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1、,检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质,一、实验原理,还原糖 ,蛋白质 ,脂肪 ,砖红色沉淀,橘黄色,红色,紫色,淀粉 + 碘蓝色,水浴加热，50-65,二. 实验步骤,1。还原糖的检测选材:还原糖含量较高、颜色为 的植物组织或器官,如 、 。,白色或无色,苹果,梨,（2）还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖 注：蔗糖、淀粉不是还原糖,注意：（1）材料不能用西瓜汁、西红柿等，虽然含糖高，但有颜色，会影响实验结果。,（3）斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液 配制方法：甲液与等量乙液等量混匀，且现配现用。（甲液和乙液不稳定，需分别配制、储存）,可溶
2、性还原糖与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O沉淀。CH2OH(CHOH)4CHO+2Cu(OH)2 CH2OH(CHOH)4COOH+ Cu2O+ 2H2O（葡萄糖） （浅蓝色） （葡萄糖酸） （砖红色） 即：还原糖中的醛基（CHO）被Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原成砖红色的Cu2O沉淀,2. 实验步骤,结论:组织样液中含有,选材,砖红色沉淀,还原糖,浅蓝色,水浴加热前后的颜色变化：,棕色,砖红色,若不加热，试管A、B中的是颜色的？,若溶液中没有还原糖，试管A、B中的是颜色的？,2ml,(1ml),还原糖检测实验的实验结果,注意:加热时试管底部不要接触烧杯底部,同时试管口不要
3、朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。,2 脂肪的检测选材:最好选富含的生物组织,如花生。使用前可提前浸泡34 h,以便于。,脂肪,切片,取材和切片:花生种子(浸泡,去掉种皮),将子叶切成薄片制片,取最薄的切片，放在载玻片中央滴23滴 染液（染色3min）去浮色（12滴体积分数为50%的酒精溶液洗去浮色。）制成临时装片（滴1滴蒸馏水，盖上盖玻片）,苏丹,（原因:苏丹易溶于酒精中）,观察:先低倍镜,再高倍显微镜观察，视野中被染成（ ） 的脂肪颗粒清晰可见结论:说明花生种子中有存在,橘黄色,脂肪,蛋白质的检测,A液1mlB液4滴,（1）选材：鸡蛋清（必须稀释）、大豆。（2）试剂：双缩
4、脲试剂 A液：0.1g/mL的NaOH溶液， B液：0.01g/mL的CuSO4溶液 （3）步骤： 试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL（造成碱性环境），摇匀加双缩脲试剂B液4滴，摇匀观察颜色变化（紫色） 注：样液浓度不宜过高，以免与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上,使反应不彻底,试管也不易洗刷干净。 B液不能过量，多余的B液会与A液反应成蓝色，而掩盖生成的紫色。,蛋白质的鉴定原理：,蛋白质分子中含有很多肽键（含二个肽键即可），在碱性溶液（即A液可造成碱性环境）中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色络合物。,注意：多肽也能与双缩脲试剂发生紫色反应，所以能与双缩脲试剂发生紫色反应的
5、不一定是蛋白质。,比较斐林试剂和双缩脲试剂,0.1g/mL的NaOH溶液,0.1g/mL的NaOH溶液,0.01g/mL的CuSO4溶液,0.05g/mL的CuSO4溶液,还原性糖,蛋白质,甲液和乙液等量混合均匀后再加入,先加双缩脲试剂A液1mL，摇匀，再加双缩脲试剂B液4滴,50-65水浴加热,砖红色沉淀,紫色络合物,不需加热，摇匀即可,还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化， Cu(OH)2被还原成Cu2O,具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物,实验室中没有双缩脲试剂，有斐林试剂，能做蛋白质的鉴定实验吗?,能，实际实验中可以用斐林试剂，通过蒸馏水稀释CuSO4配制双缩脲
6、试剂，或通过减少斐林试剂乙液的用量进行蛋白质的鉴定。,课堂练习,1、用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液颜色的变化过程是（ ）A、无色砖红色（沉淀）B、浅蓝色砖红色（沉淀） C、浅蓝色蓝色砖红色（沉淀） D、浅蓝色棕色砖红色（沉淀）,D,2、在用双缩尿试剂鉴定蛋白质实验时，正确的操作是（ ） A、2ml蛋白质稀释液先加0.1g/ml的NaOH，再加4滴0.01 g/ml CuSO4溶液。 B、 2ml蛋白质稀释液先加4滴0.01 g/ml CuSO4溶液，再加0.1g/ml的NaOH C、2ml蛋白质稀释液，同时加4滴0.01 g/ml CuSO4和0.1g/ml的NaOH 混合液。 D、在Na
7、OH和 CuSO4混合液中加入蛋白质稀释液。,A,3、用苏丹染液对脂肪组织进行染色时，可用来冲洗浮色的药品是（ ） A、HCL； B、H2 O； C、50%的酒精； D、无水酒精。,C,4、下列哪个实验可能用到显微镜（ ）A、可溶性还原糖的鉴定；B、蛋白质的鉴定；C、脂肪的鉴定；D、淀粉的鉴定。,C,5、下列哪种试剂在使用过程中，必须经过加热（ ） A、斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中； B、苏丹 在鉴定动物组织中的脂肪时； C、双缩尿试剂鉴定蛋白质时； D、碘化钾溶液鉴定淀粉时。,A,6、下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是（ ）A、淀粉； B、果糖；C、蔗糖； D、纤维素。,B,7.
