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1、-天门冬氨酸氨基转移酶测定用途:用于自动生化分析仪测定血清或血浆中AST活力。AST是常用的肝功能试验和心肌梗塞酶学指标。方法学原理:L天门冬氨酸+a酮戊二酸AST草酰乙酸+L谷氨酸草酰乙酸+NADH+H MDH L苹果酸+NAD试剂成分以及浓度: R1成 份浓 度成 份浓 度NADH0.18mmol/LLDH0.8KU/LMDH0.6KU/L-R2L门冬氨酸200mmol/L酮戊二酸12mmol/L使用方法:1.仪器要求:适用于各类自动生化分析仪或半自动生化分析仪。2.标本要求:样品为空腹新鲜血清、EDTA或肝素抗凝血浆,溶血会产生干扰。3.稳定性与保存:试剂在28避光保存可稳定一年。单试剂
2、工作液28 避光保存可稳定一周。4.基本参数: 主波长340nm标本5l反应方法速率法延滞时间90秒辅助波长410nmR1200l反应方法向 下读数时间150秒反应温度37R2100l计算因子3376(340nm/410nm,1cm光径)4118(340nm/380nm,1cm光径)5.测定方法: 加 入 物空 白 管(B)测 定 管(T)R1200l200l蒸 馏 水15l-标 本-15l混合,置37孵育35分钟。R2100l100l混合,置37孵育90秒,在主波长340 nm/辅助波长410nm下连续监测13分钟各管吸光度变化,计算DA/min. 单试剂操作:工作液配制:临用时将R1与R2
3、按2:1混合 加 入 物空 白 管(B)测 定 管(T)工 作 液300l300l蒸 馏 水15l -标 本-15l混合,置37孵育90秒,在主波长340 nm/辅助波长410nm下连续监测13分钟各管吸光度变化, 计算A/min。6.结果计算: AST活性(U/L)=(D A测定/minD A空白/min)3376(340nm/410nm,1cm光径) AST活性(U/L)=(D A测定/minD A空白/min)4118(340nm/380nm,1cm光径)7.正常参考值: 男1149U/L 女1140U/L (37) 建议各实验室建立自己的正常参考值范围注意事项:1.如果试剂变混浊或试剂
4、空白吸光度值(340nm)小于1.0,试剂已失效。2.如果标本中AST活力700U/L(30)或1000U/L(37),需用生理盐水稀释后测定,结果乘以稀释倍数。3.NADH在340nm的理论摩尔吸光吸数6.22103,计算因子最好根据实测摩尔吸光系数计算。4.试剂中不含有磷酸吡哆醛。5.用底物启动的双试剂可有效消除内源性丙酮酸和GLDH的干扰。性能特征:1.线性范围:700U/L(30);1000U/L(37)2.准 确 度:r=0.996 线性回归方程y=1.01x0.52(与相同方法商3.精 密 度:批内CV:1.83.5% 批间CV:2.23.8%-第 3 页天门冬氨酸氨基转移酶测定(AST)- IFCC法