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1、关于动物实验基本操作技术关于动物实验基本操作技术18.10.20221第1页，讲稿共85张，创作于星期日一、大、小鼠的抓取固定第一节 实验动物的抓取与固定18.10.20222第2页，讲稿共85张，创作于星期日小鼠固定盒固定18.10.20223第3页，讲稿共85张，创作于星期日大鼠固定盒固定18.10.20224第4页，讲稿共85张，创作于星期日二、豚鼠的抓取固定法18.10.20225第5页，讲稿共85张，创作于星期日三、家兔的抓取固定法18.10.20226第6页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.20227第7页，讲稿共85张，创作于星期日一、大、小鼠的性别鉴定第二节 性别鉴定18
2、.10.20228第8页，讲稿共85张，创作于星期日Female Male 二、兔的性别鉴定18.10.20229第9页，讲稿共85张，创作于星期日一、大、小鼠 1.根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）第三节 年龄的大致判断日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1 1仔鼠裸体仔鼠裸体鲜红鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带脐带瘢痕脱落瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行18.10.202210第10页，讲稿共85张，创作于星期日日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1010能听到声音能听到声音9 91111全身被白毛，全身被白毛，门齿长门齿长出出13131515眼皮眼皮张
3、张开，能跳开，能跳跃跃，能抓取，能抓取东东西西1818以后以后能自行采食，独立生活能自行采食，独立生活18.10.202211第11页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.202212第12页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.202213第13页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.202214第14页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.202215第15页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.202216第16页，讲稿共85张，创作于星期日18.10.202217第17页，讲稿共85张，创作于星期日 2.根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 5 10 15 20
4、 25 30体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.018.10.202218第18页，讲稿共85张，创作于星期日 大鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 10 20 30 40 体重/g67 1725 3550 5590 100150日龄/d 50 60 70 80体重/g150210 170240 210270 24032018.10.202219第19页，讲稿共85张，创作于星期日二、豚鼠一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠
5、，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。日日龄龄/d/d 初生初生 7 20 30 60 7 20 30 60 体重体重/g/g606080 10080 100120 150120 150200 170200 170220 240220 240300300日日龄龄/d/d 90 120 180 90 120 180体重体重/g/g330330400 400400 400470 520470 52060018.10.202220第20页，讲稿共85张，创作于星期日三、家兔家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。
