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1、关于动物实验基本操作技术关于动物实验基本操作技术第一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20231一、大、小鼠的抓取固定第一节 实验动物的抓取与固定第二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20232小鼠固定盒固定第三张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20233大鼠固定盒固定第四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20234二、豚鼠的抓取固定法第五张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20235三、家兔的抓取固定法第六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20236第七张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/
2、6/20237一、大、小鼠的性别鉴定第二节 性别鉴定第八张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20238Female Male 二、兔的性别鉴定第九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20239一、大、小鼠 1.根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）第三节 年龄的大致判断日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1 1仔鼠裸体仔鼠裸体鲜红鲜红3 3耳壳露出表皮耳壳露出表皮4 4脐带脐带瘢痕脱落瘢痕脱落5 5能翻身能翻身8 8能爬行能爬行第十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202310日日龄龄/d/d外外观观形形态态特征特征1010能听到声音能听到声音9
3、 91111全身被白毛，全身被白毛，门齿长门齿长出出13131515眼皮眼皮张张开，能跳开，能跳跃跃，能抓取，能抓取东东西西1818以后以后能自行采食，独立生活能自行采食，独立生活第十一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202311第十二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202312第十三张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202313第十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202314第十五张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202315第十六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202316第十七张，P
4、PT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202317 2.根据体重鉴定日龄 小鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 5 10 15 20 25 30体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.0第十八张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202318 大鼠日龄与体重的对应大鼠日龄与体重的对应日龄/d初生 10 20 30 40 体重/g67 1725 3550 5590 100150日龄/d 50 60 70 80体重/g150210 170240 210270 240320第十九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202319二、豚鼠一般老年
5、豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。日日龄龄/d/d 初生初生 7 20 30 60 7 20 30 60 体重体重/g/g606080 10080 100120 150120 150200 170200 170220 240220 240300300日日龄龄/d/d 90 120 180 90 120 180体重体重/g/g330330400 400
6、400 400470 520470 520600第二十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202320三、家兔家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。第二十一张，PPT共八十五页，创作
