14维生素类药物的分析.pptx

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1、化学与制药工程学院化学与制药工程学院2021/9/131药物分析药物分析药物分析药物分析主讲主讲主讲主讲:罗容珍罗容珍罗容珍罗容珍Pharmaceutical AnalysisPharmaceutical Analysis第十四章第十四章 维生素类药维生素类药物的分析物的分析化学与制药工程学院化学与制药工程学院2 22021/9/132021/9/13维生素类药物的分析维生素类药物的分析 维生素维生素维持人类机体正常代谢功能所必须的一类维持人类机体正常代谢功能所必须的一类活性物质活性物质,主要用于机体的能量转移和代主要用于机体的能量转移和代谢调节谢调节,体内不能合成体内不能合成,须从食物中摄取

2、。须从食物中摄取。通俗来讲，即维持生命的物质，是维持人通俗来讲，即维持生命的物质，是维持人体生命活动必须的一类有机物质，也是保体生命活动必须的一类有机物质，也是保持人体健康的重要活性物质。维生素在体持人体健康的重要活性物质。维生素在体内的含量很少，但不可或缺。内的含量很少，但不可或缺。化学与制药工程学院化学与制药工程学院3 32021/9/132021/9/13维生素类药物的分析维生素类药物的分析 维生素维生素醇醇从化学结构上来讲，维生素类均属于从化学结构上来讲，维生素类均属于有机化合物，但并非同一类化合物。有机化合物，但并非同一类化合物。酯酯酸酸胺胺酚酚醛醛各具有不同的理化性各具有不同的理化

3、性质和生理作用质和生理作用化学与制药工程学院化学与制药工程学院4 42021/9/132021/9/13按溶解度分按溶解度分化学与制药工程学院化学与制药工程学院5 52021/9/132021/9/13维生素类药物的分析方法维生素类药物的分析方法生物生物法法微生微生物法物法化学化学法法物理化物理化学法学法都是依据药物的化学都是依据药物的化学结构、理化性质与生结构、理化性质与生物特性来进行分析物特性来进行分析化学与制药工程学院化学与制药工程学院6 62021/9/132021/9/13AB1CDEVitaminsVitaminsContents主要讲解主要讲解化学与制药工程学院化学与制药工程学院

4、7 72021/9/132021/9/13维生素维生素A的分析的分析维生素维生素A是一种不饱和脂肪醇，在自然是一种不饱和脂肪醇，在自然蜀中主要来源于蜀中主要来源于鲛鲛类海鱼肝脏类海鱼肝脏中提取的脂肪油（鱼肝油）。中提取的脂肪油（鱼肝油）。鲛鲛类海类海鱼鱼？具有多种异构体，有不具有多种异构体，有不同的名称，其中活性最同的名称，其中活性最好的是维生素好的是维生素A1，也是，也是通常所指的维生素通常所指的维生素A化学与制药工程学院化学与制药工程学院8 82021/9/132021/9/13维生素维生素A的分析的分析维生素维生素A具有一个共轭多烯醇侧链的具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体环

5、已烯，具有多个异构体化学与制药工程学院化学与制药工程学院9 92021/9/132021/9/13维生素维生素A的分析的分析维生素维生素A具有一个共轭多烯醇侧链的具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体环已烯，具有多个异构体维生素维生素A醇醇（Retinol)化学与制药工程学院化学与制药工程学院10102021/9/132021/9/13维生素维生素A的分析的分析维生素维生素A具有一个共轭多烯醇侧链的具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体环已烯，具有多个异构体维生素维生素A醋酸酯醋酸酯（Vitamin A Acetate)化学与制药工程学院化学与制药工程学院11112021/9/

6、132021/9/13维生素维生素A的分析的分析维生素维生素A具有一个共轭多烯醇侧链的具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体环已烯，具有多个异构体维生素维生素A棕榈酸酯棕榈酸酯（Vitamin A Palmitate)化学与制药工程学院化学与制药工程学院12122021/9/132021/9/13维生素维生素A的分析的分析维生素维生素A具有一个共轭多烯醇侧链的具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体环已烯，具有多个异构体去氢维生素去氢维生素A（A2 dehydroretinol)化学与制药工程学院化学与制药工程学院13132021/9/132021/9/13维生素维生素A的分析的

7、分析维生素维生素A具有一个共轭多烯醇侧链的具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体环已烯，具有多个异构体去水维生素去水维生素A（A3 anhydroretinol)化学与制药工程学院化学与制药工程学院14142021/9/132021/9/13第一节 VitA912345678Retinol(Vit A alcohol)VA acetateVA palmitate2-Cis Neovitamin Aa 4-Cis Neovitamin Ab2,4-dicis Neovitamin Ac6-Cis Isovitamin Aa 化学与制药工程学院化学与制药工程学院15152021/9/132