6、青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。18.10.202221第21页，讲稿共85张，创作于星期日五、犬犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，
7、8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。18.10.202222第22页，讲稿共85张，创作于星期日年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个月更换犬齿更换犬齿(白，牙尖圆钝白，牙尖圆钝)6 61010个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2 2岁岁下门齿尖突部分磨乎下门齿尖突部分磨乎3
8、 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄6 68 8岁岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白18.10.202223第23页，讲稿共85张，创作于星期日第四节 妊娠检查雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查
9、，又称妊娠诊断(pregnancydiagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确，且及早确诊更为重要。18.10.202224第24页，讲稿共85张，创作于星期日外部检查法摸胎法阴道检查法直肠检查法超声波检查法孕酮含量测定法妊娠检查方法有18.10.202225第25页，讲稿共85张，创作于星期日第五节 分组与编号动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。一、随机分组（一）当分为二组时例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次
10、编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个随机数字，如下：18.10.202226第26页，讲稿共85张，创作于星期日动物编号：123456789101112随机数字：78386957910374566826541组别：乙乙甲甲甲乙甲甲乙乙甲甲现在以随机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组，则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲组，而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字不等，继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之(因
11、甲组原分配7只)得6，即把原分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。18.10.202227第27页，讲稿共85张，创作于星期日如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后各组鼠的编号为：组别鼠的编号甲组3457812乙组1269101118.10.202228第28页，讲稿共85张，创作于星期日(二)当分为三组时例：设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为A、B、C三组。分组方法：假设所定的点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数
12、字：动物编号：123456789101112随机数字：082701501529393943796910除3余数：201202001101组别：BCABCBCCAACA调整组别：B18.10.202229第29页，讲稿共85张，创作于星期日以3除各随机数字，若余数为l，即该鼠归A组；余数为2，归人B组；余数为3，归入C组。结果A组为4只，B组为3只，C组为5只。C组多一只应调入B组。方法同上。仍采用随机方法；从10后面接着抄，为61。除以5，余数为1，则将第一个C，即第2号鼠调入B组。调整后各组鼠的编号如下：组别组别鼠的编号鼠的编号AA组组391012391012BB组组l246l246CC组组