7、于2022年6月4/6/202321五、犬犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8l0个月齿换齐。但犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。第二十二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202322年龄年龄 犬齿更换和磨损情况犬齿更换和磨损情况2 2个月以下个月以下仅有乳齿仅有乳齿(白、细、尖白、细、尖)2 24 4个月个月更换门齿更换门齿4 46 6个月个
8、月更换犬齿更换犬齿(白，牙尖圆钝白，牙尖圆钝)6 61010个月个月更换臼齿更换臼齿1 1岁岁牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突2 2岁岁下门齿尖突部分磨乎下门齿尖突部分磨乎3 3岁岁上、下门齿尖突大部分磨平上、下门齿尖突大部分磨平4 45 5岁岁上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄6 68 8岁岁门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损9 91010岁岁唇部、胡须发白唇部、胡须发白1010岁以上岁以上门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白第二十三张，PPT共八十五页，创作于20
9、22年6月4/6/202323第四节 妊娠检查雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又称妊娠诊断(pregnancydiagnosis)。通过妊娠检查，可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早期死亡和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要求准确，且及早确诊更为重要。第二十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202324外部检查法摸胎法阴道检查法直肠检查法超声波检查法孕酮含量测定法妊娠检查方法有第二十五张，PPT共八
10、十五页，创作于2022年6月4/6/202325第五节 分组与编号动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。一、随机分组（一）当分为二组时例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为甲、乙两组。分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个随机数字，如下：第二十六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202326动物编号：123456789101112随机数字：78386957910374566826541组别：乙乙甲甲甲乙甲甲乙乙甲甲现在以随
11、机数字的奇数代表甲组，偶数代表乙组，则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲组，而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字不等，继续用随机方法将甲组多余的一只调整给乙组，从上面最后一随机数字41，接下去抄一个数为62，以7除之(因甲组原分配7只)得6，即把原分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。第二十七张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202327如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲，余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后各组鼠的编号为：组别鼠的编号甲组3457812乙组12691011第二十八张，PPT共八十五页，
12、创作于2022年6月4/6/202328(二)当分为三组时例：设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次编为1，2，3，12号，试用完全随机的方法，分为A、B、C三组。分组方法：假设所定的点是随机数字表第40行17列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字：动物编号：123456789101112随机数字：082701501529393943796910除3余数：201202001101组别：BCABCBCCAACA调整组别：B第二十九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202329 以以3 3除除各各随随机机数数字字，若若余余数数为为l l，即即该该鼠鼠归归A A组组；余余
