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1、第一节第一节第一课时第一课时微生物微生物包括哪五类包括哪五类：病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物特点特点：结构都相当简单：结构都相当简单,多数个体十分微小多数个体十分微小(o.1mm)的生物的总称。的生物的总称。通常要用光学显微镜通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用不能进行光合作用.原核原核 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界真核真核病毒病毒 SARS病毒病毒 禽流感病毒禽流感病毒朊病毒（朊病毒（蛋白质病毒）蛋白质病毒）真菌真菌如图是酵母
2、菌电子显微如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构镜下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉 了解有关培养基的基础知识，进行无了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。菌技术的操作，进行微生物的培养。一、课题目标：一、课题目标：掌握掌握培养基的制备培养基的制备、高压蒸气灭菌高压蒸气灭菌和和平板划线法平板划线法等基本操作技术，熟练、规范等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：二、课题重点和难点：三、技能目标：三、技能目标：（2）按培养基的）按培养基的物理形态分：物理形态分
3、：液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基固体培养基固体培养基一一 基础知识基础知识:（3）按培养基的）按培养基的功能分：功能分：基础培养基基础培养基选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基（1）按培养基的）按培养基的化学成分分：化学成分分：天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基半半合成培养基合成培养基阅读课本分别说出阅读课本分别说出它们的优点、缺点。它们的优点、缺点。培养基的种类液体培养基半固体培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分常用于工业生产常用于观察微生物的运动、鉴定菌种用于微生物的分离、计数常用于工业生产常用于分类、鉴定在培养基
4、中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长。根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。选择培养基加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的
5、培养基加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基核苷的培养基:分离杂交瘤细胞分离杂交瘤细胞 根据细胞生存所需物质的种类和根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。数量，用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、合成培养基主要成
6、分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。一些辅助物质。优点：优点：标准化生产，组分和含量相标准化生产，组分和含量相对固定对固定;成本低成本低 缺点：缺点：缺少某些成分，不能完全满缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。足体外细胞生长需要。合成培养基合成培养基:天然培养基有血清、血浆、和组天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：优点：营养成分丰富，培养效果好营养成分丰富，培养效果好缺点：缺点：来源受限来源受限;成分复杂，影响对某成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析些实验产物的
7、提取和实验结果的分析;易发生支原体污染易发生支原体污染;天然培养基：天然培养基：固体培养基：菌落固体培养基：菌落液体培养基：液体培养基：表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长半固体培养基：半固体培养基：无动力无动力 有动力有动力(弥散弥散)(是否运动是否运动)培养基的配制原则培养基的配制原则：目的要明确：目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。目的等确定培养基的类型和配制量。营养要协调：营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。例如：碳氮比比例要适宜。例如：碳氮比4 1时，谷氨酸
8、棒状杆时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3 1时，菌时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。pH要适宜要适宜：细菌培养基：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。培养基呈酸性。细菌细菌pH为为：6.5-7.5；放线菌放线菌pH为：为：7.5-8.5；真菌真菌pH为：为：5.0-6.0微生物的五种营养要素微生物的五种营养要素碳源氮源（nitrogen source）生长因子 微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生微生物生长不可缺少的微量有机物质叫生长因子。长因子。维生素维生素 氨基酸氨基酸 碱碱