13、5781157811对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致18.10.202230第30页，讲稿共85张，创作于星期日（三）当每个动物一组时：例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试用完全随机法将其每只分为一组。分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即将余数写下。除尽的，写余数时即将其除数写下。如下：18.10.202231第31页，讲稿共85张，创作于星期日随机数字3346952687除数654321余数311121随机排列CABDF
14、E上列第一个随机数字余数为3，意即将6个字母中列在第三位的字母C写在该数下，第二个数宇的余数为1，即在剩下的5个字母列在第一位的A写在该数字下面，余此类推。18.10.202232第32页，讲稿共85张，创作于星期日二、编号标记方法二、编号标记方法实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。1 1体体表表颜颜料料着着色色法法 一一般般对对短短期期试试验验的的白白色色动动物物可可用用颜颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：红色：红色：0.50.5中性红或品红溶液；中性红或品红溶液；黄色：35苦味酸溶液或8
15、09090苦苦味味酸酸酒酒精饱和液；精饱和液；咖啡色：2硝酸银溶液；黑色：煤焦油酒精溶液。18.10.202233第33页，讲稿共85张，创作于星期日 左前腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色表示个位数，红色表示十位数。18.10.202234第34页，讲稿共85张，创作于星期日 2个体耳号标记法 3.个体断趾标记法 4.耳号钳标记法 5.挂牌法18.10.202235第35页，讲稿共85张，创作于星期日第六节 常规采血方法一、大、小鼠的采血方法1颈静脉或颈动脉采血2股静脉或股动脉采血3心脏采血4尾部采血5眼眶采血6断头取血1
16、8.10.202236第36页，讲稿共85张，创作于星期日颈静脉或颈动脉采血尾部采血18.10.202237第37页，讲稿共85张，创作于星期日心脏采血18.10.202238第38页，讲稿共85张，创作于星期日二、豚鼠的采血方法1耳缘剪口采血2心脏采血方法同大、小鼠。3股动脉采血方法同大、小鼠。4后肢背中足静脉采血18.10.202239第39页，讲稿共85张，创作于星期日三、家兔的采血方法1心脏采血2耳中央动脉采血3耳静脉采血18.10.202240第40页，讲稿共85张，创作于星期日四、狗、猫的采血方法1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血2股动脉采血3.心脏采血同大、小
17、鼠心脏采血4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血18.10.202241第41页，讲稿共85张，创作于星期日 采采血血方方法法的的选选择择，决决定定于于实实验验目目的的所所需需血血量量以以及及动动物物种种类类。凡凡用用血血量量较较少少的的检检验验如如红红、白白细细胞胞计计数数、血血红红蛋蛋白白的的测测定定，血血液液涂涂片片以以及及酶酶活活性性微微量量分分析析法法等等，可可刺刺破破组组织织取取毛毛细细血血管管的的血血。当当需需血血量量较较多多时时可可作作静静脉脉采采血血。静静脉脉采采血血时时，若若需需反反复复多多次次，应应自自远远离离心心脏脏端端开开始始，以以免免发发生生栓栓塞塞而而影影响响整整条条静静
18、脉脉。而而研研究究毒毒物物对对肺肺功功能能的的影影响响、血血液液酸酸碱碱平平衡衡、水水盐盐代代谢谢紊紊乱乱，需需要要比比较较动动、静静脉脉血血氧氧分分压压、二二氧氧化化碳碳分分压压和和血血液液pHpH值值以以及及 K K+、NaNa+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。离子浓度，必须采取动脉血液。18.10.202242第42页，讲稿共85张，创作于星期日采采血血场场所所有有充充足足的的光光线线；室室温温夏夏季季最最好好保保持持在在25252828，冬季，冬季，15152020为宜；为宜；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；若若需需抗抗凝凝全全血血，在在注
