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1、关于动物实验基本技术和方法第1页，讲稿共116张，创作于星期日主要内容主要内容一、一、实验前准备实验前准备二、实验动物抓取与固定二、实验动物抓取与固定三、年龄的大致判断三、年龄的大致判断四、性别、发情、与妊娠鉴定四、性别、发情、与妊娠鉴定五、编号和标记五、编号和标记六、分组六、分组七、去毛七、去毛八、给药途径与方法八、给药途径与方法九、采血方法九、采血方法十、其他体液采集十、其他体液采集十一、麻醉方法十一、麻醉方法十二、处死方法十二、处死方法十三、动物病理检查十三、动物病理检查第2页，讲稿共116张，创作于星期日一、一、实验前准备实验前准备v理论准备：了解动物实验基础知识 制定研究计划和方案
2、查阅关于实验方法的参考文献v条件准备：仪器、器械、药品 运输 动物实验和饲养场所第3页，讲稿共116张，创作于星期日二、实验动物抓取和固定二、实验动物抓取和固定（一）小鼠（一）小鼠第4页，讲稿共116张，创作于星期日第5页，讲稿共116张，创作于星期日小鼠固定器固定小鼠固定器固定第6页，讲稿共116张，创作于星期日（二）大鼠（二）大鼠第7页，讲稿共116张，创作于星期日大鼠固定盒固定大鼠固定盒固定第8页，讲稿共116张，创作于星期日（三）豚鼠（三）豚鼠第9页，讲稿共116张，创作于星期日第10页，讲稿共116张，创作于星期日（四）家兔（四）家兔第11页，讲稿共116张，创作于星期日第12页，讲
3、稿共116张，创作于星期日兔子固定器固定兔子固定器固定第13页，讲稿共116张，创作于星期日狗钳狗钳狗的抓取固定狗的抓取固定（五）犬（五）犬第14页，讲稿共116张，创作于星期日犬嘴固定方法犬嘴固定方法第15页，讲稿共116张，创作于星期日猫的抓取猫的抓取犬固定犬固定第16页，讲稿共116张，创作于星期日（六）猴抓取与保定（六）猴抓取与保定第17页，讲稿共116张，创作于星期日猴徒手固定猴徒手固定第18页，讲稿共116张，创作于星期日三、年龄的大致判断三、年龄的大致判断（一）大、小鼠（一）大、小鼠1 1、根据形态鉴定日龄（大、小鼠情况基本一样）、根据形态鉴定日龄（大、小鼠情况基本一样）日日龄龄
4、/d/d外外观观形形态态特征特征1 1仔鼠裸体仔鼠裸体鲜红鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带脐带瘢痕脱落瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行第19页，讲稿共116张，创作于星期日日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1010能听到声音能听到声音9 91111全身被白毛，全身被白毛，门齿长门齿长出出13131515眼皮眼皮张张开，能跳开，能跳跃跃，能抓取，能抓取东东西西1818以后以后能自行采食，独立生活能自行采食，独立生活第20页，讲稿共116张，创作于星期日第21页，讲稿共116张，创作于星期日第22页，讲稿共116张，创作于星期日第23页，讲稿共116张，创作于星期日第
5、24页，讲稿共116张，创作于星期日第25页，讲稿共116张，创作于星期日第26页，讲稿共116张，创作于星期日2.根据体重鉴定日龄根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应日龄日龄/d/d初生初生 5 10 15 20 25 305 10 15 20 25 30体重体重/g/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 24.01.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 24.0第27页，讲稿共116张，创作于星期日 大鼠日龄与体重的对应日日龄龄/d/d初生初生 10 20 30 40 10 20 30 40 体重体重/g/g6 67 177 1725 3525 3550
6、5550 5590 10090 100150150日日龄龄/d/d 50 60 70 8050 60 70 80体重体重/g/g150150210 170210 170240 210240 210270 240270 240320320第28页，讲稿共116张，创作于星期日（二）豚鼠（二）豚鼠（二）豚鼠（二）豚鼠一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重
