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1、学习必备欢迎下载糖蛋白中寡糖与多肽链的连接形式有几种类型？答：糖蛋白中寡糖与多肽链的，简称糖肽键。糖肽链的类型可以概况为：N-糖苷键型：寡糖链（GlcNAC的-羟基）与 Asn 的酰胺基、 N-未端的 a-氨基、 Lys或 Arg的 W-氨基相连。 O-糖苷键型：寡糖链（GalNAC的 -羟基）与Ser、 Thr 和羟基赖氨酸、羟脯氨酸的羟基相连。 S-糖苷键型：以半胱氨酸为连接点的糖肽键。 酯糖苷键型：以天冬氨酸、谷氨酸的游离羧基为连接点。N-连寡糖和 O-连寡糖的生物合成有何特点？答：N-连寡糖和O-连寡糖的生物合成特点分别是N-糖链的合成是和肽链的生物合成同时进行的，而O-糖链的合成是在
2、肽链合成后，对肽链进行修饰加工时将糖基逐个连接上去的。第 34 章 DNA 的复制和修复生物的遗传信息如何由亲代传给子代？答：在细胞分裂间期，DNA 分子边解旋边复制，分别以亲代DNA 的两条母链为模板，以核中游离的脱氧核苷酸为原料，根据碱基互补配对原则，合成两条子链，它们分别与相应的模板链螺旋化就形成了两个与亲代DNA 一样的子代DNA，在生物传种接代的过程中，亲代将复制出的一份DNA 通过配子传给子代，从而实现了亲子代间遗传信息的传递。接下来，在子代个体发育的过程中，将利用DNA(gene)来指导自身蛋白质的合成，从而表现出与亲代相似的性状。也有一些生物如某些病毒，是通过将亲代的RNA 复
3、制后传给子代的方式进行遗传信息的传递。何谓 DNA 的半保留复制？是否所有的DNA 复制都以半保留的方式进行？（双链 DNA 通常都以半保留方式复制。 ）答： DNA 在复制时首先两条链之间的氢键断裂两条链分开，然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA 链，这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式为半保留复制(semiconservative replication) 。并非所有的DNA 复制都以半保留的方式进行，但双链DNA 通常都以半保留方式复制。若使 15N 标记的大肠杆菌在14N 培养基中生长三代， 提取 DNA， 并用平衡沉降法测定DN
4、A密度，其 14N-DNA 分子与 14N-15N 杂合 DNA 分子之比应为多少？答：这两者之比为1:3。比较 DNA 聚合酶、和性质的异同。DNA 聚合酶和的功能是什么？有何生物学意义？答：在 E.coli 中，共发现了3 种 DNA 聚合酶，即DNA 聚合酶、。DNA 聚合酶是个多功能酶，具有5- 3聚合功能； 3- 5外切功能以及3- 5外切功能。DNA 聚合酶与DNA 聚合酶功能相似，但没有5- 3外切功能。DNA 聚合酶与DNA 聚合酶功能相同，但其聚合活性比DNA 聚合酶高1000 倍，是E.coliDNA复制中的最主要酶。DNA 聚合酶和是在1999 年才被发现的,它涉及DNA
5、 的错误倾向修复(errorprone repair)。当 DNA 受到较严重损伤时, 即可诱导产生这两个酶,使修复缺乏准确性(accuracy),因而出现高突变率。其生物学意义在于高突变率虽会杀死许多细胞,但至少可以克服复制障碍, 使少数突变的细胞得以存活。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 30 页学习必备欢迎下载DNA 复制的精确性、持续性和协同性是通过怎样的机制实现的？答： DNA 聚合酶由10 个亚基组成，这些亚基将催化DNA 合成、校对和夹位DNA 等功能有机地组合在一起，保证了DNA 复制的精确性、持续性和协同
6、性。何谓 DNA 的半不连续复制？何谓冈崎片断？试述冈崎片断合成的过程？答： DNA 的双螺旋结构中的两条链是反向平行的，当复制开始解链时，亲代DNA 分子中一条母链的方向为5 3，另一条母链的方向为3 5。DNA 聚合酶只能催化5 3合成方向。在以3 5方向的母链为模板时，复制合成出一条5 3方向的前导链，前导链的前进方向与复制叉的行进方向一致，前导链的合成是连续进行的。而另一条母链仍以 3 5方向作为模板，复制合成一条5 3方向的随从链，因此随从链会成方向是与复制叉的行进方向相反的。随从链的合成是不连续进行的，先合成许多片段， 即冈崎片段。最后各段再连接成为一条长链。由于前导链的合成连续进