8、021/9/13第一节 VitA二、主要性质 溶解性溶解性:与三氯甲烷、乙醚、环已烷或石油醚能任与三氯甲烷、乙醚、环已烷或石油醚能任意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。不稳定性：不稳定性：含有多个不饱和键，性质不稳定，易被含有多个不饱和键，性质不稳定，易被被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂解，特别是被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂解，特别是在加热和金属离子存在时更易氧化变质从而失活。在加热和金属离子存在时更易氧化变质从而失活。紫外吸收：紫外吸收：共轭多烯醇侧链结构，在共轭多烯醇侧链结构，在325-328nm325-328nm之之间有最大吸收，可用于鉴别间有

9、最大吸收，可用于鉴别 与三氯化锑呈色与三氯化锑呈色:三氯甲烷三氯甲烷+三氯化锑三氯化锑=不稳定的蓝不稳定的蓝色色化学与制药工程学院化学与制药工程学院16162021/9/132021/9/13第一节 VitA二、鉴别试验Vit ASbCl3CHCl3(无水无醇)蓝色紫红色1.三氯化锑反应(Carr-Price反应)书上的书上的有点小有点小错误错误化学与制药工程学院化学与制药工程学院17172021/9/132021/9/13第一节 VitA二、鉴别试验反应应在无水无醇条件下进行。因为水可使三氯化锑水解，而乙醇可以使碳正离子作用而使反应不能进行Notice化学与制药工程学院化学与制药工程学院18

10、182021/9/132021/9/13第一节 VitA2.UVVit AVit A3维生素维生素A在无水乙在无水乙醇盐酸溶液中溶解醇盐酸溶液中溶解,立即进行立即进行UV扫描扫描,在在360nm处有一处有一最大吸收峰最大吸收峰.如如1.水浴加热水浴加热30s,迅速迅速冷却冷却,此过程发生此过程发生脱水反应脱水反应,扫描时扫描时出现三个吸收峰出现三个吸收峰化学与制药工程学院化学与制药工程学院19192021/9/132021/9/13第一节 VitA2.UVVit AVit A33.TLC：三氯化锑显色，磷钼酸显色维生素维生素A去水维去水维生素生素A最大吸收最大吸收峰向长波峰向长波方向移动：方向

11、移动：红移红移化学与制药工程学院化学与制药工程学院20202021/9/132021/9/13三、含量测定三、含量测定 维生素维生素A的测定的测定CHP收载三种收载三种HPLC法法UV三氯化锑法三氯化锑法化学与制药工程学院化学与制药工程学院21212021/9/132021/9/13三、含量测定三、含量测定 UV维生素维生素A常混有杂质，包括多种异常混有杂质，包括多种异构体，氧化降解产物，合成中间体，构体，氧化降解产物，合成中间体，副产物等以及常用稀释油类。都有副产物等以及常用稀释油类。都有紫外吸收，干扰测定。紫外吸收，干扰测定。咋办呢？咋办呢？请用三点校正法！请用三点校正法！化学与制药工程学

12、院化学与制药工程学院22222021/9/132021/9/13第一节 VitA维生素维生素A在在325-328nm的波的波长范围内具有最大吸收，其长范围内具有最大吸收，其最大吸收峰的位置随溶剂的最大吸收峰的位置随溶剂的不同而异。如下：不同而异。如下：应用三点校正法时要注意应用三点校正法时要注意化学与制药工程学院化学与制药工程学院23232021/9/132021/9/13第一节 VitAAnmVit A samplepure VA acetateimpurities测定原理u 杂质的吸收在杂质的吸收在310 340 nm波长范围内呈一波长范围内呈一条直线，且随波长的增条直线，且随波长的增大吸

13、收度减小大吸收度减小；（假设）（假设）u 物质对光的吸收具有物质对光的吸收具有加和性加和性。（真理）（真理）化学与制药工程学院化学与制药工程学院24242021/9/132021/9/13第一节 VitA第一法等波长差法213nmAVit A samplepure VA acetateimpurities328340316A1A2A3A1A2A3X1X2X3设：已知A1=A1-X1=A1-(m1+C)A2=A2-X2=A2-(m2+C)A3=A3-X3=A3-(m3+C)VitA醋酸酯醋酸酯Y=mX+C化学与制药工程学院化学与制药工程学院25252021/9/132021/9/13第一节 Vi