19、注射射器器或或试试管管内内需需预预先先加加入入抗抗凝凝剂。剂。采血时要注意18.10.202243第43页，讲稿共85张，创作于星期日部位 动物种类尾静脉大鼠、小鼠耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠d舌下静脉兔e腹壁静脉青蛙、蟾蜍f冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅取少量血18.10.202244第44页，讲稿共85张，创作于星期日部位 动物种类后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫耳中央动脉兔颈静脉狗、猫、兔心脏豚鼠、大鼠、小鼠断头大鼠、小鼠翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅取中量血18.10.202245第45页，讲稿共85张，创作于星期日部位 动
20、物种类股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔心脏狗、猴、猫、兔颈静脉马、牛、山羊、绵羊摘眼球大鼠、小鼠取大量血18.10.202246第46页，讲稿共85张，创作于星期日动物种类最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴15604.最大安全采血量与最小致死采血量18.10.202247第47页，讲稿共85张，创作于星期日第七节 给药途径与方法在动物实验过程中，应根据不同的实验目的、动物种类、药物类型来决定动物的给药途径与方法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，不同方法按给药途径又分为很多具体类型。注射法分为：皮下注射、
21、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投入、肠管内投入、气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主要给药途径和方法做一介绍。18.10.202248第48页，讲稿共85张，创作于星期日（一）皮下注射（一）皮下注射 注注射射时时以以左左手手拇拇指指和和食食指指提提起起皮皮肤肤，将将连连有有5 5（1/21/2）号号针针头头的的注注射射器器刺刺入入皮皮下下。皮皮下下注注射射部部位位一一般般狗狗、猫猫多多在在大大腿腿外外侧侧，豚豚鼠鼠在在后后大大腿腿的的内内侧侧或或小小腹腹部部；大大白白鼠鼠可可在在侧侧下下腹
22、部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（二）皮内注射（二）皮内注射 皮皮内内注注射射时时需需将将注注射射的的局局部部脱脱去去被被毛毛，消消毒毒后后，用用左左手手拇拇指指和和食食指指按按住住皮皮肤肤并并使使之之绷绷紧紧，在在两两指指之之间间，用用结结核核菌菌素素注注射射器器连连4(1/2)4(1/2)细细针针头头，紧紧贴贴皮皮肤肤表表层层刺刺入入皮皮内内，然然后后再再向向上上挑挑起起并并再再稍稍刺刺入入，即即可可注注射射药药液液，此此时时可可见见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。皮肤表面鼓起一白色小皮丘。18.10.202249第49页，讲
23、稿共85张，创作于星期日（四）腹腔注射 用用大大、小小白白鼠鼠做做实实验验时时，以以左左手手抓抓住住动动物物，使使腹腹部部向向上上，右右手手将将注注射射针针头头于于左左（或或右右）下下腹腹部部刺刺入入皮皮下下，使使针针头头向向前前推推0.50.51.0cm1.0cm，再再以以4545度度角角穿穿过过腹腹肌肌，固固定定针针头头，缓缓缓缓注入药液，注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。18.10.202250第50页，讲稿共85张，创作于星期日（五）静脉注射 1 1兔兔：兔兔耳耳部部血血管管分分布布清清晰晰。兔兔耳耳中
24、中央央为为动动脉脉，耳耳外外缘缘为为静静脉脉。内内缘缘静静脉脉深深不不易易固固定定，故故不不用用。外外缘缘静静脉脉表表浅浅易易固固定定，常常用用。先先拔拔去去注注射射部部位位的的被被毛毛，用用手手指指弹弹动动或或轻轻揉揉兔兔耳耳，使使静静脉脉充充盈盈，左左手手食食指指和和中中指指夹夹住住静静脉脉的的近近端端，拇拇指指绷绷紧紧静静脉脉的的远远端端，无无名名指指及及小小指指垫垫在在下下面面，右右手手持持注注射射器器连连6 6号号针针头头尽尽量量从从静静脉脉的的远远端端刺刺入入，移移动动拇拇指指于于针针头头上上以以固固定定针针头头，放放开开食食指指和和中中指指，将将药药液液注注入，然后拔出针头，用手
25、压迫针眼片刻。入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。18.10.202251第51页，讲稿共85张，创作于星期日22小白鼠和大白鼠小白鼠和大白鼠一般采用尾静脉注射，操作时先将动物固定在鼠筒内或扣在烧杯中，使尾巴露出，尾部用4550的温水浸润半分钟或用酒精擦拭使血管扩张，并可使表皮角质软化，以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧，使静脉充盈，用中指从下面托起尾巴，以无名指和小指夹住尾巴的末梢，右手持注射器连4(1/2)号细针头，使针头与静脉平行（小于30），从尾下四分之一处（约距尾尖23厘米）处进针，此处皮薄易于刺入，先缓注少量药液，如无阻力，表示针头已进入静脉，可继续注入。注射完毕后把尾部向注射侧弯曲以止
