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1、人血吸虫IgM抗体（SchJgM）酶联免疫分析试剂盒使用说明书作I者：疾控科研试剂博客（江经理）联 |系：I99I-4747J94使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆、细胞、组织及相关液体样本中血吸虫IgM抗体 （Sch-IgM）表达。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人血吸虫IgM抗体（Sch-IgM）表达。用纯化 的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中血吸虫IgM抗体（Sch-IgM）相结合，经 洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原抗体酶标抗原 复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸 的作用下转化成最终
2、的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）,与CUTOFF 值相比较，从而判定标本中人血吸虫IgM抗体（Sch-IgM）的存在与否。试剂盒组成120倍浓缩洗涤液20ml X1 瓶7终止液3mlXl 瓶2酶标试剂3mlXl 瓶8阳性对照0.5ml X1 瓶3酶标包被板12孔X4条9阴性对照0.5ml X1 瓶4样品稀释液3m1X1 瓶10说明书1份5显色剂A液3mlXl 瓶11封板膜2张6显色剂B液3ml X1/瓶12密封袋1个标本要求1 .标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于20保存，但应避免反复冻融2 .不能检测含N
3、aN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1 .编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孑1、空白对照1 孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）2 .加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50口1。然后在待测样品孔先加 样品稀释液40 口 1,然后再加待测样品10P1。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及 孔壁，轻轻晃动混匀，3温育：用封板膜封板后置37温育30分钟。4 .配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸用水20倍稀释后备用5 .洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重 复5次，拍干。
4、6 .加酶：每孔加入酶标试剂50 1H,空白孔除外。7 .温育：操作同3。8 .洗涤：操作同5。9 .显色：每孔先加入显色剂A50 口 L再加入显色剂B50 P L轻轻震荡混匀，37c避光显色 10分钟.10 .终止：每孔加终止液50111,终止反应（此时蓝色立转黄色）。1L测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。计算和结果判定：试验有效性：阳性对照孔平均值2L00;阴性对照平均值W0.20临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+015阴性判定：样品OD值v临界值（CUTOFF）者为血吸虫IgM抗体（SchIgM）阴
5、性阳性判定：样品OD值2临界值（CUTOFF）者为血吸虫IgM抗体（Sch-IgM）阳性。 注意事项1 .操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。2 .试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡1530分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未 用完，板条应装入密封袋中保存。3 .浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。5 .底物请避光保存。6 .试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm7 .所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸，使用时必须 注意安全。保存条件及有效期1 .试剂盒保存：；2-8o2 .有效期：6个月