14、tA第一法等波长差法213nmAVit A samplepure VA acetateimpurities328340316A1A2A3A1A2A3X1X2X3A328(校正校正)=3.52(2A328-A316-A340)VitA醋酸酯醋酸酯经过一系列变换经过一系列变换,得出下式得出下式通过实验求出通过实验求出A1、A2、A3，再用纯品求出再用纯品求出K1、K2，再转换，再转换波长为波长为chp2010药典规定药典规定化学与制药工程学院化学与制药工程学院26262021/9/132021/9/13第二法等吸收比法第一节 VitAA213nm310325334A2=A3=6/7A1A1A2A3

15、A2A1A3FLDMEA325(校正校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334VitA醇醇波长为波长为chp2010药典规定药典规定化学与制药工程学院化学与制药工程学院27272021/9/132021/9/13测定方法一、基本步骤第一步：选择A （A328 或或A328(校正后校正后)）选择依据选择依据所选所选A A值中杂质的干扰已基本消除值中杂质的干扰已基本消除第二步：求第三步：求效价（每克供试品所含维生素A的国际单位数）规规定定具体步骤具体步骤测定测定A化学与制药工程学院化学与制药工程学院28282021/9/132021/9/13测定方法1IU=0.344g V

16、it A 醋酸酯1gVit A 醋酸酯=106 g/0.344(g/IU)=2.907106IU Vit A 醋酸酯换算因子=2.907106 IU/1530 =1900化学与制药工程学院化学与制药工程学院29292021/9/132021/9/13第四步：求标示量(百分)测定方法Why?化学与制药工程学院化学与制药工程学院30302021/9/132021/9/13第四步：求标示量测定方法这是因为标示量是以这是因为标示量是以效价效价的形式存在的的形式存在的化学与制药工程学院化学与制药工程学院31312021/9/132021/9/13第四步：求标示量测定方法测定含量测定含量单位质量单位质量1

17、g对应的效价对应的效价效价占单位样品效价占单位样品质量的百分比质量的百分比效价占单位质效价占单位质量的百分比量的百分比经过变形可得下式经过变形可得下式化学与制药工程学院化学与制药工程学院32322021/9/132021/9/13第四步：求标示量测定方法这是因为标示量是以这是因为标示量是以效价效价的形式存在的的形式存在的化学与制药工程学院化学与制药工程学院33332021/9/132021/9/13二、第一法纯度高的纯度高的VitA acetate测定方法合成 Vit A天然鱼肝油max应为应为328nm。若maxmax不在326329nm之间，则不能用本法测定，改为第二法计算计算，选择，选择

18、AA值的选择值的选择测量吸光度测量吸光度判断判断化学与制药工程学院化学与制药工程学院34342021/9/132021/9/13测定方法A.若若【(A/A328nm)-)-规定值规定值】(0.02)A328不校正不校正B.若若【(A/A328nm)-)-规定值规定值】有超过有超过(0.02)者者A328(校正校正)=3.52(2A328-A316-A340)A A328328不校正不校正A=AA=A328328校正校正第二法第二法化学与制药工程学院化学与制药工程学院35352021/9/132021/9/13测定方法三、第二法VitA alcohol皂化法 6/7法 样品前处理样品前处理酯 乙

19、醚提取VA醇，洗涤，过滤异丙醇溶解残渣在 300，310，325，334nm处分别测Aimax应为应为325nm。若maxmax不在323327nm之间，则供试品中杂质含量过高，改为色谱法将未皂化部分纯化后进行测定。计算计算，选择，选择A化学与制药工程学院化学与制药工程学院36362021/9/132021/9/13测定方法A.若若(A300/A325)0.73A A325325不校正不校正A=AA=A325325校正校正A325(校正校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334B.若若(A300/A325)0.73色谱法纯化后再测化学与制药工程学院化学与制药工程学院37

20、372021/9/132021/9/13测定方法应用示例一VitAD胶丸中VitA的含量测定精密称取本品精密称取本品(规格规格10,000VitAIU/10,000VitAIU/丸丸)装量差异项下（平均装量装量差异项下（平均装量0.07985g/0.07985g/丸）的内容物丸）的内容物 0.1287g 0.1287g 至至50ml50ml量瓶中，用环己烷稀量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml2.0ml，置另一，置另一50 ml50 ml量瓶中，用环量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测

