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1、第36讲克隆技术1下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是()不同种植物叶肉细胞融合时，应先去掉细胞膜叶肉细胞脱分化后，可形成无定形状态的薄壁细胞叶肉细胞经过再分化过程，可形成愈伤组织叶肉细胞离体培养时，可以表现出细胞全能性A BC D22012浙江模拟下列有关高等植物原生质体制备和培养的叙述，正确的是()A纤维素酶和果胶酶混合液可用于制备悬浮培养细胞的原生质体 B加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保护纤维素酶和果胶酶 C从不同植物组织分离得到的原生质体大小、形状相同 D愈伤组织经原生质体培养均可得到再生植株3下列关于动物细胞培养的有关叙述中，正确的是()A细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过
2、渡过程中B动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白D动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理4动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于()A培养基不同B动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D动物细胞能够大量培养，而植物细胞不能5在生物工程中一般都要用到酶，下列酶中属于动物细胞工程最常用的工具酶的是()A限制性核酸内切酶BDNA连接酶C果胶酶D胰蛋白酶6一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用
3、途，但是不能()A有选择地繁殖某一性别的家畜B繁殖家畜中的优秀个体 C用于保存物种D改变动物的基因型72013杭州月考下列有关克隆技术的叙述，错误的是()A同种植物不同基因型个体的细胞全能性的表达程度大不相同 B长期的动物组织培养，经常只能使单一类型的细胞保存下来C肝组织经胰蛋白酶处理和悬浮培养可获得肝细胞克隆D动物细胞培养获得的连续细胞系大多数具有异倍体核型82012浙江模拟下列有关细胞培养的叙述正确的是()A动物细胞培养过程中要注意细胞分裂素和生长素的适宜比例 B植物细胞培养过程中，首先要用胰蛋白酶处理部分组织使细胞分散获得单个细胞 C动物细胞培养时，有的连续细胞系获得了不死性，但保留接触
4、抑制现象，不致癌 D用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物细胞原生质体失去了全能性9植物组织培养是克隆植物的一种方法，过程如图K361所示，回答相应的问题：图K361(1)为了获得脱毒植株，外植体往往取自植物的花芽、叶芽等处的分生组织，原因是_。(2)培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加植物激素，其目的是诱导外植体_。(3)在生产实践中为获得大量的细胞产物如：紫杉醇，可将_放入液体培养基中，经机械作用分散成单个细胞，制备成细胞悬浮液，再经过_即可获得大量细胞。(4)组织培养过程需要植物生长和繁殖的最适条件，否则在光学显微镜下可能观察到发生_异常，进而使植物出现遗传不稳定甚至不育。(5)植物
5、组织培养技术不仅应用于花卉、果树的快速、大量繁殖以及脱毒植株的获取，还广泛用于_、_、_等育种过程中。102012太原模拟 如图K362所示为培育农作物新品种的过程示意图。请回答：图K362(1)图示育种过程涉及的生物工程技术有植物体细胞杂交技术、_、_等。(2)图中从愈伤组织到形成完整的新品种植株的途径有两条，具体通过哪条途径主要取决于培养基中的_的种类及其浓度配比。(3)若仅用二倍体植物甲的未成熟花粉培养完整植株，称为_植株，说明未成熟花粉具有_；这些植株只有通过_才能结实。(4)若要从大量培养的紫草愈伤组织中提取紫草素，则_条件是不需要的。A消毒灭菌 B充足光照C适宜温度 D适宜养料和激
6、素(5)用植物组织培养制作的人工种子，可解决有些作物品种的_等问题(至少答出两点)。11回答下列与动物细胞培养有关的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是
7、_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在_条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，细胞_的速率降低。(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作_进行攻击。122012沈阳二模 科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(图K363所示)，请结合图示回答下列问题：图K363(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理，形成单个细胞，这个过程中需要利用_酶处理。(2)
8、形成重组细胞时应选用_期的卵母细胞，去掉其细胞核的原因是_。(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_和_等特点。(4)图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛100 %的复制，其主要原因是_、_。(5)上图中所示的生物技术整体被称为_。其包括的具体生物技术有_、_等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物_具有全能性。132012衢州模拟基因型为AaBb的水稻(含24条染色体)的花药通过无菌操作接入试管后在一定条件下形成试管苗。(1)愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得_和小分子有机物等营养物质。(2)花药在培养基所提供的特定条件下发
9、生多次分裂，形成愈伤组织，此过程叫_，细胞分裂的方式是_。(3)诱导愈伤组织分化出芽和根，最后长出植株。这个过程叫_。该植物是_植物，其特点是_，生产上没有推广应用价值。(4)要促进花粉细胞分裂生长的培养基中应有_和_两类激素。(5)愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照，其原因是：_；_。(6)试管苗的细胞核中含_个DNA分子。 (7)培育成的试管苗可能出现的基因型有_。1B解析 应先去掉细胞壁；脱分化形成愈伤组织，故错。2A解析 植物的细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故A正确；加入0.6 mol/L甘露醇的目的是保护植物细胞去除细胞壁后获得的原生质体；从