9、 基基 无机盐（mineral salts）水（wahtor）Cncnc-micro 凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素凡能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质都称为碳源的营养物质都称为碳源。凡凡是是能能为为微微生生物物提提供供所所需需氮氮元元素素的的营营养养物质都称为氮源。物质都称为氮源。无机无机C源：源：CO2、碳酸盐，只能被自养微生碳酸盐，只能被自养微生物利用物利用有机有机C源：各种糖类，其次是有机酸、醇源：各种糖类，其次是有机酸、醇类、类、脂类和烃类化合物脂类和烃类化合物 碳源种类Cncnc-micro分子态氮：固氮微生物以分子氮为唯一氮源分子态氮：固氮微生物以分子氮为唯一氮源 无
10、机态氮：无机态氮：硝酸盐、铵盐硝酸盐、铵盐几乎所有微生物能利用几乎所有微生物能利用 有机态氮：有机态氮：蛋白质及其降解产物蛋白质及其降解产物 a实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源实验室常用牛肉膏、蛋白胨、酵母膏做氮源 b生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等生产用玉米浆、豆饼、葵花饼、花生饼等氮源种类氮源种类Cncnc-micro 构成微生物细胞的组成成分构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压，调解微生物细胞的渗透压，PH值和值和氧化还原电氧化还原电 位位 有些无机盐如有些无机盐如S、Fe还可做为自养微还可做为自养微生物的能源生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活构成酶活性基
11、的组成成分，维持酶活性。性。Mg、Ca、K是多种酶的激活剂是多种酶的激活剂 无机盐（无机盐（mineral saltsmineral salts）无机盐功能无机盐功能Cncnc-micro 构构成成微微生生物物细细胞胞以以C、H、O、N、P、S六六种元素为主，约占细胞干重的种元素为主，约占细胞干重的95以上；以上；Ca、K、Mg、Fe为为大大量量元元素素，以以无无机机盐盐阳阳离离子子形形式式被被吸吸收收，配配培培养养基基要要加加磷磷酸酸盐盐、硫硫酸盐。酸盐。Zn、Ca、Mn、Co、Mo等等微微量量元元素素，在在微微生生物物培培养养中中有有0.1PPM就就可可以以了了，自自来来水水原原料中已够用
12、，不需另加。料中已够用，不需另加。无机盐种类无机盐种类Cncnc-micro碳源、氮源、生长因子的比较来 源常用原料功 能碳源CO2、NaHCO3、糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等糖类构成细胞物质和一些代谢产物，有些还是异养做生物的主要能源物质氮源N2、NH3、铵盐、硝酸盐、尿素、牛肉膏和蛋白胨等铵盐、硝酸盐等合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物生长因子维生素、氨基酸、碱基酶、核酸等的组成成分各种培养基的具体配方不同，但一般都包括哪些成分？答：不管哪种培养基，一般都含有答：不管哪种培养基，一般都含有水水、碳碳源源、和、和氮源氮源、无机盐无机盐等营养物质。等营养物质。注注：另外还需要满足微生物生长对
13、另外还需要满足微生物生长对pH、特殊、特殊营养物质营养物质,例如例如:生长因子生长因子(即细菌生长必需，而自即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶呤、嘧啶)以及氧气、以及氧气、二氧化碳二氧化碳、渗透压等渗透压等的要求。的要求。二二 无菌技术无菌技术：无菌操作泛指在培养微生物的无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。操作中，所有防止杂菌污染的方法。1 1、煮沸消毒法煮沸消毒法:100100煮沸煮沸5-6min5-6min2 2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 70-75 下煮下煮30min30mi
14、n或或 80 80 下煮下煮15min15min3 3、化学药剂消毒法、化学药剂消毒法:用用75%75%酒精、新洁酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源氯气消毒水源4 4、紫外线消毒、紫外线消毒(1)常用消毒的方法：常用消毒的方法：1 1、灼烧灭菌、灼烧灭菌:2 2、干热灭菌：、干热灭菌：160-170 160-170 下加下加热热1-2h1-2h。3 3、高压蒸气灭菌：、高压蒸气灭菌：100kPa100kPa、121 121 下维持下维持15-30min.15-30min.(2)常用灭菌的方法：常用灭菌的方法：分类分类定义定义方法方法灭菌法灭菌法杀灭一切微生物杀灭一切微