13、数数为为2 2，归归人人B B组组；余余数数为为3 3，归归入入C C组组。结结果果A A组组为为4 4只只，B B组组为为3 3只只，C C组组为为5 5只只。C C组组多多一一只只应应调调入入B B组组。方方法法同同上上。仍仍采采用用随随机机方方法法；从从1010后后面面接接着着抄抄，为为6161。除除以以5 5，余余数数为为1 1，则则将将第第一一个个C C，即第，即第2 2号鼠调入号鼠调入B B组。调整后各组鼠的编号如下：组。调整后各组鼠的编号如下：组别组别鼠的编号鼠的编号AA组组391012391012BB组组l246l246C组57811对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致对
14、于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致第三十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202330（三）当每个动物一组时：例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试用完全随机法将其每只分为一组。分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即将余数写下。除尽的，写余数时即将其除数写下。如下：第三十一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202331随机数字3346952687除数654321余数311121随机排列CABDFE上列第一个随机数字余数为3，意即将6个字母中
15、列在第三位的字母C写在该数下，第二个数宇的余数为1，即在剩下的5个字母列在第一位的A写在该数字下面，余此类推。第三十二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202332二、编号标记方法实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。1 1体体表表颜颜料料着着色色法法 一一般般对对短短期期试试验验的的白白色色动动物物可可用用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药品有：红色：红色：0.50.5中性红或品红溶液；中性红或品红溶液；黄黄色色：3 35 5苦苦味味酸酸溶溶液液或或80809090苦苦味味酸酸酒
16、酒精精饱和液；饱和液；咖啡色：咖啡色：2 2硝酸银溶液；硝酸银溶液；黑色：煤焦油酒精溶液。黑色：煤焦油酒精溶液。第三十三张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202333 左 前 腿上部为1，左腰部为2，左后腿为3，头部为4，背部为5，尾基部为6，右侧从前至后依次为7、8、9。用黄色表示个位数，红色表示十位数。第三十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202334 2个体耳号标记法 3.个体断趾标记法 4.耳号钳标记法 5.挂牌法第三十五张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202335第六节 常规采血方法一、大、小鼠的采血方法1颈静脉或颈动脉采血2股静
17、脉或股动脉采血3心脏采血4尾部采血5眼眶采血6断头取血第三十六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202336颈静脉或颈动脉采血尾部采血第三十七张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202337心脏采血第三十八张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202338二、豚鼠的采血方法1耳缘剪口采血2心脏采血方法同大、小鼠。3股动脉采血方法同大、小鼠。4后肢背中足静脉采血第三十九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202339三、家兔的采血方法1心脏采血2耳中央动脉采血3耳静脉采血第四十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202340四
18、、狗、猫的采血方法1后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧皮下头静脉采血2股动脉采血3.心脏采血同大、小鼠心脏采血4耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血第四十一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202341采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、NaNa