7、来推断大致年龄。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。卡片记录提供准确年龄。日日龄龄/d/d 初生初生 7 20 30 60 7 20 30 60 体重体重/g/g606080 10080 100120 150120 150200 170200 170220 240220 240300300日日龄龄/d/d 90 120 18090 120 180体重体重/g/g33033040
8、0 400400 400470 520470 520600600第29页，讲稿共116张，创作于星期日（三）家兔三）家兔家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。第30页，讲稿共116张，创作于星期日
9、（四）犬（四）犬犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。第31页，讲稿共116张，创作于星期日年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个月更换犬齿更换犬齿(白，牙尖圆钝白，牙尖圆钝)6 6101
10、0个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2 2岁岁下门齿尖突部分磨乎下门齿尖突部分磨乎3 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄6 68 8岁岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白第32页，讲稿共116张，创作于星期日四、性别、发情、与妊娠鉴定四、性别、发情、与妊娠鉴定（一）大
11、、小鼠的（一）大、小鼠的性别鉴定性别鉴定第33页，讲稿共116张，创作于星期日 初生兔仔如阴部孔洞扁圆而略大于肛门，且与肛门相向、距离较近的是母兔；孔洞呈圆形而略小于肛门，孔洞向前而距肛门较远的是公兔。三月龄以上的兔子，只要看有无阴囊即可区别公母。（二）兔的（二）兔的性别鉴定性别鉴定第34页，讲稿共116张，创作于星期日Female Male 第35页，讲稿共116张，创作于星期日（三）大、小鼠发情（三）大、小鼠发情鉴定鉴定第36页，讲稿共116张，创作于星期日小鼠性周期阴道分泌物涂片变化小鼠性周期阴道分泌物涂片变化 阶阶 段段 持续时持续时间间（h h）涂涂 片片 可可 见见 卵卵 巢巢 变
12、变 化化动情前期动情前期 9-189-18大量有核上皮细胞大量有核上皮细胞少量角化上皮细胞少量角化上皮细胞卵泡加速生卵泡加速生长长动动 情情 期期 6-126-12满视野角化上皮细满视野角化上皮细胞，少量有核上皮胞，少量有核上皮细胞细胞卵泡成熟、卵泡成熟、排卵排卵动情后期动情后期 30-4830-48角化上皮细胞及白角化上皮细胞及白细胞细胞黄体生成黄体生成动情间期动情间期 36-4236-42大量白细胞及少量大量白细胞及少量粘液粘液黄体退化黄体退化第37页，讲稿共116张，创作于星期日（四）（四）妊娠妊娠鉴定鉴定1、阴道栓法（大、小鼠、豚鼠）2、外部检查法3、摸胎法4、阴道检查法5、直肠检查法
13、6、超声波检查法7、孕酮含量测定法第38页，讲稿共116张，创作于星期日阴道栓阴道栓第39页，讲稿共116张，创作于星期日五、编号和标记五、编号和标记1、染色法：浅色动物 3.5-5苦味酸溶液（黄色）0.5%中性红或碱性品红溶液（红色）煤焦油酒精溶液（黑色）龙胆紫溶液（紫色）第40页，讲稿共116张，创作于星期日第41页，讲稿共116张，创作于星期日2、打耳孔法：小型动物、打耳孔法：小型动物第42页，讲稿共116张，创作于星期日 3、剪趾法：小型动物、剪趾法：小型动物第43页，讲稿共116张，创作于星期日4、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分5、烙印法：刺号钳，中、大型动物6、针刺法：中、大型