21、定最大吸收波长为为328nm328nm，并在下列波长处测得吸收度如下，计算，并在下列波长处测得吸收度如下，计算Vit AVit A的标示的标示量百分含量。量百分含量。化学与制药工程学院化学与制药工程学院38382021/9/132021/9/13测定方法A=A328校正校正化学与制药工程学院化学与制药工程学院39392021/9/132021/9/13测定方法化学与制药工程学院化学与制药工程学院40402021/9/132021/9/13测定方法应用示例二称取称取Vit AVit A滴剂滴剂0.1082g(0.1082g(标示量标示量50 000I.U./g)50 000I.U./g)，加环已

22、烷至，加环已烷至50.0ml50.0ml，取出，取出5.0ml5.0ml置于另一置于另一50 ml50 ml量瓶中，加环已烷至刻度，量瓶中，加环已烷至刻度，摇匀后置石英比色皿中，以环已烷为空白，分别于以下波长处摇匀后置石英比色皿中，以环已烷为空白，分别于以下波长处测得相应的吸收度值，试求此滴剂中测得相应的吸收度值，试求此滴剂中Vit AVit A的标示量百分率：的标示量百分率：化学与制药工程学院化学与制药工程学院41412021/9/132021/9/13A=A328校正校正测定方法化学与制药工程学院化学与制药工程学院42422021/9/132021/9/13测定方法化学与制药工程学院化学与

23、制药工程学院43432021/9/132021/9/13第一节 VitA(二)HPLCRF-HPLC同时测定人血清中Vit A和Vit E含量色谱条件 色谱柱：C18 流动相：甲醇-水 流速：1.2ml/min 检测波长与AUFS：08min(330nm,0.25AUFS);8min后(292nm,0.05AUFS)内标：Vit A 酯Vit AVit E化学与制药工程学院化学与制药工程学院44442021/9/132021/9/13(三)三氯化锑比色法第一节 VitAmax 618nm620nm缺点缺点呈色不稳定呈色不稳定（5 10s内）内）水分干扰水分干扰与标准曲线温差与标准曲线温差1专属

24、性差专属性差三氯化锑有腐蚀性三氯化锑有腐蚀性化学与制药工程学院化学与制药工程学院45452021/9/132021/9/13习题习题1.药典中的杂质检查按照操作方法不同可分为下列三种类型 对照法、灵敏度法、比较法。化学与制药工程学院化学与制药工程学院46462021/9/132021/9/13习题习题2.药物中存在的杂质，主要来源于两个方面，即 和 。化学与制药工程学院化学与制药工程学院47472021/9/132021/9/13习题习题3.药物中微量的氯化物在 酸性条件下与 反应，生成氯化银的胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的标准氯化钠溶液（浓度为 ）在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判断

25、供试品中氯化物是否符合限量规定。化学与制药工程学院化学与制药工程学院48482021/9/132021/9/13习题习题4.巴比妥类药物具有的特性为：A.弱碱性 B.弱酸性 C.易与重金属离子络合D.易水解 E.具有紫外特征吸收 化学与制药工程学院化学与制药工程学院49492021/9/132021/9/13习题习题5.苯巴比妥钠与铜盐的鉴别反应生成物为:A.紫色 B.绿色 C.蓝色 D.黄色 E.紫堇色 化学与制药工程学院化学与制药工程学院50502021/9/132021/9/13习题习题6巴比妥类药物在吡啶溶液中与铜吡啶试液作用，生成配位化合物，显绿色的药物是:A.苯巴比妥 B.异戊巴比

26、妥 C.司可巴比妥 D.巴比妥 E.硫喷妥钠 化学与制药工程学院化学与制药工程学院51512021/9/132021/9/13习题习题7.巴比妥类药物的鉴别方法有:A.与钡盐反应生成白色化合物B.与镁盐反应生成红色化合物C.与银盐反应生成白色沉淀D.与铜盐反应生成有色产物E.与氢氧化钠反应生成白色沉淀 化学与制药工程学院化学与制药工程学院52522021/9/132021/9/13习题习题8.于Na2CO3溶液中加AgNO3试液，开始生成白色沉淀经振摇即溶解，继续加AgNO3试液，生成的沉淀则不再溶解，该药物应是:A.盐酸可待因 B.咖啡因 C.新霉素 D.维生素C E.苯巴比妥化学与制药工程

27、学院化学与制药工程学院53532021/9/132021/9/13习题习题9.与NaNO2H2SO4反应生成橙黄至橙红色产物的药物是:A.苯巴比妥 B.司可巴比妥 C.巴比妥 D.硫喷妥钠 E.硫酸奎宁 化学与制药工程学院化学与制药工程学院54542021/9/132021/9/13习题习题10.银量法测定苯巴比妥钠含量时,若用自身指示法来判断终点,样品消耗标准溶液的摩尔比应为:A.1:2 B.2:1 C.1:1 D.1:4 E.以上都不对 化学与制药工程学院化学与制药工程学院55552021/9/132021/9/13习题习题11.用酸量法测定巴比妥类药物含量时，适用的溶剂为:A.碱性 B.