10、不同植物组织分离得到的原生质体大小不同，形状都是球型。3D解析 细胞的癌变一般是在多次传代培养后才会发生；动物细胞培养液中不需要加入生长素，生长素是植物组织培养中使用的植物激素；在动物细胞培养中，可以获得细胞或者细胞代谢产物；在动物细胞培养前先要用胰蛋白酶处理，使得组织分散成细胞悬浮液进行培养，在传代过程中也要用胰蛋白酶处理，使细胞从培养瓶上脱离下来进行分装。4A解析 动物细胞培养所用的培养基是液体培养基，其中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。而植物细胞培养所用的培养基是固体培养基，通常含有水、矿质元素、激素、蔗糖、氨基酸、琼脂等。可见，动物细胞培养所用的培养基与植物细胞培养
11、的培养基是不相同的。5D解析 基因工程用到的是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；植物体细胞杂交技术用到的是纤维素酶和果胶酶；动物细胞工程用到的是胰蛋白酶，它的作用是使动物组织中的细胞相互分散成为单个的细胞，便于在液体培养基中培养。6D解析 核移植得到的子代，细胞核中的遗传物质与供核亲代完全相同，该技术不能用于改变动物的基因型。7C解析 获得细胞克隆的最基本要求是：必须保证分离出的细胞是一个而不是多个，即必须肯定所建立的克隆来源于单个细胞，故C错误。8C解析 细胞分裂素和生长素用于植物组织培养过程；胰蛋白酶用于动物细胞培养的过程，处理组织使细胞分散获得单个细胞；失去细胞壁的原生质体仍保留全能性。9
12、(1)这些部位病毒极少(2)脱分化和再分化(3)愈伤组织细胞分裂(4)染色体结构与数目(5)植物体细胞杂交育种基因工程育种单倍体育种解析 (1)植物的花芽、叶芽等处的分生组织病毒极少，常被用于获得脱毒植株。(2)植物组织培养过程中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。(3)植物组织培养过程中，要获得细胞产物，只需要把外植体培养到愈伤组织阶段即可。(4)光学显微镜下可能观察到的变异类型是染色体畸变。(5)植物组织培养技术广泛应用于花卉、果树的快速繁殖以及脱毒植株的获取和植物体细胞杂交育种、基因工程育种、单倍体育种等育种过程。10(1)基因工程植物组织培养(2)植物激素(3
13、)单倍体全能性染色体数目加倍(4)B(5)多年不结种子、果实，杂种优势衰退，生产种子受到季节、气候和地域的影响，生产种子占用大量土地(答出两点即可)解析 (1)根据图示中新细胞获得的两个途径可以看出，涉及的技术有植物体细胞杂交技术和基因工程。从新细胞形成愈伤组织再到形成新品种，可以看出涉及植物组织培养。(2)愈伤组织再分化形成新植株的途径，受到植物激素的调控。可以改变植物激素的种类及浓度来进行调控。(3)花粉是减数分裂形成的，是正常体细胞染色体数目的一半，经培养获得的植株为单倍体植株。这也属于植物组织培养过程，遵循的原理是植物细胞的全能性。但是正常二倍体所产生的单倍体植株高度不育，因为体细胞内
14、的染色体成单存在，只有通过染色体数目加倍，恢复成正常的二倍体才能正常结实。(4)培养紫草的愈伤组织提取紫草素，不需要光照。(5)人工种子相比传统的种子，可解决一些问题，如：多年不结种子、果实，杂种优势衰退，生产种子受到季节、气候和地域的影响，生产种子占用大量土地等。11(1)相互接触接触抑制单层(或一层)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性降低减少(3)由于活细胞的膜具有选择透性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透性，大分子染料能够进入死细胞内而着色)(4)中(5)冷冻(或超低温、液氮)酶新陈代谢(6)抗原解析 在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象
15、，此时是单层细胞。用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来。随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞。由于活细胞的膜具选择透性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失选择透性，大分子染料能够进入死细胞内而着色。由于中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。在冷冻(或超低温、液氮)条件下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低，因此通常在此条件下保存细胞。机体把移植的皮肤组织当作抗原攻击，会发生排斥现象。12(1)胰蛋白(或胶原蛋白)(
16、2)减中使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞(或避免卵细胞中的遗传物质对后代造成干扰，其他合理答案也可)(3)细胞贴壁接触抑制(两空顺序可以颠倒)(4)生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制生物的性状还受环境因素的影响(两空顺序可以颠倒，其他合理答案可酌情给分)(5)核移植(或体细胞核移植)细胞培养胚胎移植体细胞的细胞核解析 (1)胰蛋白酶可以水解动物细胞间的蛋白质成分，使细胞相互分离。(2)利用核移植形成重组细胞时需要用发育至减中期的卵母细胞，若不对其做去核处理，重组细胞的遗传物质含量就不正常。(3)贴附性细胞表现出贴壁的特性，并且会出现接触抑制现象，故要定期用胰蛋白酶将贴壁
17、的细胞从瓶壁上分离下来。(4)重组细胞的遗传物质源于体细胞的细胞核和卵细胞的细胞质，同时环境对其表现型也有影响。13(1)水、无机盐(2)脱分化有丝分裂(3)再分化单倍体长势弱小，高度不育(4)细胞分裂素生长素(5)光是叶绿体形成的必要条件光合作用需要光(6)12(7)AB、aB、Ab、ab 解析 (1)愈伤组织不能进行光合作用，必须不断地从培养基中吸取营养。供生物细胞生活的营养物质主要有无机物(水、无机盐)和有机物(糖类、脂类、蛋白质、维生素等物质)。 (2)在植物组织培养过程中，细胞只进行有丝分裂。(3)花药离体培养得到的是单倍体，该种植株在生产上没有推广应用价值。(4)植物激素的种类很多，要促进花粉细胞分裂生长，培养基中应有细胞分裂素和生长素两大类激素。(6)单倍体是指体细胞中含有本物种配子染色体数目的个体，由水稻的基因型为AaBb可知此水稻为二倍体。已知水稻的体细胞中含有24条染色体，则单倍体细胞中含有12条染色体，12个DNA分子。(7)基因型为AaBb的水稻产生配子时，依据基因的自由组合定律，、配子各有四种，即AB、aB、Ab、ab。7