15、生物物理法：热力、辐射、微物理法：热力、辐射、微波、等离子体波、等离子体化学法：醛类、烷化剂化学法：醛类、烷化剂高效消高效消毒法毒法杀灭一切致病微杀灭一切致病微生物生物紫外线、含氯剂、臭氧、紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等复配剂等中效消中效消毒法毒法杀灭除芽孢外的杀灭除芽孢外的致病微生物致病微生物超声波、碘类、醇类、酚超声波、碘类、醇类、酚类类低效消低效消毒法毒法杀灭细菌繁殖体、杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒亲脂病毒单链季胺盐、双胍类、中单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子草药、金属离子无菌技术：无菌技术：常常识识1 无菌技术包括：无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行）对实验操作空
16、间、操作者的衣着和手进行 清洁和消毒清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭菌灭菌；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯火焰附近酒精灯火焰附近 旁进行；旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品周围物品 相接触。相接触。2 消毒方法：消毒方法：（1）日常生活经常用到的是）日常生活经常用到的是 煮沸煮沸 消毒法；消毒法；（2）对一些不耐高温的液体，则使用）对一些不耐高温的液体，则使用 巴氏巴氏 消毒法（作简要介绍）；消毒法（作简要介绍）；（3）对接种室、
17、接种箱或超净工作台首先喷洒）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒 石炭酸或煤酚皂石炭酸或煤酚皂 等溶等溶液以增强消毒效果，然后使用液以增强消毒效果，然后使用 紫外线紫外线 进行物理消毒。进行物理消毒。（4）实验操作者的双手使用）实验操作者的双手使用 酒精酒精 进行消毒；进行消毒；（5）饮水水源用）饮水水源用 氯气氯气 进行消毒。进行消毒。3灭菌方法：灭菌方法：（1）接种环、接种针、试管口等使用）接种环、接种针、试管口等使用 灼烧灼烧 灭菌法；灭菌法；（2）玻璃器皿、金属用具等使用）玻璃器皿、金属用具等使用 干热干热 灭菌法，所用器械是灭菌法，所用器械是 干热灭干热灭菌箱菌箱；（3）培养基、无菌
18、水等使用）培养基、无菌水等使用 高压蒸汽高压蒸汽 灭菌法灭菌法，所用器械是，所用器械是 高压蒸高压蒸汽灭菌锅汽灭菌锅。（4）表面灭菌和空气灭菌等使用）表面灭菌和空气灭菌等使用 紫外线紫外线 灭菌法，所用器械是灭菌法，所用器械是 紫外紫外灯灯。1.1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？被其他外来微生物污染外，还有什么目的？2.2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。菌。如果需要，请选择合适的方法。（1 1）培养细菌用的培养基与培养皿培养细菌用的培养基与培
19、养皿（2 2）玻棒、试管、烧瓶和吸管玻棒、试管、烧瓶和吸管（3 3）实验操作者的双手实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。身被微生物感染。答：（答：（1）、（）、（2）需要灭菌；（）需要灭菌；（3）需要消毒）需要消毒。3.微生物实验室培养的基本操作程序微生物实验室培养的基本操作程序1 1、器具的灭菌、器具的灭菌2 2、培养基的配制、培养基的配制3 3、培养基的灭菌、培养基的灭菌4 4、倒平板、倒平板5 5、微生物接种、微生物接种6 6、恒温箱中培养、恒温箱中培养7 7、菌种的保存、菌种的保存三、实验操作三、实验操作 1.制备牛肉膏蛋白
20、胨培养基（用于培养细菌）制备牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌）1)1)配制：计算配制：计算、称量称量、熔、熔化化2)2)调节调节pHpH：用：用3%3%的的HCI/NaOHHCI/NaOH调节调节 pH 7pH 70-723)3)分装：分装过程中注意不要使培养基沾分装：分装过程中注意不要使培养基沾 在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。一半为宜。4)4)包扎：包扎：操作步骤操作步骤:5)5)灭菌灭菌:将将50ml50ml培养基培养基用玻棒转移至三角锥瓶中，用玻棒转移至
21、三角锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气高压蒸气灭菌灭菌锅，在压力为锅，在压力为100kPa100kPa、温度为、温度为121121，灭菌，灭菌151530min30min。将将培养皿培养皿用旧报纸包裹，放入用旧报纸包裹，放入干热灭菌干热灭菌箱内，箱内，在在160160170 170 下灭菌下灭菌2h2h。6)6)倒平板倒平板:待培养基待培养基冷却到冷却到50 50 左右时，在酒精灯附左右时，在酒精灯附近倒平板。近倒平板。2d2d后观察平板，无杂菌污染才可用后观察平板，无杂菌污染才可用来接种来接种.7)7)无菌检查：无菌检查：将灭菌的培养基放入将灭菌的培
22、养基放入3737的温室中培养的温室中培养24244848小时，以检查灭菌是否彻底。小时，以检查灭菌是否彻底。倒平板倒平板:菌种的保存菌种的保存菌种的保存菌种的保存 1)1)、临时保藏：、临时保藏：接种到固体斜面培接种到固体斜面培养基，菌落长成后养基，菌落长成后置于置于44冰箱保存。冰箱保存。2)2)、长期保存：、长期保存：甘油冷冻管藏法甘油冷冻管藏法1).1).培养基灭菌后，需要冷却到培养基灭菌后，需要冷却到50 50 左右时，左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？温度？答：答：可以用手触摸盛有培养基的锥形可以用手触摸盛有培养基的锥形