14、动物7、号牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物8、剪毛法：大动物9、笼子标号第44页，讲稿共116张，创作于星期日六、分组六、分组随机化分组：避免人为影响例：将14只小鼠随机分成两组。先将小鼠编为I14号，在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄14个随机数字。编排如下：第45页，讲稿共116张，创作于星期日动物编号动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 141 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14随机数字随机数字 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 2316 22 77 94 39 49 54
15、43 54 82 17 37 93 23归归 组组 B B A B A A B A B B A A A AB B A B A A B A B B A A A A奇数代表A织，偶数代表B组A组：3 5 6 8 11 12 13 14 B组：1 2 4 7 9 10调整分组：接刚才随机数字23继续抄表得随机数字78，用78除以8（因为需要把A组的8个数字调整掉一个），得余数6，所以把A组的第6个动物，即12号动物调整到B组第46页，讲稿共116张，创作于星期日 最终分组A组：3 5 6 8 11 13 14B组：1 2 4 7 9 10 12第47页，讲稿共116张，创作于星期日例：例：1212只
16、大鼠随机分为只大鼠随机分为3 3组组大鼠编号大鼠编号112112在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄1212个随机数字。个随机数字。每个数分别用每个数分别用3 3除，记录余数，除，记录余数，根据余数分组根据余数分组大鼠编号：大鼠编号：1 1，2 2，3 3，4 4，5 5，6 6，7 7，8 8，9 9，10 10，11 11，12 12随机数字：随机数字：0808，2727，0101，5050，1515，2929，3939，3939，4343，7979，69 69，1010余数：余数：2 2，0 0，1 1，2 2，0 0，2 2，0 0，0 0，
17、1 1，1 1，0 0，1 1组别：组别：B B，C C，A A，B B，C C，B B，C C，C C，A A，A A，C C，A A第48页，讲稿共116张，创作于星期日 A A：3 3，9 9，1010，1212 B B；1 1，4 4，6 6 C C：2 2，5 5，7 7，8 8，1111调整分组：接刚才随机数字调整分组：接刚才随机数字1010继续抄表得随机数字继续抄表得随机数字6161，用，用6161除以除以5 5（因为需要把（因为需要把C C组的组的5 5个数字调整个数字调整掉一个），得余数掉一个），得余数1 1，所以把，所以把C C组的第组的第1 1个动物，个动物，即即2 2号
18、动物调整到号动物调整到B B组。组。最终分组最终分组 A A：3 3，9 9，1010，1212 B B；1 1，2 2，4 4，6 6 C C：5 5，7 7，8 8，1111第49页，讲稿共116张，创作于星期日七、去毛七、去毛1、剪毛：弯头剪毛剪。2、拔毛：大小鼠尾静脉、家兔耳缘静脉注射。3、剃毛：将剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸温肥皂水润湿，用剃刀顺着被毛方向剃毛，用电动剃毛推剪，则逆被毛向剃毛。第50页，讲稿共116张，创作于星期日4、化学脱毛：常用脱毛剂8%硫化钠水溶液硫化钠3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水调成糊状硫化钡50克，氧化锌25克，淀粉25克，加水100毫升调成糊状硫化钠1
19、0克，生石灰15克，加水到100毫升，适合犬和其他大动物。第51页，讲稿共116张，创作于星期日八、给药途径与方法八、给药途径与方法（一）自动口服：加入饲料或饮水（二）投喂药片：掰开口，放到舌根部第52页，讲稿共116张，创作于星期日（三）灌胃（三）灌胃（i.g)1 1、小鼠、大鼠、豚鼠、小鼠、大鼠、豚鼠、小鼠、大鼠、豚鼠、小鼠、大鼠、豚鼠 灌灌胃胃时时将将灌灌胃胃针针按按在在注注射射器器上上，吸吸入入药药液液。左左手手抓抓住住鼠鼠背背部部及及颈颈部部皮皮肤肤将将动动物物固固定定，右右手手持持注注射射器器，将将灌灌胃胃针针插插入入动动物物口口中中，沿沿咽咽后后壁壁徐徐徐徐插插入入食食道道。动动