26、血。如需反复注射，应尽可能从末端开始，以后向尾根部方向移动注射。18.10.202252第52页，讲稿共85张，创作于星期日3狗 狗狗静静脉脉注注射射多多选选前前肢肢内内侧侧皮皮下下头头静静脉脉或或后后肢肢小小隐隐静静脉脉注注射射。注注射射前前由由助助手手将将动动物物侧侧卧卧，剪剪去去注注射射部部位位的的被被毛毛，用用胶胶皮皮带带扎扎紧紧（或或用用手手抓抓紧紧）静静脉脉近近端端，使使血血管管充充盈盈，从从静静脉脉的的远远端端将将注注射射针针头头平平行行刺刺入入血血管管，待待有有回回血血后后，松开绑带（或两手），缓缓注入药液。松开绑带（或两手），缓缓注入药液。18.10.202253第53页，讲
27、稿共85张，创作于星期日注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.0 1325510515肌肉0.10.2 0.20.5 0.20.5 0.5125静脉0.20.5 1215310515皮下0.10.5 0.510.5213310几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）18.10.202254第54页，讲稿共85张，创作于星期日（六）经口给药多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小白鼠、大白鼠、家兔等动物。1 1小鼠、大鼠（或豚鼠）小鼠、大鼠（或豚鼠）灌灌胃胃时时将将灌灌胃胃针针按按在在注注射射器器上上，吸吸入入药药液液。左左手手抓抓住住鼠鼠背背部部及及颈颈部部皮皮肤肤将将动动物物固固定定，右右手手持持
28、注注射射器器，将将灌灌胃胃针针插插入入动动物物口口中中，沿沿咽咽后后壁壁徐徐徐徐插插入入食食道道。动动物物应应固固定定成成垂垂直直体体位位，针针插插入入时时应应无无阻阻力力。若若感感到到阻阻力力或或动动物物挣挣扎扎时时，应应立立即即停停止止进针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。进针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。一一般般当当灌灌胃胃针针插插入入小小鼠鼠3 34cm，大鼠或豚鼠46cm6cm后后可可将将药药物物注注入入。常常用用的的灌灌胃胃量量小小鼠鼠为为0.20.2 1ml1ml，大鼠大鼠1 14ml4ml，豚鼠为，豚鼠为1 15ml5ml。18.10.202255第55
29、页，讲稿共85张，创作于星期日22狗、兔、猫、猴狗、兔、猫、猴 灌灌胃胃时时，先先将将动动物物固固定定，再再将将特特制制的的扩扩口口器器放放入入动动物物口口中中，扩扩口口器器之之宽宽度度可可视视动动物物口口腔腔大大小小而而定定，如如狗狗的的扩扩口口器器可可用用木木料料制制成成长长方方形形，长长约约101015cm，粗细应适合狗嘴，约23cm3cm，中中间间粘粘一一小小孔孔，孔孔的的直直途途为为5 510cm10cm。灌灌胃胃时时将将扩扩口口器器放放于于上上述述动动物物上上下下门门牙牙之之后后，并并用用绳绳将将它它固固定定于于嘴嘴部部，将将带带有有弹弹性性的的橡橡皮皮导导管管（如如导导尿尿管管）
30、，经经扩扩口口器器上上的的小小圆圆孔孔插插入入，沿沿咽咽后后壁壁而而进进入入食食道道，此此时时应应检检查查导导管管是是否否正正确确插插入入食食道道，可可将将导导管管外外口口置置于于一一盛盛水水的的烧烧杯杯中中，如如不不发发生生气气泡泡，即即认认为为此此导导管管是是在在食食道道中中，未误入气管，即可将药液灌入。未误入气管，即可将药液灌入。18.10.202256第56页，讲稿共85张，创作于星期日 给给狗狗、兔兔灌灌胃胃时时，可可不不用用扩扩口口器器：狗狗灌灌胃胃时时，用用1212号号灌灌胃胃管管，左左手手抓抓住住狗狗嘴嘴，右右手手中中指指由由右右嘴嘴角角插插入入，摸摸到到最最后后一一对对臼臼齿
31、齿后后的的天天然然空空隙隙，胃胃管管由由此此空空隙隙顺顺食食管管方方向向不不断断插插入入约约20cm20cm，可可达达胃胃内内，将将胃胃管管另另一一端端插插入入水水中中，如如不不出出气气泡泡，表表示示确确已已进进入入胃胃，而而没没误误入入气气管管内内，即即可可灌灌入入。兔兔灌灌胃胃时时，将将兔兔固固定定在在木木制制固固定定盒盒内内左左手手虎虎口口卡卡住住并并固固定定好好兔兔嘴嘴，右右手手取取1414号号细细导导管管，由由右右侧侧唇唇裂裂避避开开门门齿齿，将将导导管管慢慢慢慢插插入入，如如插插管管顺顺利利，动动物物不不挣挣扎扎，插插入入约约15cm15cm时时，即即表表示示插插入入胃胃内内，将药
