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1、伤寒班疹抗体检测试剂盒I作I者疾控科研试剂博客联| 系:I99I-4747-I94研究说明，人体感染病原微生物后，最早（3d）出现IgM抗体，间接血凝试验（简称血凝 法）那么主要适合于检测IgM抗体，因此，应用该方法可以到达早期诊断的目的。本文应用 间接血凝检测方法检测伤寒、副伤寒抗体。结果报告如下。材料与方法（）材料：戊二醛醛化人型红细胞：按间接血凝试验常规方法制备。 脂多糖抗原提取：伤寒0、副伤寒甲（简称A）、副伤寒乙（简称B）标准菌种由北京生物制 品鉴定所提供。分别以克氏瓶营养琼脂平板增菌24h,再用灭菌盐水洗下菌苔，以勃朗氏比 浊管测出各菌液浓度。将3种菌液各盛于大试管中，沸水浴隔水煮
2、沸l2h。1000r/min离心 30min,留取上清液，即相应浓度的可溶性抗原,020冷藏备用。被检血清：健康人血清 由志愿者提供，无发热、无伤寒病史及预防接种史；可疑伤寒患者血清由东南大学附属医院 检验科提供。（2）方法：伤寒、副伤寒诊断血细胞的制备：抗原致敏单位（效价）测定按间 接血凝试验常规方法进行。测得0、A、B 3种抗原的致敏单位每亳升分别为10,20, 10亿 细菌。诊断血细胞致敏方法：取10%的醛化人“0”型红细胞，分别加入各含有1个致敏单 位的O、A、B可溶性抗原中，使血细胞终浓度为0.5%1%;37水浴保温2h,其间摇动 45次。取出，离心弃去上清液，用pH7.2PBS洗3
3、次。再用其配成0.8%红细胞悬液，力口 0.25%甲醛防腐即成,4保存，有效期1年；或制成冻干血球，长期保存。致敏诊断血细 胞的敏感性、稳定性和特异性测试：按间接血凝试验常规方法进行，至少前2种测试结果均 合格，方可应用。（3）间接血凝与肥达氏反响平行样品比照试验：用2种方法共检测可疑伤 寒同份血清10（）例，同时做细菌血培养，用于确诊和评价2种方法符合率。结果（1）诊断血球敏感性试验:0、A、B 3种诊断血球抗体滴度均较肥达氏反响高 25孔（几何滴度）。（2）稳定性试验：诊断血球呈现极高的抗体滴度，而非致敏的醛化血细 胞滴度那么为零，证实诊断血球没有非特异性凝集。（3）特异性试验:3种诊断血
4、球抑制试验 各孔均不凝集，说明该诊断血球的特异性很高。（4）血凝法与肥达氏反响平行样品比照试 验：结果显示，肥达氏反响阳性者20例,血凝法阳性者22例,细菌血培养阳性22例。前2 法抗体滴度有显著性差异（PV0.01）,血凝法比菌液凝集法（肥达氏反响）平均高3孔。血凝 法与细菌血培养结果完全吻合，提示血凝法更敏感，更有利于早期诊断，不易漏诊。（5）本 血凝法诊断参考值：伤寒正常参考值为1 ： 8O（G=54.28;S=1.U8）;副伤寒甲为1 ： 80= （G=42.97;S= 1.226）;副伤寒乙为 I ： 80 （G=41.I2;S=1.147）讨论本研究结果显示，以细菌血培养阳性为确诊依据，可见间接血凝试验符合率为 100%,肥达氏反响符合率为90.9%,说明间接血凝试验敏感性高，仅有微量抗体存在时即可 发生凝集，可作为伤寒感染的早期诊断方法。经过3年临床应用和验证，尚未出现假阳性或 与临床诊断不符的病例。