)一般都含有水、_、氮源、无机盐。(2)还要满足微生物生长对 pH、_以及 O2的要求。3分类(1)液体培养基：配制成的液体状态的基质。(2)固体培养基：配制成的固体状态的基质，在液体培养基中加入凝固剂，如琼脂，制成琼脂固体培养基。无菌技术1消毒温和巴氏(1)特点：使用较为_的物理或化学方法，仅杀
2、死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。(2)常用方法：煮沸消毒法、_消毒法、化学药剂消毒法。2灭菌强烈灼烧(1)特点：使用_的理化因素杀死物体内外所有的微生物。(2)常用方法：_灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。微生物培养的基本技术1配制培养基称量混合溶化调 pH分装包扎2灭菌加水加培养基密封排冷气维持压力取出倒平板(或搁置斜面)3接种稀释涂布平板(1)接种过程：洗净双手点燃酒精灯接种贴标签。(2)接种工具：包括_、涂布器。接种环(3)接种方法：平板划线法、_法。(4)注意事项：整个操作过程要在_旁完成。4培养酒精灯火焰接种后的培养皿放入恒温箱内培养。菌种保藏1临时保藏固体斜面4(1)
3、操作：采用_培养基，菌落长成后，放入_冰箱中保藏，以后每 36 个月，转移一次新的培养基。(2)缺点：保存时间不长，菌种易被污染或产生变异。2长期保存法甘油管藏采用_法，放入20 的冷冻箱中保存。营养物质定义作用主要来源碳源凡能提供所需碳元素的物质合成生物体的细胞物质和一些代谢产物；有些是异养生物的能源物质无机化合物：CO2、NaHCO3 等。有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源凡能提供所需氮元素的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物：N2、NH3、铵盐、硝酸盐。有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等微生物的营养要素1微生物的营养物质及功能营养物质定义作用主要来源生长因子生长
4、必不可少的微量有机物酶和核酸的组成成分牛肉膏、酵母膏、动物组织提取液等无机盐矿物质参与酶的组成；调节渗透压水作为溶剂和运输的介质；参与生化反应备注：(1)不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大。(2)微生物最常利用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(3)对异养微生物来说，含 C、H、O、N 的化合物既是碳源又是氮源和能量来源。(4)微生物之所以需要补充生长因子，往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。营养型碳源氮源生长因子举例自养型微生物CO2、NaHCO3N2、NH3、铵盐、硝酸盐等一般不需要硝化细菌异养型微生物糖类、脂肪酸等铵盐、硝酸盐、蛋白胨等有些种类
5、需要乳酸菌2.不同微生物对营养物质的需求划分标准培养基种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂、如琼脂观察微生物的运动、分类鉴定固体培养基微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定培养基的种类划分标准培养基种类特点用途用途选择培养基在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离特定微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中
6、是否含有大肠杆菌续表：关于微生物培养实验的注意事项1配制培养基时，按照每个培养基消耗 1520 ml 的量来估算总用量。2灭菌后，培养基冷却到 55 后应及时进行倒平板操作。如果不能及时操作，需要将培养基放到 55 左右的电热箱中保温，以防止琼脂凝固。第一次灼烧每次划线之前灼烧划线结束后灼烧目的避免接种环上可能存在其他微生物污染培养物杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，使每次划线的菌种来自上次划线的末端杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者3平板划线操作时每次灼烧的目的如下表：4.实验后，所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则将会造成环境污染。微生
7、物所需的营养要素)【例 1】下列关于微生物营养的说法，正确的是(A同一种物质不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都能提供能量C除水以外的无机物仅提供无机盐D无机氮源也能提供能量【名师点拨】：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于 A、B 选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，如 NH4HCO3；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源和能源，如蛋白胨。对于 C 选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳可作为自养型微生物的碳源；NaHCO3 可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而 NaCl 则只能提供无机盐
8、。对于 D 选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如 NH3 可为硝化细菌提供能量和氮源。【答案】：D【配对练习 1】下列有关碳源的叙述不正确的是()A碳源主要用于构成微生物的细胞物质和一些代谢产物B某些碳源可以作为微生物的主要能源物质C蛋白质一定不能做碳源D不同种类的微生物的碳源可能不同解析：蛋白质也能做碳源。答案：C培养基的种类【例 2】下列有关培养基的叙述正确的是()A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌【名师点拨】：培养基是为微生物的生长繁殖提
9、供营养的基质。培养基根据物理形态分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基；根据实验目的不同，可以分为普通培养基和选择培养基，因此按照不同的分类标准，种类也不同。固体培养基是因为加入了凝固剂琼脂造成的，不是因为水的多少。微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个菌落，单个细菌用肉眼看不到。【答案】：A【配对练习 2】关于配制培养基的叙述中，正确的是()A制作固体培养基必须加入琼脂B加入青霉素可得到放线菌C培养自生固氮菌不需氮源D发酵工程一般用半固体培养基解析：固体培养基需加入凝固剂，琼脂是常用的，但不是唯一的；青霉素可抑制细菌和放线菌的生长；发酵工程一般用液体培养基；自生固氮菌能够将空气中的氮还原成氨，故培养基配制时不需加氮源。答案：C微生物培养的要点)【例 3】下列操作与灭菌无关的是(A接种前用火焰灼烧接种环B接种前用酒精擦拭双手C接种在酒精灯火焰旁完成D将平板倒置，放入培养箱中培养【名师点拨】：无菌操作是微生物培养的必要前提，学生必须树立“无菌概念”。前三项都是无菌操作的规范要求，第四项将平板倒置(为了防止皿盖上的冷凝水落入培养基中，造成污染)，放入培养箱中培养与灭菌无关。【答案】：D【配对练习 3】判断以下部位不含有微生物的是()DA洗干净的脸上B洗完澡后的皮肤C刷完牙后的口腔D灼烧之后的接种环