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1、第一页，讲稿共三十六页哦 教学目标教学目标 1、熟悉细菌在正常微生物群和条件致病微生、熟悉细菌在正常微生物群和条件致病微生物的概念物的概念 2、掌握消毒、灭菌、防腐、无菌操作的概念、掌握消毒、灭菌、防腐、无菌操作的概念以及区别以及区别 3、掌握常用消毒灭菌方法、掌握常用消毒灭菌方法第二页，讲稿共三十六页哦第一节第一节 消毒与灭菌消毒与灭菌 1、消毒、消毒：杀死物体上病原微生物的方法。：杀死物体上病原微生物的方法。（不包括（不包括细菌芽胞细菌芽胞）消毒剂：用以消毒的化学药物。消毒剂：用以消毒的化学药物。一般常用浓度，只对繁殖体有效。一般常用浓度，只对繁殖体有效。2、灭菌灭菌：杀灭物体上所有微生物
2、的方法。：杀灭物体上所有微生物的方法。（包括（包括细菌的芽孢细菌的芽孢）第三页，讲稿共三十六页哦 3、无菌无菌：物体上没有活的微生物存在。：物体上没有活的微生物存在。无菌操作无菌操作：防止微生物进入机体或物体的：防止微生物进入机体或物体的操作技术。操作技术。-外科手术、医疗技术操作及微生物实验过外科手术、医疗技术操作及微生物实验过程等均需严格的无菌操作。程等均需严格的无菌操作。4、抑菌抑菌：抑制人体内部或外部微生物生长：抑制人体内部或外部微生物生长繁殖的方法，繁殖的方法，第四页，讲稿共三十六页哦 5、防腐防腐：防止或抑制微生物生长繁殖的方法防止或抑制微生物生长繁殖的方法。防腐剂：用于防腐的化学
3、药物。防腐剂：用于防腐的化学药物。用于延长生物制品及口服制品的保存期。用于延长生物制品及口服制品的保存期。许多化学制剂在许多化学制剂在低浓度低浓度时防腐剂，在时防腐剂，在高浓度高浓度时则为消毒剂。时则为消毒剂。第五页，讲稿共三十六页哦 消毒、灭菌的方法一般可分为：消毒、灭菌的方法一般可分为：物理学方法物理学方法 热力灭菌法热力灭菌法 紫外线与电离辐射灭菌法紫外线与电离辐射灭菌法 滤过除菌法滤过除菌法 化学方法化学方法第六页，讲稿共三十六页哦 一、物理消毒灭菌法一、物理消毒灭菌法（一）热力灭菌法（一）热力灭菌法1）高压蒸气法）高压蒸气法2）煮沸法）煮沸法3）流通蒸气法）流通蒸气法4）5）6）焚烧
4、法）焚烧法7）烧灼法）烧灼法8）干烤法）干烤法巴氏消毒法巴氏消毒法间歇灭菌法间歇灭菌法第七页，讲稿共三十六页哦 分湿热和干热分湿热和干热 同一温度下，湿热灭菌效果比干热好。同一温度下，湿热灭菌效果比干热好。原因：穿透力强，较快提高灭菌物品内部温度；原因：穿透力强，较快提高灭菌物品内部温度；易吸收水分，使菌体蛋白质易于凝固变性易吸收水分，使菌体蛋白质易于凝固变性。热蒸汽接触被灭菌物品时变为液态，可放出热蒸汽接触被灭菌物品时变为液态，可放出大量潜热，能迅速提高灭菌物品的温度。大量潜热，能迅速提高灭菌物品的温度。第八页，讲稿共三十六页哦 1、湿热灭菌法：、湿热灭菌法：（1）高压蒸汽灭菌法：最常用、最
5、有效）高压蒸汽灭菌法：最常用、最有效 密闭的蒸汽锅密闭的蒸汽锅 技术参术：压力技术参术：压力103.4kPa(1.05kg/c)，温，温度可达度可达121.3经经15-30分钟，杀死所有细菌分钟，杀死所有细菌繁殖体和芽胞。繁殖体和芽胞。用途：耐高温、不怕潮湿的物品用途：耐高温、不怕潮湿的物品-手术器械手术器械、敷料、敷料、一般培养基一般培养基等。等。要求要求：须将锅内冷空气排尽，物品不宜放置：须将锅内冷空气排尽，物品不宜放置紧密。紧密。第九页，讲稿共三十六页哦（2）煮沸法：水温）煮沸法：水温1005分钟杀死细菌繁殖分钟杀死细菌繁殖体。杀灭芽胞需煮沸体。杀灭芽胞需煮沸1-3小时。小时。若在水中加