20、物物应应固固定定成成垂垂直直体体位位，针针插插入入时时应应无无阻阻力力。若若感感到到阻阻力力或或动动物物挣挣扎扎时时，应应立立即即停停止止进进针针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。一一般般当当灌灌胃胃针针插插入入小小鼠鼠3 34cm4cm，大大鼠鼠或或豚豚鼠鼠4 46cm6cm后后可可将将药药物物注注入入。常常用用的的灌灌胃胃量量小小鼠鼠为为0.20.2 1ml1ml，大鼠，大鼠1 14ml4ml，豚鼠为，豚鼠为1 15ml5ml。第53页，讲稿共116张，创作于星期日2 2、狗、兔、猫、猴、狗、兔、猫、猴、狗、兔、猫、猴、狗、兔、猫、猴
21、灌灌胃胃时时，先先将将动动物物固固定定，再再将将特特制制的的扩扩口口器器放放入入动动物物口口中中，扩扩口口器器之之宽宽度度可可视视动动物物口口腔腔大大小小而而定定，如如狗狗的的扩扩口口器器可可用用木木料料制制成成长长方方形形，长长约约101015cm15cm，粗粗细细应应适适合合狗狗嘴嘴，约约2 23cm3cm，中中间间粘粘一一小小孔孔，孔孔的的直直途途为为5 510cm10cm。灌灌胃胃时时将将扩扩口口器器放放于于上上述述动动物物上上下下门门牙牙之之后后，并并用用绳绳将将它它固固定定于于嘴嘴部部，将将带带有有弹弹性性的的橡橡皮皮导导管管（如如导导尿尿管管），经经扩扩口口器器上上的的小小圆圆孔
22、孔插插入入，沿沿咽咽后后壁壁而而进进入入食食道道，此此时时应应检检查查导导管管是是否否正正确确插插入入食食道道，可可将将导导管管外外口口置置于于一一盛盛水水的的烧烧杯杯中中，如如不不发发生生气气泡泡，即即认认为为此此导导管管是是在在食食道道中中，未未误误入入气气管管，即即可可将将药药液液灌灌入入。灌灌胃管插入长度狗为胃管插入长度狗为20cm20cm，兔子为，兔子为12-15cm12-15cm。第54页，讲稿共116张，创作于星期日动物最大灌胃量动物最大灌胃量第55页，讲稿共116张，创作于星期日第56页，讲稿共116张，创作于星期日 （四）直肠给药（四）直肠给药 （五）呼吸道给药（五）呼吸道给
23、药 （六）滴鼻（六）滴鼻 （七）点眼（七）点眼 （八）经皮肤给药：常用于检测药物、毒物、化妆品等的（八）经皮肤给药：常用于检测药物、毒物、化妆品等的透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠选择脊透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠选择脊柱两侧皮肤，大小鼠常采取浸尾方式。柱两侧皮肤，大小鼠常采取浸尾方式。（九）皮内注射（九）皮内注射(i.d)i.d)：一般用于接种或过敏实验。将药一般用于接种或过敏实验。将药液注射在真皮和表皮之间。液注射在真皮和表皮之间。皮内注射时需将注射的局皮内注射时需将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使
24、之绷紧，在两指之间，用注射器连并使之绷紧，在两指之间，用注射器连4(1/2)4(1/2)号细针号细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤表面鼓起一稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。白色小皮丘。第57页，讲稿共116张，创作于星期日（十）皮下注射（十）皮下注射(s.c)s.c)：注射时以左手拇指和食指提起注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有皮肤，将连有5 5（1/21/2）号针头的注射器刺入皮下。）号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后皮下注射部位一般狗、猫
25、多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（十一）肌肉注射（十一）肌肉注射(i.m)i.m)：股部肌肉股部肌肉第58页，讲稿共116张，创作于星期日（十二）腹腔注射(i.p)：用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推0.51.0cm，再以45度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm
