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1、大肠埃希菌 形态与染色特性:1、周身鞭毛2、能运动3、无芽孢,不产生荚膜。4、菌体两端钝圆、中等大小,杆状(有时呈卵圆形)、1-3umx0.6um5、革兰氏阴性培养特性:1)需氧及兼性厌氧菌2)对营养的要求不高,最适生长温度为37,最适pH为7.27.4。3)在普通琼脂平板上培养24小时,可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落其菌落与沙门氏菌比较相似。4)在肉汤培养基中生长1824小时变为均匀浑浊,而后底部出现粘性沉淀物,并伴有臭味生化反应:1.对糖的代谢能力:大部分菌株发酵乳糖产酸产气,并发酵葡萄糖、麦芽胞、甘露醇、木胶糖、阿拉伯胶等产酸产气。2.IMViC试验为“+
2、、+、-、-”。即为典型大肠杆菌。 培养基 菌落形态 曙红亚甲蓝琼脂 紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有金属光泽 麦康凯琼脂 鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润生化试验: 靛基质试验 为阳性,玫瑰红色吲哚,培养基为蛋白胨水培养基。(液面呈玫瑰红色为阳性,呈试剂本色为阴性。) 原理:大肠埃希菌能分解蛋白胨中的色氨酸,生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物。甲基红试验 为阳性,呈鲜红色或橘红色,培养基为磷酸盐葡萄糖胨水培养基。
3、(呈鲜红色或橘红色为阳性,呈黄色为阴性) 原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为大量混合酸,使培养基pH下降至4.5以下,加入甲基红指示剂可呈红色。乙酰甲基甲醇生成试验(V-P) 为阴性(无红色),要加入-萘酚乙醇试液1ml,混匀,再加40%氢氧化钾试液0.4ml。培养基为磷酸盐葡萄糖胨水培养基。(在4h(通常在30min时)内出现红色判为阳性,无红色判为阴性)原理:葡萄糖丙酮酸(脱羧)乙酰甲基甲醇2,3丁烯二醇,在有碱存在时氧化成二乙酰,后者和胨中的胍基化合物起作用产生粉红色的化合物。枸橼酸盐利用实验 为阴性,培养基本来为绿色,不变色为阴性,培养基为枸橼酸盐培养基斜面。(培养基变蓝色,为阳性;不变,为阴性)原理:细菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐,进而氨盐分解,产生氨,培养基变碱,显深蓝色。内容总结(1)大肠埃希菌 形态与染色特性:1、周身鞭毛2、能运动3、无芽孢,不产生荚膜(2)吲哚与对二甲基氨基苯醛结合,形成玫瑰吲哚,为红色化合物(3)(呈鲜红色或橘红色为阳性,呈黄色为阴性) 原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸进一步被分解为大量混合酸,使培养基pH下降至4.5以下,加入甲基红指示剂可呈红色