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1、实验五白细胞分类计数一、白细胞分类计数一、白细胞分类计数 q白细胞分类计数是将血液制备成涂片，白细胞分类计数是将血液制备成涂片，瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数。通常分类态特征进行分类计数。通常分类100100个个白细胞，计算得出各种白细胞所占百白细胞，计算得出各种白细胞所占百分比。分比。12/9/20222操作操作 v1)1)推片：血膜推片：血膜厚薄适中，边缘整齐，厚薄适中，边缘整齐，外观呈舌形，头、体、尾分明外观呈舌形，头、体、尾分明。v2）干燥）干燥v3）标记）标记 1.1.制备血涂片制备血涂片 12/9/202262 2染色染色v1 1
2、）准准备备：血血膜膜干干透透后后，用用蜡蜡笔笔在在两两端端划划线线，以以防防止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。v2 2）加加染染液液：在在涂涂片片上上滴滴加加瑞瑞氏氏染染液液数数滴滴，以以染染液液覆盖整个血膜为度，稍静置覆盖整个血膜为度，稍静置1min1min。v3 3）加加缓缓冲冲液液：滴滴加加缓缓冲冲液液等等量量或或多多些些，与与上上述述染染液充分混匀。液充分混匀。v4 4）染色：染色）染色：染色10min.10min.v5 5）冲冲洗洗：不不要要先先倒倒掉掉染染液液，平平持持血血涂涂片片用用流流水水缓缓缓冲洗干净。缓冲洗干净。v6 6）干燥：直立
3、血涂片，使其自然干燥。）干燥：直立血涂片，使其自然干燥。12/9/20227血涂片制作血涂片制作12/9/20228良好血涂片外观良好血涂片外观羽（子弹头）状尾部羽（子弹头）状尾部周边有空白周边有空白无划痕无划痕羽羽状状尾尾部部12/9/20229不不良良血血涂涂片片12/9/2022102瑞氏染色操作瑞氏染色操作12/9/2022113 3白细胞分类：白细胞分类：先用低倍镜选择厚薄适宜，染色先用低倍镜选择厚薄适宜，染色良好，细胞分布均匀的体尾交界良好，细胞分布均匀的体尾交界处，滴加香柏油一滴，处，滴加香柏油一滴，油镜油镜下分下分类计数。分类时要有类计数。分类时要有秩序秩序的连续的连续进行，避
4、免主观选择视野。通常进行，避免主观选择视野。通常分类计数分类计数100100个白细胞，计算并个白细胞，计算并报告各种白细胞所占比例。报告各种白细胞所占比例。低倍镜下所见结果记录方式：结果记录方式：结果记录方式：结果记录方式：NeNe 正正正正 一一一一 Ly Ly 正正正正Mo Mo 正正正正EoEo 正正正正BaBa 正正正正12/9/202212体尾交界处体尾交界处理想区理想区域域 细胞重叠细胞重叠 细胞太稀细胞太稀理想区域理想区域12/9/202213各类成熟白细胞的形态学：各类成熟白细胞的形态学：q中中性性粒粒细细胞胞（Ne）：在在瑞瑞氏氏染染色色血血涂涂片片上上呈呈圆圆形形，直直径径
5、1013m，胞胞浆浆染染粉粉红红色色，核核形形一一叶叶（杆杆状状核核）至至五五叶叶不不等等，以以三三叶叶者者多多见见，染染成成深深紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。紫红色，胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。12/9/202214q嗜酸性粒细胞（嗜酸性粒细胞（Eo）：较中性粒细胞稍大，胞较中性粒细胞稍大，胞核多为两叶，核多为两叶，呈眼镜、八字形，核染色质粗糙呈眼镜、八字形，核染色质粗糙染深紫红色，染深紫红色，胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。粒，瑞氏染色时呈桔红色，有折光性。12/9/202215q嗜碱性粒细胞（嗜碱性粒细胞（Ba）：胞
6、浆中含有大小不等的胞浆中含有大小不等的嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微嗜碱性颗粒，瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显微镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶镜下常见胞浆中有小空泡，乃因嗜碱性颗粒易溶于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色于水或因功能活动而脱颗粒所致；核呈淡紫红色常看不清，呈杆状或分叶状。常看不清，呈杆状或分叶状。12/9/202216q淋巴细胞（淋巴细胞（Ly）：胞体呈圆形，直径介于胞体呈圆形，直径介于615m之间，在成人血涂片中以小淋巴细胞为多之间，在成人血涂片中以小淋巴细胞为多见，直径见，直径69m，核大呈深紫色致密而浓染，核大呈深紫色致密而浓染，胞浆量极少；大
7、淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈胞浆量极少；大淋巴细胞胞浆量较多，呈清澈的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核圆或的淡蓝色，可见少量嗜苯胺蓝颗粒，胞核圆或椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。椭圆，常偏向细胞一侧，染色较深。12/9/202217q单核细胞（单核细胞（Mo）：在瑞氏染色涂片上为在瑞氏染色涂片上为1220m，胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形胞体圆形、椭圆形或不规则形；核形多种多种多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝多样，最重要的特点是染色质较细致疏松，呈丝网状或条缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含网状或条缕状，着色较淡胞浆较多，淡兰色，含大量细小尘土样颗粒大量细小尘土样颗粒。12/9/2
8、02218正常成人外周血白细胞分类参考值：正常成人外周血白细胞分类参考值：Ne 50%70%Ly 20%40%Mo 3%8%Eo 0.5%5%Ba 0%1%参考值参考值 12/9/202219 1.血血涂涂片片制制备备要要厚厚薄薄适适宜宜、均均匀匀、头头体体尾尾分分明明，无溶血、无空洞。无溶血、无空洞。2.很很多多因因素素影影响响涂涂片片时时血血膜膜的的厚厚度度。血血滴滴大大、血血粘粘度度高高、推推片片角角度度大大、速速度度快快则则血血膜膜厚厚，反之则血膜薄。反之则血膜薄。3.按按一一定定顺顺序序，有有秩秩序序地地连连续续进进行行，避避免免选选择择视野。视野。4.分分类类计计数数时时应应同同时时报报告告RBC和和WBC的的形形态态是否有异常。退化细胞不计数。是否有异常。退化细胞不计数。注意事项注意事项12/9/202220RBC异常12/9/202221中性粒细胞中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞淋巴细胞淋巴细胞嗜碱性粒细胞（右）嗜碱性粒细胞（右）单核细胞单核细胞血小板血小板12/9/202222实验报告（注意实验报告（注意学号学号）1原理2方法3各类细胞百分比报告4讨论12/9/202223结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！24