26、处。第59页，讲稿共116张，创作于星期日第60页，讲稿共116张，创作于星期日（十三）静脉注射（十三）静脉注射(i.v)：1、小鼠：尾静脉、小鼠：尾静脉2、大鼠：尾静脉、大鼠：尾静脉、阴茎静脉、阴茎静脉、舌下静脉、舌下静脉、浅背侧跖静脉浅背侧跖静脉第61页，讲稿共116张，创作于星期日大小鼠有上、左、右3根尾静脉，成品字型 小鼠尾静脉注射第62页，讲稿共116张，创作于星期日第63页，讲稿共116张，创作于星期日大鼠阴茎静脉注射大鼠阴茎静脉注射大鼠舌下静脉注射大鼠舌下静脉注射大鼠浅背侧跖静脉注射大鼠浅背侧跖静脉注射第64页，讲稿共116张，创作于星期日3、豚鼠：浅背侧跖静脉、耳静脉注射4、家
27、兔：耳静脉注射5、猪：耳缘静脉6、猴：前肢桡静脉、后肢隐静脉注射第65页，讲稿共116张，创作于星期日猪耳缘静脉注射第66页，讲稿共116张，创作于星期日7、猫、狗：前肢内侧头静脉、后肢外侧小隐静脉注射第67页，讲稿共116张，创作于星期日狗狗前前肢肢内内侧侧头头静静脉脉第68页，讲稿共116张，创作于星期日狗狗后后肢肢外外侧侧小小隐隐静静脉脉第69页，讲稿共116张，创作于星期日猴的后肢皮下静脉注射猴的后肢皮下静脉注射第70页，讲稿共116张，创作于星期日（十四）脑腔注射：（十四）脑腔注射：（十四）脑腔注射：（十四）脑腔注射：1 1、小鼠、小鼠、小鼠、小鼠 小指夹鼠尾，拇指和是指置小鼠头两侧
28、固定，中小指夹鼠尾，拇指和是指置小鼠头两侧固定，中指和无名指压住鼠身，在注射处消毒后，右手持指和无名指压住鼠身，在注射处消毒后，右手持注射器，以食指固定针芯，垂直刺入针头深度约注射器，以食指固定针芯，垂直刺入针头深度约5 57mm7mm。2 2、兔、兔、兔、兔 将兔用固定器固定好，剃去头顶的被毛，左手将头皮将兔用固定器固定好，剃去头顶的被毛，左手将头皮绷紧，消毒后，右手持锥子，自头顶正中稍偏一侧绷紧，消毒后，右手持锥子，自头顶正中稍偏一侧部位，锥穿头骨，即换以左手固定锥子，右手持注部位，锥穿头骨，即换以左手固定锥子，右手持注射器，使针头沿锥尖刺入，慢慢拔出锥子，即刻将射器，使针头沿锥尖刺入，慢
29、慢拔出锥子，即刻将针头刺入约针头刺入约101020mm20mm，即可推液。，即可推液。第71页，讲稿共116张，创作于星期日（十五）（十五）关节腔注射：（十六）（十六）椎管内注射：注射入蛛网膜下腔（十七）（十七）淋巴囊内注射：蛙和蟾蜍第72页，讲稿共116张，创作于星期日（十八）小脑延髓池注射：（十八）小脑延髓池注射：第73页，讲稿共116张，创作于星期日几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）注射途径注射途径小鼠小鼠大鼠大鼠豚鼠豚鼠兔兔狗狗腹腔腹腔0.20.21.01.0 1 13 32 25 55 510105 51515肌肉肌肉0.10.10.20
30、.2 0.20.20.50.5 0.20.20.50.5 0.50.51 12 25 5静脉静脉0.20.20.50.5 1 12 21 15 53 310105 51515皮下皮下0.10.10.50.5 0.50.51 10.50.52 21 13 33 31010第74页，讲稿共116张，创作于星期日九、采血方法九、采血方法（一）大、小鼠：（一）大、小鼠：（一）大、小鼠：（一）大、小鼠：1 1、眶静脉丛（窦）：、眶静脉丛（窦）：少量多次采大小鼠血。少量多次采大小鼠血。小鼠小鼠0.20.20.30.3mlml，大鼠大鼠0.40.40.60.6mlml2 2、摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可
31、得到、摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到4 45 5体体重的血量重的血量3 3、尾静脉：用于少量多次采大小鼠血、尾静脉：用于少量多次采大小鼠血第75页，讲稿共116张，创作于星期日第76页，讲稿共116张，创作于星期日尾静脉采血尾静脉采血第77页，讲稿共116张，创作于星期日4、剪头：用于一次性大量采小鼠血，可得到0.51.0ml的血量5、大血管：包括颈动脉（静脉），股动脉（静脉），腋下动脉（静脉），腹主动脉，此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。可得5ml左右血量。6、心脏采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。第78页，讲稿共116张，创作于星期日心脏