28、水 C.酸水 D.醇水 E.以上都不对 化学与制药工程学院化学与制药工程学院56562021/9/132021/9/13第二节第二节第二节第二节 VitBVitB亦称盐酸硫胺亦称盐酸硫胺,具有维持糖代谢及神经传具有维持糖代谢及神经传导与消化的正常功能，主要用于治疗脚导与消化的正常功能，主要用于治疗脚气病、多发性神经炎和胃肠道疾病气病、多发性神经炎和胃肠道疾病氨基嘧啶环氨基嘧啶环噻唑环噻唑环亚甲基亚甲基季铵季铵化学与制药工程学院化学与制药工程学院57572021/9/132021/9/13第二节第二节第二节第二节 VitBVitB性质性质噻唑环噻唑环溶解性溶解性季铵季铵干燥品在空气中迅速吸收干燥

29、品在空气中迅速吸收4%的水分。的水分。在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中不溶，水溶液呈酸性中不溶，水溶液呈酸性化学与制药工程学院化学与制药工程学院58582021/9/132021/9/13第二节第二节第二节第二节 VitBVitB性质性质硫色素反应硫色素反应噻唑环在碱性介质中可开环，再与噻唑环在碱性介质中可开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素，等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素，后者溶于正丁醇中呈蓝色荧光后者溶于正丁醇中呈蓝色荧光化学与制药工程学院化学与制药工程学院59592021/9/132021/

30、9/13第二节第二节第二节第二节 VitBVitB性质性质分子中具有两个杂环，分子中具有两个杂环，可与某些生物碱沉淀试可与某些生物碱沉淀试剂如碘化钾、三硝基苯剂如碘化钾、三硝基苯酚、碘溶液、硅钨酸反酚、碘溶液、硅钨酸反应生成恒定的沉淀应生成恒定的沉淀紫外吸紫外吸收特性收特性化学与制药工程学院化学与制药工程学院60602021/9/132021/9/13第二节第二节第二节第二节 VitBVitB性质性质维生素维生素B1为盐酸盐，可为盐酸盐，可呈氯化物的鉴别反应呈氯化物的鉴别反应氯化物氯化物的特征的特征化学与制药工程学院化学与制药工程学院61612021/9/132021/9/13第二节 VitB

31、一、Identification1.硫色素荧光反应为维生素B1所特有NaOHH2O化学与制药工程学院化学与制药工程学院62622021/9/132021/9/13环合O2H硫色素Thiochtome溶于丁醇，显蓝色荧光第二节 VitB化学与制药工程学院化学与制药工程学院63632021/9/132021/9/13第二节 VitB取本品约取本品约5mg5mg，加，加NaOH T.S.2.5mlNaOH T.S.2.5ml溶解后，加溶解后，加铁氰化钾铁氰化钾 T.S.T.S.0.5ml0.5ml与与正丁醇正丁醇5ml5ml，强力振摇，强力振摇2min2min，放置使分层，上层显强烈，放置使分层，上

32、层显强烈的蓝色荧光；加酸使呈酸性，荧光即消失；再加碱使呈碱性，的蓝色荧光；加酸使呈酸性，荧光即消失；再加碱使呈碱性，荧光又重现。荧光又重现。方法方法化学与制药工程学院化学与制药工程学院64642021/9/132021/9/13第二节 VitB沉淀反应沉淀反应维生素维生素B1与碘化汞钾生成淡黄色沉淀与碘化汞钾生成淡黄色沉淀B.H2HgI4维生素维生素B1与苦酮酸生成扇形白色结晶与苦酮酸生成扇形白色结晶维生素维生素B1与碘生成红色沉淀与碘生成红色沉淀B.HI.I2维生素维生素B1与硅钨酸反应生成白色沉淀与硅钨酸反应生成白色沉淀B2.SiO2(OH)2.12WO3.4H2O化学与制药工程学院化学与

33、制药工程学院65652021/9/132021/9/13氯化物反应氯化物反应本品是盐酸盐本品是盐酸盐,水溶液呈氯化物的鉴别反应水溶液呈氯化物的鉴别反应硫元素反应硫元素反应化学与制药工程学院化学与制药工程学院66662021/9/132021/9/13红外分光光度法红外分光光度法本品本品对照品对照品对照对照化学与制药工程学院化学与制药工程学院67672021/9/132021/9/13第二节 VitB三、含量测定u 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 (Non-aqueous Titrimetry)u 紫外分光光度法紫外分光光度法 (UV)u 硫色素荧光法硫色素荧光法 (Thiochrone Fluo

