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1、高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体现在学习的是第1页，共22页 回忆已学知识，你是否已经见到过动物细胞融合的实例？现在学习的是第2页，共22页现在学习的是第3页，共22页鼠细胞人细胞人工诱导杂交细胞动物细胞融合（技术）：是指（在一定的条件下）两个或多个细胞融合形成一个细胞的过程。现在学习的是第4页，共22页2 2、诱导融合的因素、诱导融合的因素 化学法：化学法：聚乙二醇聚乙二醇(PEG)(PEG)诱导融合诱导融合.物理法：物理法：电激电激融合融合 生物法：生物法：灭活的病毒灭活的病毒诱导诱导融合融合.病毒颗粒黏病毒颗粒黏 附细胞表面附细胞表面细胞膜连接细胞膜被细胞膜被 病毒颗粒穿通病毒颗粒
2、穿通细胞融合、形成杂种细胞 为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性但保留融合活性现在学习的是第5页，共22页获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）直接诱导细胞融合去壁原生质体融合诱导新壁杂种植株细胞膜的流动性细胞膜的流动性结果诱导方法步骤融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目获得杂交细胞现在学习的是第6页，共22页现在学习的是第7页，共22页问题问题：抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？现在学习的是第8页，共22页抗体的传统生产方法：从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差
3、。多种浆细胞动物体内多种抗体抗原 现在学习的是第9页，共22页现在学习的是第10页，共22页材料：材料：效应效应B细胞在体内只能由细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖、分淋巴细胞增殖、分化而来化而来,不再进行分裂不再进行分裂,在体外培养的条件下，也在体外培养的条件下，也很难很难分裂分裂。思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖?现在学习的是第11页，共22页杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体 既能产生特异性抗体，又能大量繁殖的细胞骨髓瘤细胞能无限增殖一个浆细胞只分泌一种特异性抗体设计方案：现在学习的是第12页，共22页读下面一段文字资料，读下面一段文字资
4、料，找出单克隆抗体的概念找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B B细胞可以产生细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B B细胞只分泌一种化学性质单细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B B细胞进行无细胞进行无性繁殖，即克隆。性繁殖，即克隆。单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念 单单:单个细胞单个细胞 克隆克隆:无性繁殖无性繁殖 单克隆单克隆抗体抗体:单个细胞克隆产生的单个细胞克隆产生的
5、化学性质单一特异性化学性质单一特异性强强的抗体的抗体现在学习的是第13页，共22页单克隆抗体的制备问题思考Q1Q2细胞两两融合后，有哪细胞两两融合后，有哪些类型？些类型？B-B;B-瘤瘤;瘤瘤-瘤瘤哪种是需要的类型哪种是需要的类型，要筛选吗？，要筛选吗？现在学习的是第14页，共22页 现在学习的是第15页，共22页单克隆抗体的制备问题思考Question经过选择培养基筛选经过选择培养基筛选的杂交瘤细胞群进行的杂交瘤细胞群进行克隆是否就得到产生克隆是否就得到产生纯度高纯度高的抗体？的抗体？还需怎么办？还需怎么办？现在学习的是第16页，共22页有限稀释法稀释多次稀释稀释 对能产生特异性抗体的单个杂
6、交瘤细胞进行克隆，即单细胞克隆。由它产生的抗体，即单克隆抗体。将培养皿孔内的上清液取出，检测抗体。多孔细胞培养板多孔细胞培养板现在学习的是第17页，共22页单克隆抗体提取提取用特定的用特定的选择培养基选择培养基4.单抗制备过程中应用了那些技术？动物细胞融合、动物细胞培养1.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？3.单克隆抗体的优点？特异性强，灵敏度高，可大量制备。2.最终从哪儿提取单克隆抗体？现在学习的是第18页，共22页（1）作为诊断试剂）作为诊断试剂最广泛应用最广泛应用准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速现在学习的是第19页，共22页2）治疗疾病和运载药物单克隆抗体的应用单克隆抗
7、体的应用疗效高、副作用小疗效高、副作用小现在学习的是第20页，共22页1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞A2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C.操作步骤基本相同 D.都能形成杂种细胞 D现在学习的是第21页，共22页3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）APEG B灭活的病毒 C电刺激 D离心B现在学习的是第22页，共22页