32、液注入。将药液注入。各各种种动动物物一一次次灌灌胃胃能能耐耐受受的的最最大大容容积积小小鼠鼠为为0.50.51.0ml1.0ml，大大鼠鼠4 47ml，豚鼠为47ml，家兔为80150ml150ml，狗为，狗为200200500ml500ml。18.10.202257第57页，讲稿共85张，创作于星期日（七）其它途径给药（七）其它途径给药 1 1呼呼吸吸道道给给药药呈呈粉粉尘尘、气气体体及及蒸蒸气气或或雾雾等等症症状状存存在在药药物物或或毒毒气气，均均需需要要通通过过动动物物呼呼吸吸道道给给药药。如如一一般般实实验验时时给给动动物物乙乙醚醚作作吸吸入入麻麻醉醉，给给动动物物吸吸一一定定量量的的
33、氨氨气气、二二氧氧化化碳碳等等观观察察呼呼吸吸、循循环环等等变变化化；给给动动物物定定期期吸吸入入一一定定量量的的SOSO2 2。锯末烟雾等可造成慢性气管炎动物模型等；特别在毒物学实验中应用更为广泛。2 2皮皮肤肤给给药药为为了了鉴鉴定定药药物物或或毒毒物物经经皮皮肤肤的的吸吸收收作作用用、局局部部作作用用、致致敏敏作作用用和和光光感感作作用用等等，均均需需采采用用经经皮皮肤肤给给药药方方法法。如如家家兔兔和和豚豚鼠鼠常常采采用用背背部部一一定定面面积积的的皮皮肤肤脱脱毛毛后后，将一定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。将一定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。18.10.202258第58页，讲稿共
34、85张，创作于星期日 3 3脊脊髓髓腔腔内内给给药药此此法法主主要要用用于于椎椎管管麻麻醉醉或或抽抽取取脑脑脊脊液。液。家家兔兔椎椎管管内内注注射射方方法法：将将家家兔兔作作自自然然俯俯卧卧式式，尽尽量量使使其其尾尾向向腹腹侧侧屈屈曲曲，用用粗粗剪剪将将第第七七腰腰椎椎周周围围背背毛毛剪剪去去，用用3%3%碘碘酊酊消消毒毒，干干后后再再用用79%79%酒酒精精将将碘碘酒酒擦擦去去。在在兔兔背背部部髌髌骨骨脊脊连连线线之之中中点点稍稍下下方方摸摸动动第第七七腰腰椎椎间间隙隙（第第七七腰腰椎椎与与第第一一骶骶骨骨椎椎之之间间），插插入入腰腰椎椎穿穿刺刺针针头头。当当针针到到达达椎椎管管内内时时（珠
35、珠网网膜膜下下腔腔），可可见见到到兔兔的的后后肢肢跳跳动动，即即证证明明穿穿刺刺针针头头已已进进入入椎椎管管。这这时时不不要要再再向向下下刺刺，以以兔兔损损伤伤脊脊髓。固定好针头，即可将药物注入。髓。固定好针头，即可将药物注入。18.10.202259第59页，讲稿共85张，创作于星期日4小脑延髓池给药此种给药都是在动物麻醉情况下进行的。而且常采用大动物如狗等，小动物很少采用。将狗麻醉后，使狗头尽量向胸部屈曲，用左手摸到其第一颈椎上方的凹陷（枕骨大孔），固定位置，右手取7号钝针头（将针头尖端麻钝），由此凹陷的正中线上，顺平行狗的方向，小心地刺入小脑延髓池。当针头正确刺入小脑延髓池时，注射者会感
36、到针头再向前穿时无阻力，同时可以听到很轻的“咔嚓”一声，即表示针头已穿过硬脑膜进入小脑延髓池，而且可抽出清亮的脑脊液，注射药物前，先抽出一些脑脊液，抽取量根据实验需要注入多少药液决定，即注入多少抽取多少，以保持原来脑脊髓腔里的压力。18.10.202260第60页，讲稿共85张，创作于星期日5脑内给药此法常用于微生物学动物实验，将病原体等接种于被检动物脑内，然后观察接种后的各种变化。小鼠脑内给药时，选套有塑料管、针尖露出2mm深的5(1/2)针头，由鼠正中额部刺入脑内，注入药物或接种物。给豚鼠、兔、狗等进行脑内注射时，须先用穿颅钢针穿透颅骨，再用注射器针头刺入脑部，再徐徐注入被检物。注射速度一
37、定要慢，避免引起颅内压急骤升高。18.10.202261第61页，讲稿共85张，创作于星期日 6 6直直肠肠内内给给药药此此种种给给药药方方法法常常用用于于动动物物麻麻醉醉。家家兔兔直直肠肠内内给给药药时时，取取灌灌肠肠用用的的胶胶皮皮管管或或用用1414号号导导尿尿管管代代替替。在在胶胶皮皮管管或或导导尿尿管管头头上上涂涂上上凡凡士士林林，由由助助手手使使兔兔蹲蹲卧卧于于桌桌上上，以以左左臂臂及及左左腋腋轻轻轻轻按按住住兔兔头头及及前前肢肢，以以左左手手拉拉住住兔兔尾尾，露露出出肛肛门门，并并用用右右手手轻轻握握后后肢肢，实实验验者者将将橡橡皮皮管管插插入入家家兔兔肛肛门门内内，浓浓度度约约