34、remetry)化学与制药工程学院化学与制药工程学院68682021/9/132021/9/13第二节 VitB三、含量测定非水滴定法原理非水滴定法原理维生素维生素B1分子中含有两个碱性的已成盐分子中含有两个碱性的已成盐的伯胺和季铵基团的伯胺和季铵基团,在非水溶液中均可与在非水溶液中均可与高氯酸作用高氯酸作用,以电位指示终点以电位指示终点.根据消耗根据消耗的高氯酸量即可算出维生素的高氯酸量即可算出维生素B1的含量的含量.化学与制药工程学院化学与制药工程学院69692021/9/132021/9/13第二节 VitB1.Non-aqueous Titrimetry喹那啶红亚甲蓝喹那啶红亚甲蓝 （

35、紫红（紫红天蓝）天蓝）化学与制药工程学院化学与制药工程学院70702021/9/132021/9/13第二节 VitB紫外分光光紫外分光光度法原理度法原理维生素维生素B1分子中含有共轭分子中含有共轭双键结构双键结构,在紫外区有吸收在紫外区有吸收,根据最大吸收波长处的吸根据最大吸收波长处的吸光度即可以计算含量光度即可以计算含量.化学与制药工程学院化学与制药工程学院71712021/9/132021/9/13第二节 VitB2.UV10.1M HCl2H203H3PO4 buffer4alcohol246232255化学与制药工程学院化学与制药工程学院72722021/9/132021/9/13第

36、二节 VitB3.Thiochrone FluoremetryVitB1铁氰化钾铁氰化钾NaOH硫色素异丁醇异丁醇荧光ex-365nmem-435nm+NaOH+铁氰化钾铁氰化钾+异丁醇异丁醇+NaOH+异丁醇异丁醇对照液对照液+NaOH+铁氰化钾铁氰化钾+异丁醇异丁醇+NaOH+异丁醇异丁醇供试液供试液SdAb硫色素荧光法硫色素荧光法化学与制药工程学院化学与制药工程学院73732021/9/132021/9/13第三节 VitC612345烯二醇结构共轭酸性强酸性弱内酯结构化学与制药工程学院化学与制药工程学院74742021/9/132021/9/13第三节 VitC一、主要性质 溶解性 酸

37、性 旋光性 还原性L-抗坏血酸(有生物活性)L-L-二酮古罗二酮古罗糖酸糖酸L-去氢抗坏血酸无生物活性化学与制药工程学院化学与制药工程学院75752021/9/132021/9/13第三节 VitC 水解性 糖类性质50 UV化学与制药工程学院化学与制药工程学院76762021/9/132021/9/13第三节 VitC二、鉴别1.与AgNO3反应2.与2,6-二氯靛酚反应氧化型氧化型还原型还原型酸式色碱式色3.与氧化剂反应化学与制药工程学院化学与制药工程学院77772021/9/132021/9/13第三节 VitC4.与糖类反应H2O-CO2戊糖-3H2O糠醛50蓝色其它还有薄层其它还有薄

38、层色谱法色谱法,百分吸百分吸收系数法收系数法化学与制药工程学院化学与制药工程学院78782021/9/132021/9/13杂质检查杂质检查v溶液的澄清度与颜色检查溶液的澄清度与颜色检查v维生素维生素C长期贮存会被氧化变色长期贮存会被氧化变色,因而应通过此项因而应通过此项检查控制其纯度检查控制其纯度.v铁与铜离子的检查铁与铜离子的检查v维生素维生素C中可能存在一些铁与铜离子中可能存在一些铁与铜离子,因而可以采因而可以采用标准添加对照法进行检查用标准添加对照法进行检查.v草酸的检查草酸的检查v一般加一般加CaCl2形成草酸钙对测定其浊度形成草酸钙对测定其浊度.化学与制药工程学院化学与制药工程学院

39、79792021/9/132021/9/13三、含量测定(强还原性)第三节 VitC1.碘量法取本品约取本品约0.2g0.2g，精密称定，加，精密称定，加新沸过的冷水新沸过的冷水100ml100ml与与稀醋酸稀醋酸10ml10ml使溶解，加使溶解，加淀粉指示液淀粉指示液1ml1ml，立即立即用碘滴用碘滴定液（定液（0.05mol/L0.05mol/L）滴定，至溶液显）滴定，至溶液显蓝色蓝色，在，在3030秒内秒内不褪。每不褪。每1ml1ml碘滴定液碘滴定液(0.05mol/L)(0.05mol/L)相当于相当于8.806mg8.806mg的的C C6 6H H8 8O O6 6化学与制药工程学