6、入若在水中加入2%碳酸氢钠，可提高沸点碳酸氢钠，可提高沸点105，优点：促进杀灭芽胞，防止金属器械生锈优点：促进杀灭芽胞，防止金属器械生锈。高原每海拔增加高原每海拔增加300m，应延长，应延长2分钟。分钟。用途：食具、刀剪、注射器、生理盐水等消毒用途：食具、刀剪、注射器、生理盐水等消毒。第十页，讲稿共三十六页哦（3）流通蒸汽法：蒸笼或阿诺蒸锅）流通蒸汽法：蒸笼或阿诺蒸锅 温度温度100，15-20分钟可杀死细菌繁殖体。分钟可杀死细菌繁殖体。间歇灭菌法：把流通蒸汽加热的物品放置间歇灭菌法：把流通蒸汽加热的物品放置37孵箱过夜，孵箱过夜，芽胞芽胞繁殖体，次日再经流通蒸汽加热，如此重复繁殖体，次日再
7、经流通蒸汽加热，如此重复3次，次，达到灭菌目的。达到灭菌目的。用途：不耐高温的用途：不耐高温的营养丰富营养丰富的的培养基培养基灭菌、外科器械、注灭菌、外科器械、注射器、食具等射器、食具等。第十一页，讲稿共三十六页哦（4）巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或）巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，延长食品的贮存时间，不影响营养成分特定微生物，延长食品的贮存时间，不影响营养成分及香味。及香味。温度：温度：61.162.830分钟或分钟或71.71530秒秒 用途：不耐高温食品用途：不耐高温食品-牛奶、酒类、饮料等。牛奶、酒类、饮料等。第十二页，讲稿共三十六页哦第十三页，讲稿共
8、三十六页哦 2、干热灭菌法：通过脱水干燥和使大分子变、干热灭菌法：通过脱水干燥和使大分子变性的作用进行灭菌。性的作用进行灭菌。（1）焚烧与烧灼：废弃的物品或尸体）焚烧与烧灼：废弃的物品或尸体 实验用的接种环、试管口、瓶口等可通过火实验用的接种环、试管口、瓶口等可通过火焰烧酌灭菌。焰烧酌灭菌。（2）干烤：用电热干烤箱灭菌，通常加热至）干烤：用电热干烤箱灭菌，通常加热至160-170维持维持2小时，可达到灭菌的目的。小时，可达到灭菌的目的。用途：高温下不变质、不损坏、不蒸发的物用途：高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品品-玻璃、瓷器。玻璃、瓷器。第十四页，讲稿共三十六页哦第十五页，讲稿共三十六页哦第
9、十六页，讲稿共三十六页哦（二）紫外线与电离辐射灭菌法（二）紫外线与电离辐射灭菌法 1、日光与紫外线：日晒是有效的杀菌方法、日光与紫外线：日晒是有效的杀菌方法，杀菌作用主要靠紫外线。杀菌作用主要靠紫外线。波长在波长在200-300nm时，具有杀菌作用，其时，具有杀菌作用，其中以中以265-266nm杀菌力量最强。（此波长杀菌力量最强。（此波长与与DNA吸收波峰一致，易被细菌吸收波峰一致，易被细菌DNA吸收吸收，干扰，干扰DNA的复制与转录，导致细菌的死的复制与转录，导致细菌的死亡或变异。）亡或变异。）第十七页，讲稿共三十六页哦 缺点：穿透力弱，玻璃、纸张、尘埃等均能缺点：穿透力弱，玻璃、纸张、尘