32、采血心脏采血第79页，讲稿共116张，创作于星期日（二）家兔（二）家兔：1、耳缘静脉：中等血量的采集，可反复采血，每次510ml。2、耳中央动脉：可反复采血，每次1015ml。第80页，讲稿共116张，创作于星期日3、心脏采血：可用于 一次性（开胸）或 多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可 得到80100ml血量4、颈动静脉采血：用于一次性采血，需要手术，可得血量8010ml。第81页，讲稿共116张，创作于星期日（三）（三）豚鼠：1、心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到510ml血量。2、背跖静脉采血：用于少量反复采血。3、耳缘剪口采血第82页，讲稿共11
33、6张，创作于星期日（四）犬猫：和静脉注射部位相同，前肢（四）犬猫：和静脉注射部位相同，前肢内侧头静脉、后肢外侧小隐静脉。也可颈内侧头静脉、后肢外侧小隐静脉。也可颈静脉（动脉）或心脏采血。静脉（动脉）或心脏采血。第83页，讲稿共116张，创作于星期日（五）（五）猪：前腔静脉或耳大静脉采血（六）（六）羊：颈静脉采血（七）（七）猴：前肢头静脉、后肢皮下静脉或耳缘静脉等。（八）（八）禽类：翼下静脉第84页，讲稿共116张，创作于星期日仔猪前腔静脉采血仔猪前腔静脉采血 第85页，讲稿共116张，创作于星期日采血注意事项采血注意事项（一一一一）采采血血场场所所有有充充足足的的光光线线；室室温温夏夏季季最最
34、好好保保持持在在25252828，冬季，冬季，15152020为宜；为宜；（二）（二）（二）（二）采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；（三）（三）（三）（三）采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；（四四四四）若若需需抗抗凝凝全全血血，在在注注射射器器或或试试管管内内需需预预先先加加入入抗抗凝剂。凝剂。（五）（五）（五）（五）注意不同动物的采血量采血。注意不同动物的采血量采血。第86页，讲稿共116张，创作于星期日部部 位位 动物种类动物种类尾静脉尾静脉大鼠、小鼠大鼠、小鼠耳静脉耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊兔、狗、猫、
35、猪、山羊、绵羊眼底静脉丛眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠兔、大鼠、小鼠 d d舌下静脉舌下静脉兔兔 e e腹壁静脉腹壁静脉青蛙、蟾蜍青蛙、蟾蜍 f f冠、脚蹼皮下静脉冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅鸡、鸭、鹅、取少量血第87页，讲稿共116张，创作于星期日、取中量血部部 位位 动物种类动物种类后肢外侧皮下小隐静脉后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫狗、猴、猫耳中央动脉耳中央动脉兔兔颈静脉颈静脉狗、猫、兔狗、猫、兔心脏心脏豚鼠、大鼠、小鼠豚鼠、大鼠、小鼠断头断头大鼠、小鼠大鼠、小鼠翼下静脉翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅鸡、鸭、鸽、鹅颈动脉颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅鸡、鸭、鸽
36、、鹅第88页，讲稿共116张，创作于星期日、取大量血部部 位位 动物种类动物种类股动脉、颈动脉股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔狗、猴、猫、兔心脏心脏狗、猴、猫、兔狗、猴、猫、兔颈静脉颈静脉马、牛、山羊、绵羊马、牛、山羊、绵羊摘眼球摘眼球大鼠、小鼠大鼠、小鼠第89页，讲稿共116张，创作于星期日4、最大安全采血量与最小致死采血量动物种类动物种类最大安全采最大安全采血量血量(ml)(ml)最小致死采最小致死采血量血量(ml)(ml)小鼠小鼠0.20.20.30.3大鼠大鼠1 12 2豚鼠豚鼠5 51010兔兔10104040狼狗狼狗100100500500猎狗猎狗5050200200猴猴1515606