19、+、Cl-离子浓度，必须采取动脉血液。离子浓度，必须采取动脉血液。第四十二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202342采采血血场场所所有有充充足足的的光光线线；室室温温夏夏季季最最好好保保持持在在25252828，冬季，冬季，15152020为宜；为宜；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用具有采用部位一般需要进行消毒；采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。采血时要注意第四十三张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202343部位 动物种类尾静脉大鼠、小鼠耳静脉兔、
20、狗、猫、猪、山羊、绵羊眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠d舌下静脉兔e腹壁静脉青蛙、蟾蜍f冠、脚蹼皮下静脉 鸡、鸭、鹅取少量血第四十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202344部位 动物种类后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫耳中央动脉兔颈静脉狗、猫、兔心脏豚鼠、大鼠、小鼠断头大鼠、小鼠翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅取中量血第四十五张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202345部位 动物种类股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔心脏狗、猴、猫、兔颈静脉马、牛、山羊、绵羊摘眼球大鼠、小鼠取大量血第四十六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4
21、/6/202346动物种类最大安全采血量(ml)最小致死采血量(ml)小鼠0.20.3大鼠12豚鼠510兔1040狼狗100500猎狗50200猴15604.最大安全采血量与最小致死采血量第四十七张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202347第七节 给药途径与方法在动物实验过程中，应根据不同的实验目的、动物种类、药物类型来决定动物的给药途径与方法。动物的给药方法主要分为注射法和投入法两种，不同方法按给药途径又分为很多具体类型。注射法分为：皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、脑膜下注射、脑内注射、胸腔内注射、腰椎内注射、静脉注射、关节腔注射和心内注射。投入法可分为：鼻腔内投入、胃腔内投
22、入、肠管内投入、气管内投入和经口腔投入。以下将各种动物的主要给药途径和方法做一介绍。第四十八张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202348（一）皮下注射（一）皮下注射注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有5（1/2）号针头的注射器刺入皮下。皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。（二）皮内注射（二）皮内注射 皮皮内内注注射射时时需需将将注注射射的的局局部部脱脱去去被被毛毛，消消毒毒后后，用用左左手手拇拇指指和和食食指指按按住住皮皮肤肤并并使使之之绷绷紧紧，在在两两指指之之间间，用用结结核核
23、菌菌素素注注射射器器连连4(1/2)4(1/2)细细针针头头，紧紧贴贴皮皮肤肤表表层层刺刺入入皮皮内内，然然后后再再向向上上挑挑起起并并再再稍稍刺刺入入，即即可可注注射射药药液液，此此时时可可见见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。皮肤表面鼓起一白色小皮丘。第四十九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202349（四）腹腔注射（四）腹腔注射 用用大大、小小白白鼠鼠做做实实验验时时，以以左左手手抓抓住住动动物物，使使腹腹部部向向上上，右右手手将将注注射射针针头头于于左左（或或右右）下下腹腹部部刺刺入入皮皮下下，使使针针头头向向前前推推0.50.51.0cm1.0cm，再再以以4545度度角角