10、埃等均能阻挡紫外线。阻挡紫外线。用途：手术室、病房、实验室等的用途：手术室、病房、实验室等的空气空气消毒消毒及物品的及物品的表面表面消毒。消毒。人工紫外线灯，人工紫外线灯，2-3米，米，1-2小时。小时。注意：对人体皮肤、眼睛有损伤作用。注意：对人体皮肤、眼睛有损伤作用。第十八页，讲稿共三十六页哦 2、电离辐射：包括高速电子、射线和、电离辐射：包括高速电子、射线和射线等。射线等。机理：足够剂量时，辐射粒子与某些分子机理：足够剂量时，辐射粒子与某些分子撞击后，可激发这些分子产生离子或其他撞击后，可激发这些分子产生离子或其他活性分子和游离基，破坏活性分子和游离基，破坏DNA。用途：一次性医用塑料制
11、品。也可用于食用途：一次性医用塑料制品。也可用于食品的消毒，而不破坏营养成分。品的消毒，而不破坏营养成分。3、微波：波长为、微波：波长为1mm-1m左右左右 多用于非金属器械、食品用具及其他用品多用于非金属器械、食品用具及其他用品的消毒。的消毒。第十九页，讲稿共三十六页哦（三）滤过除菌法（三）滤过除菌法 是用是用物理阻留物理阻留的方法将的方法将液体或空气液体或空气中的细菌中的细菌去除，达到无菌的目的。去除，达到无菌的目的。用途：用途：不耐高温的血清不耐高温的血清、毒素、抗生素、毒素、抗生素、药药液液等的除菌。等的除菌。现代医院的手术室、烧伤病房及无菌制剂室现代医院的手术室、烧伤病房及无菌制剂室
12、，已逐步采用高效颗粒空气滤器以除去空气，已逐步采用高效颗粒空气滤器以除去空气中直径小于中直径小于0.3m的微粒，保持室内无菌环的微粒，保持室内无菌环境。境。第二十页，讲稿共三十六页哦（四）超声波杀菌法（四）超声波杀菌法 不被人耳感受的高于不被人耳感受的高于20000Hz的声波称为的声波称为超声波。超声波。G-更为敏感更为敏感 主要用于粉碎细胞，制备抗原主要用于粉碎细胞，制备抗原第二十一页，讲稿共三十六页哦（五）干燥与低温灭菌法（五）干燥与低温灭菌法 有些细菌的繁殖体在空气干燥时会很快死有些细菌的繁殖体在空气干燥时会很快死亡，如脑膜炎奈瑟菌等。亡，如脑膜炎奈瑟菌等。干燥法通常用于保存食物，如浓盐
13、或糖渍干燥法通常用于保存食物，如浓盐或糖渍食品。食品。低温可以使细菌的新陈代谢减慢，常用作低温可以使细菌的新陈代谢减慢，常用作报存细菌菌种。报存细菌菌种。在低温状态下真空抽去水分，此法称为冷在低温状态下真空抽去水分，此法称为冷冻真空干燥法。冻真空干燥法。第二十二页，讲稿共三十六页哦 二、化学消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒剂的种类、性质与用途（一）化学消毒剂的种类、性质与用途 消毒剂对细菌和人体细胞都有毒性作用消毒剂对细菌和人体细胞都有毒性作用 用途：人体体表和医疗器械、周围环境的消用途：人体体表和医疗器械、周围环境的消毒。毒。常用化学药物的种类有：常用化学药物的种类有：第二十三页，
14、讲稿共三十六页哦第二十四页，讲稿共三十六页哦第二十五页，讲稿共三十六页哦 常用消毒剂的选用：常用消毒剂的选用：第二十六页，讲稿共三十六页哦（二）常用消毒剂的作用机制第二十七页，讲稿共三十六页哦（三）影响消毒灭菌效果的因素（三）影响消毒灭菌效果的因素 1、消毒剂的性质、浓度、和作用时间、消毒剂的性质、浓度、和作用时间 理化性质不同，对微生物的作用大小也不理化性质不同，对微生物的作用大小也不同。同。表面活性剂对表面活性剂对G+菌的杀菌效果要比对菌的杀菌效果要比对G-菌菌强。强。一般：浓度越高，作用时间越长，消毒效一般：浓度越高，作用时间越长，消毒效果愈强（醇类例外）。果愈强（醇类例外）。第二十八页