37、0第90页，讲稿共116张，创作于星期日常用抗凝剂：常用抗凝剂：1、肝素：抑制凝血酶活力，阻止血小板凝集。纯品肝素1mg125U，10U20U抗1ml血凝集，但通常应用23倍剂量。用法：可配成1%肝素溶液，用时取0.1ml于试管内，100烘干，每管可抗凝510ml血。或用1%肝素溶液湿润采血注射器。肝素可改变蛋白质等电点，当用盐析法分离蛋白作分类测定时，不可用肝素抗凝。第91页，讲稿共116张，创作于星期日2、枸橼酸钠：使凝血必需的钙离子失活。常用35%水溶液，碱性较强。3、草酸盐合剂：草酸铵1.2g，草酸钾0.8g，福尔马林1.0ml，加蒸馏水至100ml。使凝血必需的钙离子失活。每毫升血加
38、草酸盐合剂0.1ml。4、氟化钠：每毫升血加6mg。第92页，讲稿共116张，创作于星期日十、其他体液采集十、其他体液采集1、胸水、腹水采集：穿刺2、消化液采集：唾液，胃液，胰液，胆汁3、精液采集：中、大动物用假阴道，小动物穿刺附睾来采集精液。4、脑脊液采集：手术或小脑延髓池抽取5、骨髓采集：大动物活体穿刺，小动物处死后取股骨或胸骨骨髓。第93页，讲稿共116张，创作于星期日6、尿液采集：代谢笼收集导尿管采集膀胱穿刺压迫排尿第94页，讲稿共116张，创作于星期日十一、麻醉方法（一）（一）麻醉方法：1、全麻 吸入麻醉，静脉注射、腹腔注射。2、局麻 浸润麻醉。根据手术，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨
39、膜等顺序逐步深入注射到术野周围。第95页，讲稿共116张，创作于星期日第96页，讲稿共116张，创作于星期日（二）（二）麻醉前准备：1、禁食812h，防止呕吐，可饮水。2、根据实验部位和种类，给动物脱毛。3、犬、猪、猴等大动物可在麻醉前给予一些药物以减少动物紧张，减少支气管分泌。第97页，讲稿共116张，创作于星期日（1）阿托品：减少支气管和唾液腺分泌，防止气管阻塞。副作用：加快心率。用量：肌肉或皮下注射0.04mg/kg（2）安定：产生镇静作用，加强麻醉效果，使骨骼肌松弛。用量：2.55mg/kg（3）吗啡：产生镇静作用。副作用：抑制呼吸中枢。用量：皮下注射12mg/kg，肌肉注射1020m
40、g/kg。第98页，讲稿共116张，创作于星期日（三）麻醉药物：（三）麻醉药物：1、全麻药物（1）乙醚：强挥发性、易燃。乙醚是最常用的吸入麻醉剂，各种动物适用。机制：抑制中枢神经系统。特点：安全范围大，肌肉完全松弛，对肝肾毒性小，麻醉诱导期和苏醒期较长。副作用：局部刺激大，引起上呼吸道黏膜分泌增加，导致呼吸道阻塞，可用阿托品对抗解救。第99页，讲稿共116张，创作于星期日第100页，讲稿共116张，创作于星期日（2）巴比妥类：种类很多，有巴比妥钠，戊巴比妥钠，硫喷妥那，苯巴比妥钠等。适用于各种动物。如实验中大小鼠常用3戊巴比妥钠溶液腹腔注射进行麻醉。特点：安全范围广，毒性小，麻醉潜伏期短，麻醉
41、维持时间长。可腹腔或静脉给药。机理：阻断神经冲动传递到大脑。副作用：过量使用可导致呼吸肌麻痹而死亡，同时抑制末梢循环，导致血压降低，并影响基础代谢，导致体温降低。第101页，讲稿共116张，创作于星期日（3）氯胺酮：常用其盐酸盐。特点：麻醉潜伏期短，麻醉维持期仅1020min，麻醉浅，安全性高，可重复给药。机制：阻断大脑联络途径。副作用：兴奋心血管系统，使血压升高，心率加快，偶尔引起呕吐。（4）水合氯醛：作用特点和巴比妥类相似。但安全范围小，麻醉剂量和中毒剂量接近，对皮肤和黏膜有较强刺激。第102页，讲稿共116张，创作于星期日第103页，讲稿共116张，创作于星期日第104页，讲稿共116张
42、，创作于星期日2、局麻药物（1）普鲁卡因：是无刺激性的局麻药物。特点：麻醉速度快，注射后13分钟就可产生麻醉。可以维持3045分钟。对皮肤和黏膜穿透力很弱，需要注射给药才能产生局麻效果。它可以使血管舒张，易被吸收入血液而失去效果。在其溶液中加入肾上腺素（每100ml加入0.1%肾上腺素0.20.5ml）可以使麻醉时间延长12小时。第105页，讲稿共116张，创作于星期日（2）利多卡因：效力和穿透力比普鲁卡因强。（3）的卡因：化学结构和普鲁卡因类似，效力和穿透力比普鲁卡因强。第106页，讲稿共116张，创作于星期日（四）实验动物的急救（四）实验动物的急救 动物实验过程中，可因麻醉药过量、出血过多
43、、分泌物或血块堵塞气管造成窒息以及某种药物原因引起动物血压、呼吸不规则等现象，此时应立即进行急救处理措施。急救处理措施首先要迅速排查原因，并中断诱因（如止血、停药、排除分泌物等），然后对症实施急救措施。第107页，讲稿共116张，创作于星期日1 1、呼吸、心跳（血压）的改变、呼吸、心跳（血压）的改变 动动物物实实验验过过程程中中，需需密密切切观观察察实实验验动动物物的的呼呼吸吸、心心跳跳及及血血压压的的变变化化，一一者者它它们们是是实实验验反反应应的的数数据据指指标标，二二者者是是实实验验动动物物状状态态的的主主要要指指征征。尤尤其其对对呼呼吸吸的的观观察察，因因为为动动物的死亡首先是呼吸的停