8、(2019海南卷，6)下列检测生物分子的实验中，关于颜色变化的叙述错误的是()A.淀粉遇碘液可显蓝色B.葡萄糖与斐林试剂反应呈砖红色C.蛋白质与双缩脲试剂反应显紫色D.脂肪被苏丹染液染成橘黄色,D,8.下图为鉴定蛋白质的流程图，其中甲、乙、丙、丁的含义分别是,A.黄豆浆、双缩脲、1 mL、4滴B.花生种子研磨液、双缩脲、 4滴、1 mLC.黄豆浆、双缩脲、4滴、1 mLD.花生种子研磨液、斐林试剂、 1 mL、4滴,A,9下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是 ( ) (A)用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 (B)脂肪的鉴定实验中需要用显微镜才能看到被染成桔黄色
9、的脂肪粒。 (C)鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液 (D)用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后再加入含样品的试管中，且必须现配现用,B,10将面团包在纱布中在清水中搓洗，鉴定黏留在纱布上的黏稠物质和洗出的白浆用的试剂分别是( ) （A)碘液苏丹染液 （B)双缩脲试剂，碘液 （C)亚甲基蓝溶液、苏丹染液 （D)碘液、斐林试剂,B,11某学生在显微镜下观察落花生种叶的切片，当转动细准焦螺旋时，有一部分细胞看得清晰另一部分细胞较模糊，这是由于 ( ) （A)反光镜未调节好 （B)标本切得厚薄不均 （C)细准焦螺旋未调节好 ( D)显微镜物镜损坏,B,12以下关于实
10、验的描述中,正确的是 A.西瓜汁中含有丰富的葡萄糖和果糖,可用作还原糖鉴定的替代材料B.用于鉴定还原糖的斐林试剂甲液和乙液浓缩一下可用于蛋白质的鉴定C.在做脂肪的鉴定实验时,发现满视野都呈现橘黄色,于是滴12滴质量分数为50%的盐酸洗去多余的染料D.在稀释的蛋清液中加入双缩脲试剂,振荡摇匀,可看到溶液变为紫色,D,13医学上对糖尿病患者进行辅助检测所需化学试剂是双缩脲试剂。()14脂肪、蛋白质鉴定时分别可见橘黄色颗粒、砖红色沉淀。(),152019临川月考现提供可配制斐林试剂的溶液：甲液(0.1 g/mL的NaOH溶液)、乙液(0.05 g/mL的CuSO4溶液)以及蒸馏水，如果充分利用上述试剂及必需的实验用具，可灵活地鉴别出下列哪些物质()葡萄糖蔗糖胃蛋白酶RNAA只有B和C和 D、和,C,162019大庆模拟关于生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验，下列叙述正确的是()A鉴定还原糖、蛋白质都需要进行水浴加热B实验结束时将剩余的斐林试剂装入棕色瓶，以便长期使用C用苏丹鉴定花生组织中是否含有脂肪成分时，实验结果肯定可见橘黄色颗粒D当实验试剂中提供了斐林试剂甲液、乙液和蒸馏水时，不但可以检验还原糖，也可以鉴定蛋白质,D,