40、院化学与制药工程学院80802021/9/132021/9/132.2,6-二氯靛酚滴定法第三节 VitC快速滴定，用于含Vit C的制剂与食品分析3.HPLC人血浆中人血浆中Vit C浓度的浓度的HPLC法测定法测定化学与制药工程学院化学与制药工程学院81812021/9/132021/9/13第三节 VitC标准溶液制备：取取V CV C对照品约对照品约25mg25mg，精密称定，置，精密称定，置25ml25ml量瓶中，量瓶中，加加10%10%偏磷酸偏磷酸稀释至刻度，得维生素稀释至刻度，得维生素C C储备液浓度为储备液浓度为1mg/ml1mg/ml，置，置冰冰箱中箱中22保存保存，3 3日

41、内可用日内可用。血浆样品预处理：取受试者静脉血，立即置肝素化的离心试管取受试者静脉血，立即置肝素化的离心试管中，中，3000rpm3000rpm离心离心5min5min；取血浆取血浆0.5ml0.5ml，加入，加入0.5ml 10%0.5ml 10%偏磷酸溶液，偏磷酸溶液，涡旋混合涡旋混合0.5min0.5min，离心，分取上清液，置冰箱，离心，分取上清液，置冰箱22贮存，直至测定。贮存，直至测定。稳定性考察：V CV C在血浆中不稳定，在在血浆中不稳定，在5%5%偏磷酸溶液中也难以保偏磷酸溶液中也难以保持长期稳定，应尽可能缩短药物分离和处理时间。持长期稳定，应尽可能缩短药物分离和处理时间。样

42、品测定：每天抽取的血样应每天抽取的血样应当日测定当日测定，每天建立一条标准曲，每天建立一条标准曲线，并随行测定高、中、低浓度的双样本质控样品。线，并随行测定高、中、低浓度的双样本质控样品。化学与制药工程学院化学与制药工程学院82822021/9/132021/9/13第四节 Vit D胆甾醇7-脱氢胆甾醇维生素 D3维生素 D2麦角甾醇甾醇衍生物甾醇衍生物化学与制药工程学院化学与制药工程学院83832021/9/132021/9/13第四节 Vit D 维生素维生素D2 维生素维生素D3 溶解性溶解性:在三氯甲烷中极易溶解在三氯甲烷中极易溶解,在丙酮乙醇乙醚中易溶在丙酮乙醇乙醚中易溶.不稳定性

43、不稳定性:双键极不稳定双键极不稳定,易氧化变色易氧化变色,毒性增强毒性增强.旋光性旋光性:有五到六个手性碳原子有五到六个手性碳原子,均具有旋光性均具有旋光性.显色反应显色反应:在三氯甲烷在三氯甲烷+醋酐醋酐+硫酸会从黄到紫再到绿色硫酸会从黄到紫再到绿色.紫外吸收紫外吸收:具有吸收基团具有吸收基团化学与制药工程学院化学与制药工程学院84842021/9/132021/9/13第四节 Vit D二、鉴别显色反应显色反应:三氯甲烷三氯甲烷+醋酐醋酐+硫酸硫酸三氯甲烷三氯甲烷+三氯化锑三氯化锑三氯化铁三氯化铁=橙黄色橙黄色初显黄色初显黄色逐渐变红逐渐变红迅即变紫迅即变紫最后变绿最后变绿溶液显橙溶液显橙

44、红色红色,逐渐逐渐变粉红色变粉红色二氯丙醇二氯丙醇和乙酰氯和乙酰氯=绿色绿色化学与制药工程学院化学与制药工程学院85852021/9/132021/9/13第四节 Vit D二、鉴别比旋度鉴别比旋度鉴别测定比旋度测定比旋度进行鉴别进行鉴别其它鉴别法其它鉴别法TLCHPLC熔点熔点UVIR等等化学与制药工程学院化学与制药工程学院86862021/9/132021/9/13第四节 Vit D三、杂质检查1 1、麦角醇的检查、麦角醇的检查9090乙醇溶解后，加洋地黄皂苷溶液，放置乙醇溶解后，加洋地黄皂苷溶液，放置18h18h，不得发生浑浊。不得发生浑浊。2 2、前维生素、前维生素D D的光照产物的光