24、穿穿过过腹腹肌肌，固固定定针针头头，缓缓缓缓注注入入药液，药液，为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。第五十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202350（五）静脉注射（五）静脉注射 1 1兔兔：兔兔耳耳部部血血管管分分布布清清晰晰。兔兔耳耳中中央央为为动动脉脉，耳耳外外缘缘为为静静脉脉。内内缘缘静静脉脉深深不不易易固固定定，故故不不用用。外外缘缘静静脉脉表表浅浅易易固固定定，常常用用。先先拔拔去去注注射射部部位位的的被被毛毛，用用手手指指弹弹动动或或轻轻揉揉兔兔耳耳，使使静静脉脉充充盈盈，左左手手食食指指和
25、和中中指指夹夹住住静静脉脉的的近近端端，拇拇指指绷绷紧紧静静脉脉的的远远端端，无无名名指指及及小小指指垫垫在在下下面面，右右手手持持注注射射器器连连6 6号号针针头头尽尽量量从从静静脉脉的的远远端端刺刺入入，移移动动拇拇指指于于针针头头上上以以固固定定针针头头，放放开开食食指指和和中中指指，将将药药液液注注入入，然然后后拔拔出出针针头头，用用手手压压迫迫针针眼片刻。眼片刻。第五十一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/2023512小白鼠和大白鼠 一一般般采采用用尾尾静静脉脉注注射射，操操作作时时先先将将动动物物固固定定在在鼠鼠筒筒内内或或扣扣在在烧烧杯杯中中，使使尾尾巴巴露露出出
26、，尾尾部部用用45455050的的温温水水浸浸润润半半分分钟钟或或用用酒酒精精擦擦拭拭使使血血管管扩扩张张，并并可可使使表表皮皮角角质质软软化化，以以左左手手拇拇指指和和食食指指捏捏住住鼠鼠尾尾两两侧侧，使使静静脉脉充充盈盈，用用中中指指从从下下面面托托起起尾尾巴巴，以以无无名名指指和和小小指指夹夹住住尾尾巴巴的的末末梢梢，右右手手持持注注射射器器连连4(1/2)4(1/2)号号细细针针头头，使使针针头头与与静静脉脉平平行行（小小于于3030），从从尾尾下下四四分分之之一一处处（约约距距尾尾尖尖2 23 3厘厘米米）处处进进针针，此此处处皮皮薄薄易易于于刺刺入入，先先缓缓注注少少量量药药液液，
27、如如无无阻阻力力，表表示示针针头头已已进进入入静静脉脉，可可继继续续注注入入。注注射射完完毕毕后后把把尾尾部部向向注注射射侧侧弯弯曲曲以以止止血血。如如需需反反复复注注射射，应应尽尽可可能能从从末末端端开开始始，以以后后向向尾尾根根部部方方向向移移动注射。动注射。第五十二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20235233狗狗狗静脉注射多选前肢内侧皮下头静脉或后肢小隐静脉注射。注射前由助手将动物侧卧，剪去注射部位的被毛，用胶皮带扎紧（或用手抓紧）静脉近端，使血管充盈，从静脉的远端将注射针头平行刺入血管，待有回血后，松开绑带（或两手），缓缓注入药液。第五十三张，PPT共八十五页，创
28、作于2022年6月4/6/202353注射途径小鼠大鼠豚鼠兔狗腹腔0.21.0 1325510515肌肉0.10.2 0.20.5 0.20.5 0.5125静脉0.20.5 1215310515皮下0.10.5 0.510.5213310几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）第五十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202354（六）经口给药（六）经口给药多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小白鼠、大白鼠、家兔等动物。1 1小鼠、大鼠（或豚鼠）小鼠、大鼠（或豚鼠）灌灌胃胃时时将将灌灌胃胃针针按按在在注注射射器器上上，吸吸入入药药液液。左左手手抓抓住住鼠鼠背背部部及及颈颈部部皮皮
29、肤肤将将动动物物固固定定，右右手手持持注注射射器器，将将灌灌胃胃针针插插入入动动物物口口中中，沿沿咽咽后后壁壁徐徐徐徐插插入入食食道道。动动物物应应固固定定成成垂垂直直体体位位，针针插插入入时时应应无无阻阻力力。若若感感到到阻阻力力或或动动物物挣挣扎扎时时，应应立立即即停停止止进进针针或或将将针针拔拔出出，以以兔兔损损伤伤或或穿穿破破食食道以及误入气管。道以及误入气管。一一般般当当灌灌胃胃针针插插入入小小鼠鼠3 34cm4cm，大大鼠鼠或或豚豚鼠鼠4 46cm6cm后后可可将将药药物物注注入入。常常用用的的灌灌胃胃量量小小鼠鼠为为0.20.2 1ml1ml，大大鼠鼠1 14ml4ml，豚鼠为，
30、豚鼠为1 15ml5ml。第五十五张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/2023552狗、兔、猫、猴 灌灌胃胃时时，先先将将动动物物固固定定，再再将将特特制制的的扩扩口口器器放放入入动动物物口口中中，扩扩口口器器之之宽宽度度可可视视动动物物口口腔腔大大小小而而定定，如如狗狗的的扩扩口口器器可可用用木木料料制制成成长长方方形形，长长约约1010 15cm15cm，粗粗细细应应适适合合狗狗嘴嘴，约约2 23cm3cm，中中间间粘粘一一小小孔孔，孔孔的的直直途途为为5 510cm。灌胃时将扩口器放于上述动物上下门牙之后，并用绳将它固定于嘴部，将带有弹性的橡皮导管（如导尿管），经扩口器上的