38、7 79cm9cm，如如为为雌雌性性动动物物，注注意意勿勿误误插插入入阴阴道道（肛肛门门紧紧接接尾尾根根）。橡橡皮皮管管插插好好后后，将将注注射射器器与与橡橡皮皮管套紧，即可灌注药液。管套紧，即可灌注药液。18.10.202262第62页，讲稿共85张，创作于星期日 7 7关关节节腔腔内内给给药药此此种种方方法法常常用用于于关关节节炎炎的的动动物物模模型型复复制制。兔兔给给药药时时，将将兔兔仰仰卧卧固固定定于于兔兔固固定定台台上上，剪剪去去关关节节部部被被毛毛，用用碘碘酒酒或或酒酒精精消消毒毒，然然后后用用手手从从下下方方和和两两旁旁将将关关节节固固定定，把把皮皮肤肤稍稍移移向向一一侧侧，在在
39、膑膑韧韧带带附附着着点点处处上上方方约约0.50.5厘厘米米处处进进针针。针针头头从从上上前前方方向向下下后后方方倾倾斜斜刺刺进进，直直至至针针头头遇遇阻阻力力变变小小，然然后后针针头头稍稍后后退退，以以垂垂直直方方向向推推到到关关节节腔腔中中。针针头头进进入入关关节节腔腔时时，通通常常可可有有好好象象刺刺破破薄薄膜膜的的感感觉觉，表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。18.10.202263第63页，讲稿共85张，创作于星期日第八节 麻醉方法麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中
40、服从操作，确保实验顺利进行。一、常用的麻醉剂动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非 挥 发 性 麻 醉 剂 和 中 药 麻 醉 剂。18.10.202264第64页，讲稿共85张，创作于星期日11挥发性麻醉剂挥发性麻醉剂 包包括括乙乙醚醚、氯氯仿仿等等，乙乙醚醚吸吸入入麻麻醉醉适适用用于于各各种种动动物物，其其麻麻醉醉量量和和致致死死量量差差距距大大，所所以以安安全全度度亦亦大大，动动物物麻麻醉醉深深度度容容易易掌掌握握，而而且且麻麻后后苏苏醒醒较较快快。其其缺缺点点是是对对局局部部刺刺激激作作用用大大，可可引引起起上上呼呼吸吸道道粘粘膜膜液液体体分分泌泌增增多多，再再通通过过神神
41、经经反反射射可可影影响响呼呼吸吸、血血压压和和心心跳跳活活动动，并并且且容容易易引引起起窒窒息息，故故在在乙乙醚醚吸吸入入麻麻醉醉时时必必需需有有人人照照看看，以以防防麻麻醉醉过过深深而而出出现现以以上上情情况况。18.10.202265第65页，讲稿共85张，创作于星期日22非挥发性麻醉剂非挥发性麻醉剂 这这类类麻麻醉醉剂剂种种类类较较多多，包包括括苯苯巴巴比比妥妥钠钠、戊戊巴巴比比妥妥钠钠、硫硫喷喷妥妥钠钠等等巴巴比比妥妥类类的的衍衍生生物物，氨氨基基甲甲酸酸乙乙脂脂和和水水合合氯氯醛醛。这这些些麻麻醉醉剂剂使使用用方方便便，一一次次给给药药可可维维持持较较长长的的麻麻醉醉时时间间，麻麻醉
42、醉过程较平衡，动物无明显挣扎现象。但缺点是苏醒较慢。过程较平衡，动物无明显挣扎现象。但缺点是苏醒较慢。33中药麻醉剂中药麻醉剂 动动物物实实验验时时有有时时也也用用到到象象洋洋金金花花和和氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱等等中中药药麻麻醉醉剂剂，但但由由于于其其作作用用不不够够稳稳定定，而而且且常常需需加加佐佐剂剂麻麻醉醉效效果果才才能能理理想想，故故在在使使用用过过程程中中不不能能得得到到普普及及，因因而，多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。而，多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。18.10.202266第66页，讲稿共85张，创作于星期日二、动物的麻醉方法二、动物的麻醉方法1全身麻醉（1 1）
43、吸入法）吸入法 用用一一块块圆圆玻玻璃璃板板和和一一个个钟钟罩罩或或一一个个密密闭闭的的玻玻璃璃箱箱作作为为挥挥发发性性麻麻醉醉剂剂的的容容器器，多多选选用用乙乙醚醚作作麻麻药药。麻麻醉醉时时用用几几个个棉棉球球，将将乙乙醚醚倒倒入入其其中中，迅迅速速转转入入钟钟罩罩或或箱箱内内，让让其其挥挥发发，然然后后把把待待麻麻醉醉动动物物投投入入，约约隔隔4 46分钟即可麻醉，麻醉后应立即取出，并准备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯，在动物麻醚变浅时给套在鼻上使其补吸麻药。本法最适于大、小鼠的短期操作性实验的麻醉，也可用于较大的动物。由于乙醚燃点很低，遇火极易燃烧，所以在使用时，一定要远离火源。18.10.2
