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1、 ICS 65.020.01 CCS B05 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 25442022 大球盖菇菌种制作技术规程 Regulation of strain manufacture for stropharia rugosoannulata BDB15/T 25442022 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC 25）归口。本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院。本文件主要起草人：王海燕、孙国琴、李亚娇、庞杰、于传宗、王永、韩凤英、扈顺、薛国萍、慕宗杰
2、、付崇毅、康立茹。DB15/T 25442022 大球盖菇菌种制作技术规程 1 范围 本文件规定了大球盖菇菌种生产要求、母种生产、原种和栽培种生产、检验、入库等技术流程要点。本文件适用于大球盖菇母种、原种、栽培种菌种制作要求。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4806.7 食品安全国家标准食品接触用塑料材料及制品 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1731 食用菌菌种良好作业规范 3 术语和定义 3.1
3、3.23.33.4DB15/T 25442022 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以菌种瓶（玻璃瓶或塑料瓶）或（1517）cm（3335）cm（0.040.05）mm聚丙烯塑料袋为容器。栽培种只能用于扩大到栽培出菇袋或直接出菇，不可以再次扩大繁殖菌种。也称为三级种。4 菌种生产要求 人员 生产所需要的技术人员和检验人员应经过专业培训、掌握基础知识及菌种生产技术规程要求的相应专业技术人员。场地、厂房 菌种生产应选择地势高，通风良好，空气清新，水源近，排水通畅，交通便利的场所。场地环境条件符合NY/T 528规定。菌种生产厂房要求有各自隔离的摊晒场、原材料库、配料分装库。配套有配料室、
4、搅拌室、装袋（瓶）室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室（通风好，有纱窗）、菌种检测室及菌种冷藏库等各环节的设施。冷却室、接种室，培养室都要有离子净化设施。菌种生产厂房条件应符合NY/T 1731规定。生产设备 菌种生产需要粉碎机、电子秤、搅拌机、装袋（瓶）机、高压灭菌锅或常压灭菌锅、离子净化器、超净工作台或接种箱、恒温培养箱、培养架、摇床、液体菌种灌（30 L250 L）、显微镜等设备。菌4.14.24.35.15.25.3DB15/T 25442022 培养基装入300 mL500 mL三角瓶至刻度的2/3处，用带滤膜的封口膜封口后放入灭菌锅；玻璃培养皿用报纸包好，放入灭菌锅。在温度升至102
5、 105 排净冷空气后升压，升至121 122（0.11 MPa0.12 MPa）恒温灭菌25 min。灭菌后温度降到（655）时，在超净工作台内将三角瓶中的培养基分装至无菌培养皿中，培养基占培养皿高度的1/31/2。接种 超净工作台或接种箱紫外灯照射30 min后吹风，之后用75%酒精进行表面消毒。接菌过程严格执行无菌操作，接种后及时贴好标签并做好记录。将3 mm5 mm菌块接种在培养皿或试管培养基的中部，培养皿需用石腊封口膜密封。菌丝长满培养基表面即可使用。培养 在通风避光、18 28 下培养。接种后每隔2 d3 d检验一次，挑出菌种未活、污染和生长不良的不合格培养物。6 原种、栽培种生产
6、 培养基 谷粒或麦粒90%，柠条粉、麦麸、棉籽壳、玉米芯粉或豆秸粉9%，石膏1%。水分含量60%65%，5.45.56.16.26.36.46.5DB15/T 25442022 原种、栽培种在超净工作台或接种箱内接种，接种前打开紫外灯照射30 min后吹风，接种时用75%酒精对超净工作台或接种箱进行表面擦拭消毒。每个原种接入2 cm3 cm大小母种12块；每个栽培种接入原种量不应少于15 g。菌种都应从容器口处接种，不应打孔多点接种。每批接种应为单一品种，如中途换品种时采用75%酒精对超净工作台或接种箱及接种工具进行表面擦拭消毒。培养 通风避光、21 28 下培养。贮存 原种和栽培种在0 4
7、下贮存，贮存期不超过50 d。7 检验、入库 检验 7.1.1 母种感官要求 母种感官要求见表1。表1 大球盖菇母种感官要求 6.66.7DB15/T 25442022 表2 大球盖菇原种感官要求 项目 要求 容器 完整、无损、洁净 棉塞或无棉盖体 干燥、整洁、松紧适度、能满足透气和滤菌要求 培养基上表面距瓶（袋）口的距离（505）mm 菌种外观 菌丝生长量 长满容器 菌丝体特征 菌丝体白、生长旺健、整齐 培养物表面菌丝体 生长均匀、无高温抑制线 培养基及菌丝体 紧贴瓶壁、无干缩 菌丝分泌物 无、允许少量无色至棕黄色水珠 杂菌菌落 无 子实体原基 无 7.1.3 栽培种感官要求 栽培种感官要求见表3。表3 大球盖菇栽培种感官要求 项目 要求 7.2