31、小圆孔插入，沿咽后壁而进入食道，此时应检查导管是否正确插入食道，可将导管外口置于一盛水的烧杯中，如不发生气泡，即认为此导管是在食道中，未误入气管，即可将药液灌入。第五十六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202356 给给狗狗、兔兔灌灌胃胃时时，可可不不用用扩扩口口器器：狗狗灌灌胃胃时时，用用1212号号灌灌胃胃管管，左左手手抓抓住住狗狗嘴嘴，右右手手中中指指由由右右嘴嘴角角插插入入，摸摸到到最最后后一一对对臼臼齿齿后后的的天天然然空空隙隙，胃胃管管由由此此空空隙隙顺顺食食管管方方向向不不断断插插入入约约20cm20cm，可可达达胃胃内内，将将胃胃管管另另一一端端插插入入水水中
32、中，如如不不出出气气泡泡，表表示示确确已已进进入入胃胃，而而没没误误入入气气管管内内，即即可可灌灌入入。兔兔灌灌胃胃时时，将将兔兔固固定定在在木木制制固固定定盒盒内内左左手手虎虎口口卡卡住住并并固固定定好好兔兔嘴嘴，右右手手取取1414号号细细导导管管，由由右右侧侧唇唇裂裂避避开开门门齿齿，将将导导管管慢慢慢慢插插入入，如如插插管管顺顺利利，动动物物不不挣挣扎扎，插插入入约约15cm15cm时时，即即表表示插入胃内，将药液注入。示插入胃内，将药液注入。各种动物一次灌胃能耐受的最大容积小鼠为0.51.0ml1.0ml，大大鼠鼠4 47ml7ml，豚豚鼠鼠为为4 47ml7ml，家家兔兔为为808
33、0150ml，狗为200500ml500ml。第五十七张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202357（七）其它途径给药（七）其它途径给药 1 1呼呼吸吸道道给给药药呈呈粉粉尘尘、气气体体及及蒸蒸气气或或雾雾等等症症状状存存在在药药物物或或毒毒气气，均均需需要要通通过过动动物物呼呼吸吸道道给给药药。如如一一般般实实验验时时给给动动物物乙乙醚醚作作吸吸入入麻麻醉醉，给给动动物物吸吸一一定定量量的的氨氨气气、二二氧氧化化碳碳等等观观察察呼呼吸吸、循循环环等等变变化化；给给动动物物定定期期吸吸入入一一定定量量的的SOSO2。锯锯末末烟烟雾雾等等可可造造成成慢慢性性气气管管炎炎动动物物模
34、模型型等等；特别在毒物学实验中应用更为广泛。特别在毒物学实验中应用更为广泛。2 2皮皮肤肤给给药药为为了了鉴鉴定定药药物物或或毒毒物物经经皮皮肤肤的的吸吸收收作作用用、局局部部作作用用、致致敏敏作作用用和和光光感感作作用用等等，均均需需采采用用经经皮皮肤肤给给药药方方法法。如如家家兔兔和和豚豚鼠鼠常常采采用用背背部部一一定定面面积积的的皮皮肤肤脱脱毛毛后后，将将一一定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。定药液涂在皮肤上，药液经皮肤吸收。第五十八张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20235833脊髓腔内给药此法主要用于椎管麻醉或抽取脑脊液。脊髓腔内给药此法主要用于椎管麻醉或抽取脑脊液
35、。家家兔兔椎椎管管内内注注射射方方法法：将将家家兔兔作作自自然然俯俯卧卧式式，尽尽量量使使其其尾尾向向腹腹侧侧屈屈曲曲，用用粗粗剪剪将将第第七七腰腰椎椎周周围围背背毛毛剪剪去去，用用3%3%碘碘酊酊消消毒毒，干干后后再再用用79%79%酒酒精精将将碘碘酒酒擦擦去去。在在兔兔背背部部髌髌骨骨脊脊连连线线之之中中点点稍稍下下方方摸摸动动第第七七腰腰椎椎间间隙隙（第第七七腰腰椎椎与与第第一一骶骶骨骨椎椎之之间间），插插入入腰腰椎椎穿穿刺刺针针头头。当当针针到到达达椎椎管管内内时时（珠珠网网膜膜下下腔腔），可可见见到到兔兔的的后后肢肢跳跳动动，即即证证明明穿穿刺刺针针头头已已进进入入椎椎管管。这这时时
36、不不要再向下刺，以兔损伤脊髓。固定好针头，即可将药物注入。要再向下刺，以兔损伤脊髓。固定好针头，即可将药物注入。第五十九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/2023594小脑延髓池给药此种给药都是在动物麻醉情况下进行的。而且常采用大动物如狗等，小动物很少采用。将狗麻醉后，使狗头尽量向胸部屈曲，用左手摸到其第一颈椎上方的凹陷（枕骨大孔），固定位置，右手取7号钝针头（将针头尖端麻钝），由此凹陷的正中线上，顺平行狗的方向，小心地刺入小脑延髓池。当针头正确刺入小脑延髓池时，注射者会感到针头再向前穿时无阻力，同时可以听到很轻的“咔嚓”一声，即表示针头已穿过硬脑膜进入小脑延髓池，而且可抽出清
37、亮的脑脊液，注射药物前，先抽出一些脑脊液，抽取量根据实验需要注入多少药液决定，即注入多少抽取多少，以保持原来脑脊髓腔里的压力。第六十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202360 5 5脑脑内内给给药药此此法法常常用用于于微微生生物物学学动动物物实实验验，将将病病原原体体等等接接种种于于被被检检动动物物脑脑内内，然然后后观观察察接接种种后后的的各各种种变变化化。小小鼠鼠脑脑内内给给药药时时，选选套套有有塑塑料料管管、针针尖尖露露出出2mm2mm深深的的5(1/2)5(1/2)针针头头，由由鼠鼠正正中中额额部部刺刺入入脑脑内内，注注入入药药物物或或接接种种物物。给给豚豚鼠鼠、兔兔