15、，讲稿共三十六页哦 2、细菌的种类、数量、与状态、细菌的种类、数量、与状态 芽胞比繁殖体抵抗力强；芽胞比繁殖体抵抗力强；有荚膜的细菌抵抗力强；有荚膜的细菌抵抗力强；幼龄菌比老龄菌对消毒剂敏感；幼龄菌比老龄菌对消毒剂敏感；数量越大，所需消毒时间越长。数量越大，所需消毒时间越长。第二十九页，讲稿共三十六页哦 3、环境因素的影响：病原菌随同排泄物、分泌、环境因素的影响：病原菌随同排泄物、分泌物一起存在，对细菌有保护作用，并与消毒剂发物一起存在，对细菌有保护作用，并与消毒剂发生化学反应，影响消毒效果。生化学反应，影响消毒效果。4、温度和酸碱度、温度和酸碱度 升高温度可提高消毒剂的杀菌效果，如升高温度可
16、提高消毒剂的杀菌效果，如2%戊二醛杀灭戊二醛杀灭104个个/炭疽芽胞杆菌，炭疽芽胞杆菌，20时需时需15分钟；分钟；40时需要时需要2分钟。分钟。第三十页，讲稿共三十六页哦 影响：戊二醛本身呈中性，其水溶影响：戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，不具有杀芽胞的作用，只液呈弱酸性，不具有杀芽胞的作用，只有在加入碳酸氢钠后才能发挥杀菌作用有在加入碳酸氢钠后才能发挥杀菌作用。其他影响因素其他影响因素:湿度、穿透力及拮抗物质湿度、穿透力及拮抗物质等等第三十一页，讲稿共三十六页哦（四）防腐剂（四）防腐剂低浓度的消毒剂可作防腐剂。低浓度的消毒剂可作防腐剂。在生物制品中，如疫苗、类毒素等常加入在生物制品中，
17、如疫苗、类毒素等常加入防腐剂，以防杂菌生长。防腐剂，以防杂菌生长。常用常用:0.01%:0.01%硫柳汞、硫柳汞、0.5%0.5%苯酚、苯酚、0.1-0.2%0.1-0.2%甲醛等。甲醛等。第三十二页，讲稿共三十六页哦 一、正常微生物群及生理作用一、正常微生物群及生理作用（一）正常微生物群（一）正常微生物群 正常人体的体表及与外界相通的腔道粘膜上存在着正常人体的体表及与外界相通的腔道粘膜上存在着不同种类和一定数量的细菌，通常对人体是无害的不同种类和一定数量的细菌，通常对人体是无害的，称为正常菌群。，称为正常菌群。第二节第二节 正常微生物群与微生态平衡正常微生物群与微生态平衡第三十三页，讲稿共三
18、十六页哦（二）正常菌群的生理意义（二）正常菌群的生理意义 1、生物拮抗作用：竞争营养、产生细菌素、生物拮抗作用：竞争营养、产生细菌素等方式拮抗病原菌，构成防止外来细菌侵等方式拮抗病原菌，构成防止外来细菌侵入与定居的生物屏障。入与定居的生物屏障。2、营养作用：参与物质代谢、营养转化和、营养作用：参与物质代谢、营养转化和合成。有的能合成宿主所必须的维生素。合成。有的能合成宿主所必须的维生素。第三十四页，讲稿共三十六页哦 3、免疫作用：有免疫原性、促免疫细胞分、免疫作用：有免疫原性、促免疫细胞分裂作用，刺激机体产生抗体，促进机体免疫裂作用，刺激机体产生抗体，促进机体免疫系统的发育和成熟，限制正常菌群
19、本身对宿系统的发育和成熟，限制正常菌群本身对宿主的危害，抑制或杀灭具有交叉抗原的病原主的危害，抑制或杀灭具有交叉抗原的病原菌。菌。4、抗衰老作用：肠道中的双歧杆菌、抗衰老作用：肠道中的双歧杆菌 此外：有利于生长、发育和长寿、抗癌作用此外：有利于生长、发育和长寿、抗癌作用。第三十五页，讲稿共三十六页哦第三节第三节 条件致病微生物与微生态失调所条件致病微生物与微生态失调所致的疾病致的疾病一、条件致病微生物一、条件致病微生物 在某些特定情况下，因各种原因使微生态在某些特定情况下，因各种原因使微生态平衡失调而导致疾病发生的某些原来不致平衡失调而导致疾病发生的某些原来不致病的正常微生物群。病的正常微生物群。第三十六页，讲稿共三十六页哦