45、照产物280nm320nm化学与制药工程学院化学与制药工程学院87872021/9/132021/9/13第四节 Vit DCh.P 2010NP-HPLC含量测定含量测定USP34-NF29化学化学法法色谱色谱法法微生微生物法物法BP2010化学化学法法色谱色谱法法光谱光谱法法化学与制药工程学院化学与制药工程学院88882021/9/132021/9/13u 固定相：硅胶硅胶u 流动相：正己烷正戊醇（正己烷正戊醇（997：3）u 检测波长：254nm第一法：用于无维生素A醇及其他干扰的供试品第二法：(1)皂化提取;(2)净化用色谱柱系统分离收集维生素D，得供试品溶液B;(3)按第一法进行测定

46、。第三法：当样品经皂化提取及净化用色谱系统分离收集后，前维生素D峰仍受干扰时，采用此法。第四节 Vit D化学与制药工程学院化学与制药工程学院89892021/9/132021/9/13第五节 Vit ER1R2苯并二氢吡喃醇Vit E(dl-Tocopheryl Acetate)Synthetic Natural化学与制药工程学院化学与制药工程学院90902021/9/132021/9/13苯并二氢吡喃环苯并二氢吡喃环+饱和烃链饱和烃链第五节 Vit Ep 溶解性p 水解性p 氧化性p 紫外吸收二、鉴别1.1.硝酸反应硝酸反应生育酚生育酚HNO3（橙红色）（橙红色）生育红生育红化学与制药工程

47、学院化学与制药工程学院91912021/9/132021/9/13第五节 Vit E2.2.三氯化铁反应三氯化铁反应生育酚生育酚O对对-生育醌生育醌3.UV 0.01%无水乙醇中，max=284nm，min=254nm化学与制药工程学院化学与制药工程学院92922021/9/132021/9/13第五节 Vit E4.4.三氯化铁反应三氯化铁反应薄层板薄层板 硅胶硅胶G展开剂展开剂 环己烷环己烷-乙醚（乙醚（4 ：1）显色剂显色剂 硫酸（硫酸（105 5）VitE Rf =0.7化学与制药工程学院化学与制药工程学院93932021/9/132021/9/13第五节 Vit E三、杂质检查1.酸

48、度2.生育酚取取Vit E 0.1g，加无水乙醇，加无水乙醇5ml溶溶解后，加二苯胺解后，加二苯胺T.S.1滴，用硫滴，用硫酸鈰滴定液酸鈰滴定液(0.01mol/L)滴定，滴定，消耗硫酸鈰滴定液消耗硫酸鈰滴定液(0.01mol/L)不得过不得过1.0ml化学与制药工程学院化学与制药工程学院94942021/9/132021/9/13第五节 Vit E四、含量测定载气载气N2固定液固定液硅酮（硅酮（OV-17）担体担体硅藻土或高分子多孔小球硅藻土或高分子多孔小球柱温柱温265检测器检测器氢火焰离子化检测器氢火焰离子化检测器(FID)内标内标正三十二烷正三十二烷 n 500 R21.GCCh.P2

49、4.40内标14.54VEUSP 内标内标 十六酸十六醇酯十六酸十六醇酯 R1.0化学与制药工程学院化学与制药工程学院95952021/9/132021/9/13内标液 取正三十二烷加正己烷溶解并稀释成取正三十二烷加正己烷溶解并稀释成1.0mg/ml溶液溶液对照液 精密称取精密称取VitE对照品对照品0.2011g置棕色具塞锥形瓶中，精置棕色具塞锥形瓶中，精密加入内标液密加入内标液10ml，密塞，振摇使溶解，取，密塞，振摇使溶解，取 13l注入注入GC仪，仪，测定，计算校正因子测定，计算校正因子供试液 精密称取供试品精密称取供试品0.1998g置棕色具塞锥形瓶中，精密加置棕色具塞锥形瓶中，精密

50、加入内标液入内标液10ml，密塞，振摇使溶解，取，密塞，振摇使溶解，取13l注入注入GC仪，测定，仪，测定，计算含量。计算含量。已知：对照液测得已知：对照液测得A对对=297456，A内内=797469；供试液测得供试液测得A样样=296513，A内内=805741;第五节 Vit E本品含本品含C31H52O3应为应为96.0 102.0%化学与制药工程学院化学与制药工程学院96962021/9/132021/9/13第五节 Vit E化学与制药工程学院化学与制药工程学院97972021/9/132021/9/13第五节 Vit E2.HPLCJP样品样品 dl生育酚生育酚固定相固定相十八烷