23、瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。时，就可以进行倒平板了。2).2).为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。污染培养基。注意注意:3).3).平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？4).4).在倒平板的过程中，如果不小心将培养基在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？来培养微生物吗？为什么？答：平板冷
24、凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。培养微生物。2 2、纯化大肠杆菌、纯化大肠杆菌:接种方法有：接种方法有：平板划线法和稀释涂布平板法平板划线法和稀释涂布平板法
25、平板划线法平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作基表面连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的表面释分散到培养基的表面.在数次画线后在数次画线后,可以分离到由可以分离到由一个细胞繁一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是这就是菌落菌落.微生物的接种技术微生物的接种技术菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的
26、重要依据。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落细菌的菌落特征细菌的菌落特征因种而异因种而异 霉菌的菌落霉菌的菌落特征特征因种而异因种而异菌落划线后划线后 培养一段时间后培养一段时间后微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养微生物的恒温培养 1).1).为什么在操作的第一步以及每次划线之为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线种环上可能存在的微生物污染培
27、养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。感染操作者。2).2).在灼烧接种环之后，为什么要等其在灼烧接种环
28、之后，为什么要等其冷却后再进行划线？冷却后再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3).3).在作第二次以及其后的划线操作时，在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。的菌落。四、课题成果评价
29、四、课题成果评价 （一）培养基的制作是否合格（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温如果未接种的培养基在恒温箱中保温1 12 d2 d后无后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。制备。（二）接种操作是否符合无菌要求（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落
30、，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。再次练习。（三）是否进行了及时细致的观察与记录（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养培养12 h12 h与与24 h24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。良好的科学态度与习惯。本课题知识小结本课题知识小结:【典例解析典例解析】例例1 1关微生
31、物营养物质的叙述中，正确的是关微生物营养物质的叙述中，正确的是:A.A.是碳源的物质不可能同时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B.B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C.C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D.D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量 解析：解析：不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要不同的微生物，所需营养物质有较大差别，要针对微生物的具体情况分析。对于针对微生物的具体情况分析。对于A A、B B选项，它的表达是选项，它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同时是氮源，
32、如同时是氮源，如NHNH4 4HCOHCO3 3；有的碳源同时是能源，如葡萄；有的碳源同时是能源，如葡萄糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于糖；有的碳源同时是氮源，也是能源，如蛋白胨。对于C C选选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。如二氧化碳，可作为自养型微生物的碳源；可作为自养型微生物的碳源；NaHCONaHCO3 3，可作为自养型微生，可作为自养型微生物的碳源和无机盐；而物的碳源和无机盐；而NaClNaCl则只能提供无机盐。对于则只能提供无机盐。对于DD选选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如项，无机氮源提供能量