44、02267第67页，讲稿共85张，创作于星期日（2 2）腹腔和静脉给药麻醉法）腹腔和静脉给药麻醉法 非非挥挥发发性性和和中中药药麻麻醉醉剂剂均均可可用用作作腹腹腔腔和和静静脉脉注注射射麻麻醉醉，操操作作简简便便，是是实实验验室室最最常常采采用用的的方方法法之之一一。腹腹腔腔给给药药麻麻醉醉多多用用于于大大小小鼠鼠和和豚豚鼠鼠，较较大大的的动动物物如如兔兔、狗狗等等则则多多用用静静脉脉给给药药进进行行麻麻醉醉。由由于于各各麻麻醉醉剂剂的的作作用用长长短短以以及及毒毒性性的的差差别别。所所以以在在腹腹腔腔和和静静脉脉麻麻醉醉时时，一一定定要要控控制制药药物物的的浓浓度度和和注注射射量量。18.10
45、.202268第68页，讲稿共85张，创作于星期日2局部麻醉 猫猫的的局局部部麻麻醉醉一一般般应应用用0.50.51.0%1.0%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。粘粘 膜膜 表表 面面 麻麻 醉醉 宜宜 用用 2%2%盐盐 酸酸 可可 卡卡 因因。兔兔在在眼眼球球手手术术时时，可可于于结结膜膜囊囊滴滴入入0.02%0.02%盐盐酸酸可可卡卡因溶液，数秒钟即可出现麻醉。因溶液，数秒钟即可出现麻醉。狗狗的的局局部部麻麻醉醉用用0.50.51%1%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。眼眼鼻鼻、咽喉表面麻醉可用咽喉表面麻醉可用2%2%盐酸可卡因。盐酸可卡因。18.10.202269第69页，讲稿共85
46、张，创作于星期日3.麻醉效果的观察 动动物物的的麻麻醉醉效效果果直直接接影影响响实实验验的的进进行行和和实实验验结结果果。如如果果麻麻醉醉过过浅浅，动动物物会会因因疼疼痛痛而而挣挣扎扎，甚甚至至出出现现兴兴奋奋状状态态，呼呼吸吸心心跳跳不不规规则则，影影响响观观察察。麻麻醉醉过过深深，可可使使机机体体的的反反应应性性降降低低，甚甚至至消消失失，更更为为严严重重的的是是抑抑制制延延髓髓的的心心血血管管活活动动中中枢枢和和呼呼吸吸中中枢枢，使使呼呼吸吸、心心跳跳停停止止，导导致致动动物物死死亡亡。因因此此，在在麻麻醉醉过过程程中中必必须须善善于于判判断断麻麻醉醉程程度度，观观察察麻麻醉醉效效果果。
47、判判断断麻麻醉醉程程度度的指标有：的指标有：18.10.202270第70页，讲稿共85张，创作于星期日 呼呼吸吸：加加快快或或不不规规则则，则则麻麻醉醉过过浅浅，可可再再追追加加麻麻醉醉，若若呼呼吸吸由由不不规规则则转转变变为为规规则则且且平平稳稳，说说明明已已达达到到麻麻醉醉深深度度。若若动动物物呼呼吸吸变变慢慢，且且以以腹腹式式呼呼吸吸为为主主，说说明明麻麻醉醉过过深深，动动物物有生命危险。有生命危险。反射活动：角膜反射灵敏，则麻醉过浅；反射迟钝，麻醉程度适宜；反射消失，伴瞳孔散大，则麻醉过深。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适
48、。皮皮肤肤夹夹捏捏反反应应：麻麻醉醉过过程程中中可可随随时时用用止止血血钳钳或或有有齿齿镊镊夹夹捏捏动动物物皮皮肤肤，若若反反应应灵灵敏敏，则则麻麻醉醉过过浅浅；若若反反应应消消失失，则则麻麻醉程度合适。醉程度合适。18.10.202271第71页，讲稿共85张，创作于星期日44麻醉注意事项麻醉注意事项 静静脉脉注注射射必必须须缓缓慢慢，同同时时观观察察肌肌肉肉紧紧张张性性、角角膜膜反反射射和和对对皮皮肤肤夹夹捏捏的的反反应应，当当这这些些活活动动明明显显减减弱弱或或消消失失时时，立立即即停停止止注注射射。配配制制的的药药液液浓浓度度要要适适中中，不不可可过过高高，以兔麻醉过急；但也不能过低，
49、以减少注入溶液的体积。以兔麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。18.10.202272第72页，讲稿共85张，创作于星期日 麻麻醉醉时时需需注注意意保保温温。麻麻醉醉期期间间，动动物物的的体体温温调调节节机机能能往往往往受受到到抑抑制制，出出现现体体温温下下降降，可可影影响响实实验验的的准准确确性性。此此时时常常需需采采取取保保温温措措施施。保保温温的的方方法法有有，实实验验桌桌内内装装灯灯，电电褥褥，台台灯灯照照射射等等。无无论论用用哪哪种种方方法法加加温温都都应应根根据据动动物物的的肛肛门门体体温温而而定定。常常用用实实验验动动物物正正常常体体温温：猫猫为为38.638.61.0
50、1.0，兔兔为为38.438.41.01.0，大鼠为，大鼠为39.339.30.50.5。作作慢慢性性实实验验时时，在在寒寒冷冷冬冬季季，麻麻醉醉剂剂在在注注射射前前应应加热至动物体温水平。加热至动物体温水平。18.10.202273第73页，讲稿共85张，创作于星期日第九节 处死方法当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。18.10.202274第74页，讲稿共85张，创作于星期日一、蛙一、蛙 类类常用金