38、、狗狗等等进进行行脑脑内内注注射射时时，须须先先用用穿穿颅颅钢钢针针穿穿透透颅颅骨骨，再再用用注注射射器器针针头头刺刺入入脑脑部部，再再徐徐徐徐注注入入被被检检物物。注注射射速速度度一一定定要要慢慢，避免引起颅内压急骤升高。避免引起颅内压急骤升高。第六十一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/2023616直肠内给药此种给药方法常用于动物麻醉。家兔直肠内给药时，取灌肠用的胶皮管或用14号导尿管代替。在胶皮管或导尿管头上涂上凡士林，由助手使兔蹲卧于桌上，以左臂及左腋轻轻按住兔头及前肢，以左手拉住兔尾，露出肛门，并用右手轻握后肢，实验者将橡皮管插入家兔肛门内，浓度约79cm，如为雌性动
39、物，注意勿误插入阴道（肛门紧接尾根）。橡皮管插好后，将注射器与橡皮管套紧，即可灌注药液。第六十二张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202362 7 7关关节节腔腔内内给给药药此此种种方方法法常常用用于于关关节节炎炎的的动动物物模模型型复复制制。兔兔给给药药时时，将将兔兔仰仰卧卧固固定定于于兔兔固固定定台台上上，剪剪去去关关节节部部被被毛毛，用用碘碘酒酒或或酒酒精精消消毒毒，然然后后用用手手从从下下方方和和两两旁旁将将关关节节固固定定，把把皮皮肤肤稍稍移移向向一一侧侧，在在膑膑韧韧带带附附着着点点处处上上方方约约0.50.5厘厘米米处处进进针针。针针头头从从上上前前方方向向下下后
40、后方方倾倾斜斜刺刺进进，直直至至针针头头遇遇阻阻力力变变小小，然然后后针针头头稍稍后后退退，以以垂垂直直方方向向推推到到关关节节腔腔中中。针针头头进进入入关关节节腔腔时时，通通常常可可有有好好象象刺刺破破薄薄膜的感觉，表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。膜的感觉，表示针头已进入膝关节腔内，即可注入药液。第六十三张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202363第八节 麻醉方法麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。一、常用的麻醉剂动物实验中常用的麻醉剂分为三类，即挥发性麻醉剂、非挥
41、发性麻醉剂和中药麻醉剂。第六十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20236411挥发性麻醉剂挥发性麻醉剂包括乙醚、氯仿等，乙醚吸入麻醉适用于各种动物，其麻醉量和致死量差距大，所以安全度亦大，动物麻醉深度容易掌握，而且麻后苏醒较快。其缺点是对局部刺激作用大，可引起上呼吸道粘膜液体分泌增多，再通过神经反射可影响呼吸、血压和心跳活动，并且容易引起窒息，故在乙醚吸入麻醉时必需有人照看，以 防 麻 醉 过 深 而 出 现 以 上 情 况。第六十五张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/2023652非挥发性麻醉剂 这这类类麻麻醉醉剂剂种种类类较较多多，包包括括苯苯巴巴比比妥妥
42、钠钠、戊戊巴巴比比妥妥钠钠、硫硫喷喷妥妥钠钠等等巴巴比比妥妥类类的的衍衍生生物物，氨氨基基甲甲酸酸乙乙脂脂和和水水合合氯氯醛醛。这这些些麻麻醉醉剂剂使使用用方方便便，一一次次给给药药可可维维持持较较长长的的麻麻醉醉时时间间，麻麻醉醉过过程程较较平平衡衡，动动物物无无明明显显挣挣扎扎现现象象。但但缺缺点点是是苏苏醒醒较较慢。慢。33中药麻醉剂中药麻醉剂 动动物物实实验验时时有有时时也也用用到到象象洋洋金金花花和和氢氢溴溴酸酸东东莨莨菪菪碱碱等等中中药药麻麻醉醉剂剂，但但由由于于其其作作用用不不够够稳稳定定，而而且且常常需需加加佐佐剂剂麻麻醉醉效效果果才才能能理理想想，故故在在使使用用过过程程中中
43、不不能能得得到到普普及及，因因而而，多多数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。数实验室不选用这类麻醉剂进行麻醉。第六十六张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202366二、动物的麻醉方法二、动物的麻醉方法11全身麻醉全身麻醉（1 1）吸入法）吸入法 用用一一块块圆圆玻玻璃璃板板和和一一个个钟钟罩罩或或一一个个密密闭闭的的玻玻璃璃箱箱作作为为挥挥发发性性麻麻醉醉剂剂的的容容器器，多多选选用用乙乙醚醚作作麻麻药药。麻麻醉醉时时用用几几个个棉棉球球，将将乙乙醚醚倒倒入入其其中中，迅迅速速转转入入钟钟罩罩或或箱箱内内，让让其其挥挥发发，然然后后把把待待麻麻醉醉动动物物投投入入，约约隔隔4 4