33、的情况还是存在的，如NHNH3 3可为硝化可为硝化细菌提供能量和氮源。细菌提供能量和氮源。答案：答案：D例例2 2下面对发酵工程中灭菌的理解下面对发酵工程中灭菌的理解不正确不正确不正确不正确的是的是:A.A.防止杂菌污染防止杂菌污染 B.B.消灭杂菌消灭杂菌C.C.培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D.D.灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前答案：答案：B 解析：解析：灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A A说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一说的是灭菌的目的，因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂
34、菌），的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），所以是正确的；所以是正确的；B B是错误的，因为灭菌的目的是防止杂是错误的，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微生物。全部微生物。C C是正确的，因为与发酵有关的所有设备是正确的，因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接和物质都要灭菌；发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把种的，灭菌必须在接种前，如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。所接菌种也杀死。编号编号成分成分含量含量粉状硫粉状硫10g
35、10g（NHNH4 4）2 2SOSO4 40.4g0.4gK K2 2HPOHPO4 44.0g4.0gMgSOMgSO4 49.25g9.25gFeSOFeSO4 40.5g0.5gCaClCaCl2 20.5g0.5gHH2 2OO100ml100ml例例3 3右表是某微生物右表是某微生物培养基成分，请据此回答：培养基成分，请据此回答：（1 1）右表培养基可培）右表培养基可培养的微生物类型是养的微生物类型是 （2 2）若不慎将过量）若不慎将过量NaClNaCl加入培养基中。加入培养基中。如不想浪费此培养基，如不想浪费此培养基，可再加入可再加入 .用于培养用于培养 金黄色葡萄金黄色葡萄球菌
36、球菌.自养型微生物自养型微生物 含碳有机物含碳有机物（3 3）若除去成分）若除去成分，加入（，加入（CHCH2 2O O），），该培养基可用于培养该培养基可用于培养 。（4 4）表中营养成分共有）表中营养成分共有 类。类。（5 5）不论何种培养基，在各种成分都）不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是溶化后分装前，要进行的是 。（6 6）右表中各成分重量确定的原则是）右表中各成分重量确定的原则是 。（7 7）若右表培养基用于菌种鉴定，应）若右表培养基用于菌种鉴定，应该增加的成分是该增加的成分是 。固氮微生物固氮微生物 3 调整调整pHpH 依微生物的生长需要确定依微生物的生长需要确
37、定 琼脂（或凝固剂）琼脂（或凝固剂）解析解析：对于一个培养基，它能培养何种微生物，对于一个培养基，它能培养何种微生物，要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基，要看它的化学成分。当然这只适用于合成培养基，如果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上如果是一个天然培养基就不能从培养基的成分上区分它是培养何种微生物的。分析化学成分要从区分它是培养何种微生物的。分析化学成分要从营养物质的类型出发。右表中的营养物质有水、营养物质的类型出发。右表中的营养物质有水、无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。无机盐、氮源三类，缺乏碳源和特殊营养物质。对特殊营养物质，有的微生物是不需要的，但没对特殊营养物质，
38、有的微生物是不需要的，但没有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源，有微生物是不需要碳源的。该培养基中没有碳源，说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可说明培养的微生物是从空气中获得碳源的，即可培养的微生物就是自养型微生物了。该培养基中培养的微生物就是自养型微生物了。该培养基中加入了过量食盐，就可以成为金黄色葡萄球菌鉴加入了过量食盐，就可以成为金黄色葡萄球菌鉴别培养基，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，别培养基，但金黄色葡萄球菌是异养型微生物，这个培养基就还需要加入有机碳源。该培养基若这个培养基就还需要加入有机碳源。该培养基若加入（加入（CH2O），培养基中就有了碳源，但除去成），培养基中就有了碳源，但除去成分分，却使培养基中没有了氮源，这时就只能用，却使培养基中没有了氮源，这时就只能用于培养固氮微生物了。对于菌种鉴定，往往用的于培养固氮微生物了。对于菌种鉴定，往往用的是固体培养基，而表中没有凝固剂，需要加入常是固体培养基，而表中没有凝固剂，需要加入常见的凝固剂见的凝固剂琼脂。琼脂。