44、止。物的死亡首先是呼吸的停止。（1 1）诱发原因）诱发原因 麻麻醉醉给给药药速速度度过过快快或或过过量量：实实施施静静脉脉给给药药麻麻醉醉，可可因因给给药药速速度度过过快快或或过过量量导导致致呼呼吸吸停停止止。因因此此，为为防防止止麻麻醉醉剂剂过过量量，注注射射速速度度一一定定不不要要过过快快，严严密密观观察察动动物物状状况况，若若需需追追加加麻麻醉醉剂剂，一一次次不不宜宜超超过过总总量量的的1/51/5。第108页，讲稿共116张，创作于星期日 气道不畅或堵塞：常见于麻醉后，因为气管分泌物增多或气管切口的出血凝块堵塞气管，动物呼吸不规则、呼吸困难甚至引起的窒息。大失血：如因大动脉插管的松脱所
45、造成的大失血。实验药物的作用：如静脉注射乙酰胆碱过量或动物对其反应过强，引起心搏减弱减慢，继而出现呼吸、心跳的停止。第109页，讲稿共116张，创作于星期日2 2、急救措施、急救措施 （1 1）迅迅速速排排查查、中中断断、排排除除诱诱因因。如如应应用用棉棉签签清清除除干干净净气气管管、气气管管插插管管内内的的分分泌泌物物及及血血凝凝块块。必必要要时拔出气管插管冲洗后再行气管插管术。时拔出气管插管冲洗后再行气管插管术。（2 2）根据下列不同情况采取相应的急救措施：）根据下列不同情况采取相应的急救措施：呼呼吸吸极极慢慢、不不规规则则，但但心心跳跳正正常常时时：给给予予人人工工呼呼吸吸-压压胸胸法，
46、适当给予苏醒剂。法，适当给予苏醒剂。呼呼吸吸停停止止仍仍有有心心跳跳时时：实实施施人人工工呼呼吸吸，必必要要时时可可使使用用人人工工呼呼吸吸机机或或吸吸氧氧（吸吸入入气气中中OO2 2占占95%95%，COCO2 2占占5 5）；注射；注射5050葡萄糖液葡萄糖液5 510ml10ml；给肾上腺素及苏醒剂。；给肾上腺素及苏醒剂。呼呼吸吸、心心跳跳均均停停止止时时：用用l l：1000010000肾肾上上腺腺素素溶溶液液心心内内注射，其余同注射，其余同。第110页，讲稿共116张，创作于星期日3 3、大失血、大失血 （1 1）诱发原因）诱发原因 多多因因动动脉脉插插管管结结扎扎不不牢牢、动动物物
47、挣挣扎扎，导导致致大大动动脉脉插插管管的的松松脱脱，或或在在进进行行动动脉脉插插管管术术时时，因因未未放放置置动动脉脉夹夹或或动动脉脉夹夹夹夹闭不全而剪切动脉引起。闭不全而剪切动脉引起。（2 2）急救措施）急救措施 立立即即止止血血：应应迅迅速速手手指指压压迫迫或或捏捏住住出出血血处处（尽尽量量不不要要用用止止血血钳钳，以以防防损损伤伤动动脉脉和和神神经经），然然后后仔仔细细检检查查分分离离出出血血点点，于于近近心心端端放放置置动动脉脉夹夹，再再行行动动脉脉插插管术。管术。补补充充血血容容量量：若若失失血血太太多多，适适当当加加快快输输液液(生生理理盐盐水水)速度，增加血容量。速度，增加血容量
48、。注射强心剂：静脉注射注射强心剂：静脉注射1 11000010000肾上腺素肾上腺素0.5ml0.5ml。第111页，讲稿共116张，创作于星期日十二、处死方法十二、处死方法1、颈椎脱臼法：小鼠、大鼠2、空气栓塞法：兔、猫、犬等大动物3、放血法：心脏放血或大血管放血4、断头法：小鼠、大鼠5、吸入二氧化碳6、麻醉法：如注射巴比妥类药物第112页，讲稿共116张，创作于星期日十三、十三、动物病理检查动物病理检查第113页，讲稿共116张，创作于星期日（一）一般病理检查（一）一般病理检查1、实验动物不明原因死亡或实验需要时必须进行尸检以查明死亡原因。2、对动物进行尸检应该在动物死亡后立即进行，不能立
49、即进行的需在冷冻的条件下保存动物尸体，以尽量保持病变与死亡前状态一致。3、外观检查：检查动物的发育状况、营养状况、精神状态、感觉器官、呼吸系统、消化系统、皮肤及被毛等指标。4、病理剖检：主要观察组织器官的大小、色泽、质地、切面和粘膜等指标。第114页，讲稿共116张，创作于星期日（二）组织病理学检查（二）组织病理学检查1、取材：按要求切取相应的组织器官，并用固定液进行固定。2、制片：按程序将切取的组织器官制作成组织切片。3、读片：在显微镜下观察动物的心、肝、脾、肺、肾、脑等重点器官。尸体需要做无害化处理：高压、焚烧、深埋等。第115页，讲稿共116张，创作于星期日感感谢谢大大家家观观看看4/9/20234/9/2023第116页，讲稿共116张，创作于星期日