44、6 6分分钟钟即即可可麻麻醉醉，麻麻醉醉后后应应立立即即取取出出，并并准准备备一一个个蘸蘸有有乙乙醚醚的的棉棉球球小小烧烧杯杯，在在动动物物麻麻醚醚变变浅浅时时给给套套在在鼻鼻上上使使其其补补吸吸麻麻药药。本本法法最最适适于于大大、小小鼠鼠的的短短期期操操作作性性实实验验的的麻麻醉醉，也也可可用用于于较较大大的的动动物物。由由于于乙乙醚醚燃燃点点很很低低，遇遇火火极极易易燃燃烧烧，所所以以在在使使用用时时，一一定定要远离火源。要远离火源。第六十七张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202367（2 2）腹腔和静脉给药麻醉法）腹腔和静脉给药麻醉法非挥发性和中药麻醉剂均可用作腹腔和静
45、脉注射麻醉，操作简便，是实验室最常采用的方法之一。腹腔给药麻醉多用于大小鼠和豚鼠，较大的动物如兔、狗等则多用静脉给药进行麻醉。由于各麻醉剂的作用长短以及毒性的差别。所以在腹腔和静脉麻醉时，一定要控制药物的浓度和注射量。第六十八张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20236822局部麻醉局部麻醉猫的局部麻醉一般应用0.51.0%1.0%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。粘粘 膜膜 表表 面面 麻麻 醉醉 宜宜 用用 2%2%盐盐 酸酸 可可 卡卡 因因。兔兔在在眼眼球球手手术术时时，可可于于结结膜膜囊囊滴滴入入0.02%0.02%盐盐酸酸可可卡卡因因溶液，数秒钟即可出现麻醉。溶液，
46、数秒钟即可出现麻醉。狗的局部麻醉用0.51%1%盐盐酸酸普普鲁鲁卡卡因因注注射射。眼眼鼻鼻、咽喉表面麻醉可用咽喉表面麻醉可用2%2%盐酸可卡因。盐酸可卡因。第六十九张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/2023693.3.麻醉效果的观察麻醉效果的观察 动动物物的的麻麻醉醉效效果果直直接接影影响响实实验验的的进进行行和和实实验验结结果果。如如果果麻麻醉醉过过浅浅，动动物物会会因因疼疼痛痛而而挣挣扎扎，甚甚至至出出现现兴兴奋奋状状态态，呼呼吸吸心心跳跳不不规规则则，影影响响观观察察。麻麻醉醉过过深深，可可使使机机体体的的反反应应性性降降低低，甚甚至至消消失失，更更为为严严重重的的是是抑
47、抑制制延延髓髓的的心心血血管管活活动动中中枢枢和和呼呼吸吸中中枢枢，使使呼呼吸吸、心心跳跳停停止止，导导致致动动物物死死亡亡。因因此此，在在麻麻醉醉过过程程中中必必须须善善于于判判断断麻麻醉醉程程度度，观观察察麻麻醉醉效效果果。判判断麻醉程度的指标有：断麻醉程度的指标有：第七十张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202370 呼呼吸吸：加加快快或或不不规规则则，则则麻麻醉醉过过浅浅，可可再再追追加加麻麻醉醉，若若呼呼吸吸由由不不规规则则转转变变为为规规则则且且平平稳稳，说说明明已已达达到到麻麻醉醉深深度度。若若动动物物呼呼吸吸变变慢慢，且且以以腹腹式式呼呼吸吸为为主主，说说明明麻
48、麻醉醉过过深深，动动物物有生命危险。有生命危险。反射活动：角膜反射灵敏，则麻醉过浅；反射迟钝，麻醉程度适宜；反射消失，伴瞳孔散大，则麻醉过深。肌张力：亢进，麻醉过浅；全身肌肉松弛，麻醉合适。皮肤夹捏反应：麻醉过程中可随时用止血钳或有齿镊夹捏动物皮肤，若反应灵敏，则麻醉过浅；若反应消失，则麻醉程度合适。第七十一张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/20237144麻醉注意事项麻醉注意事项静脉注射必须缓慢，同时观察肌肉紧张性、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，立即停止注射。配制的药液浓度要适中，不可过高，以兔麻醉过急；但也不能过低，以减少注入溶液的体积。第七十二张
49、，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202372 麻麻醉醉时时需需注注意意保保温温。麻麻醉醉期期间间，动动物物的的体体温温调调节节机机能能往往往往受受到到抑抑制制，出出现现体体温温下下降降，可可影影响响实实验验的的准准确确性性。此此时时常常需需采采取取保保温温措措施施。保保温温的的方方法法有有，实实验验桌桌内内装装灯灯，电电褥褥，台台灯灯照照射射等等。无无论论用用哪哪种种方方法法加加温温都都应应根根据据动动物物的的肛肛 门门 体体 温温 而而 定定。常常 用用 实实 验验 动动 物物 正正 常常 体体 温温：猫猫 为为38.61.038.61.0，兔为，兔为38.41.038.41
50、.0，大鼠为，大鼠为39.30.539.30.5。作作慢慢性性实实验验时时，在在寒寒冷冷冬冬季季，麻麻醉醉剂剂在在注注射射前前应应加热至动物体温水平。加热至动物体温水平。第七十三张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202373第九节 处死方法当实验中途停止或结束时，实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物，原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。第七十四张，PPT共八十五页，创作于2022年6月4/6/202374一、蛙一、蛙 类类 常常用用金金属属探探针针