7、行的，而随从链的合成是不连续进行的，所以从总体上看DNA 的复制是半不连续复制。DNA 复制时，在滞后链上，较短的DNA 片段（大约1000-2000 个核苷酸）是在分段合成引物的基础上，非连续合成的，这些不连续的DNA 片段最先由日本科学家冈崎在电子显微镜下发现，故称为冈崎片断(Okazaki fragment)。引发体在滞后链上沿53方向不停的移动(这是一种相对移动，也可能是滞后链模板在移动)，在一定距离上反复合成RNA引物。 DNA 聚合酶从RNA引物的 3，-OH 端合成冈崎片段。DNA 复制时双链是如何解开的？比较类型和类型拓扑异构酶的作用特点和生理功能。答： DNA 复制起始的体外
8、实验表明需要6 种蛋白 ,Dna A、Dna B、Dna C、组蛋白样蛋白(HU)回旋酶及单链结合蛋白(SSB) 形成起始复合物。Dna A 单体首先结合到复制起始点上4 个含 9 bp 的重复顺序上。然后2040 个 Dna A 单体结合到复制起始点形成一个核心。在Dna A 蛋白的作用下位于复制起始点右侧的3 个含 13 bp 的重复顺序开始解链形成开放复合体。Dna B/Dna C 在复制起始区充当了起始的引发体（ primosome ） 。Dna B?Dna C复合体转变为Dna B六聚物，形成复制叉。Dna B提供解旋酶（helicase）活性，使DNA 解旋，可能它识别复制叉上潜在
9、的单链结构，从13 bp 的重复顺序上取代出Dna A，并开始解螺旋。Dna B在复制起始区域以很少的量（1 2 六聚物）担负着催化作用。在那儿Dna B 还具有激活Dna G 引发酶的能力。解旋反应还需要另外两种蛋白，旋转酶（Gyrase）和 SSB （单链结合蛋白） 。旋转酶也就是Top ，其作用是解旋，即让一条链绕着另一条链旋转。若没有这步反应，解开双链就会产生DNA 的扭曲。 SSB可使已形成的单链处于稳定状态。拓扑异构酶（Topo ） ，将环状双链DNA 的一条链切开一个口，切口处链的末端绕螺旋轴按照松弛超螺旋的方向转动，然后再将切口封起。拓扑酶I 松弛超螺旋不需ATP参与。拓扑异构
10、酶（Topo ） ，它的作用特点是切开环状双链DNA 的两条链，分子中的断端经切口穿过而旋转，然后封闭切口。Topo 在 ATP参与下，将DNA分子从松弛状态转变为负超螺旋，为DNA 分子解链后进行复制及转录作好准备。天然双链闭环DNA(cccDNA)的比超螺旋 ()为-0.05，复制时解螺旋酶将双链撑开，如果反应系统中无旋转酶，当比超螺旋达到+0.05 时， DNA 的扭曲张力将阻止双链解开，此时已解开的双链占DNA 分子的百分数是多少？答：此时已解开的双链占DNA 分子的百分数是9.52%。何谓复制体？试述其主要成分的功能。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 -
11、 - - - - - -第 2 页，共 30 页学习必备欢迎下载答：与 DNA 复制有关的酶和蛋白质因子由30 多种，他们在复制叉上形成离散的复合物，彼此配合，进行高度精确的复制，这种结构称为复制体。复制体的主要成分有,Dna A、Dna B、Dna C、组蛋白样蛋白(HU)回旋酶、单链结合蛋白(SSB) 、引物合成酶、 RNA聚合酶、 DNA 旋转酶， Dam 甲基化酶以及DNA聚合酶等。复制体在DNA复制叉上进行的基本活动包括：双链的解开， RNA 引物的合成， DNA链的延长， 切除引物，填补缺口，连接相邻的DNA 片断，切除和修复尿嘧啶和错配碱基。DNA 的复制过程可分为哪几个阶段？其
12、主要特点是什么？复制的起始是怎样控制的？答： DNA 的复制过程包括复制的起始、延伸和终止三个阶段。（1）复制的起始引发：当DNA 的双螺旋解开后，合成RNA 引物。引发体沿着模板链5 3方向移动（与冈崎片段合成的方向正好相反，而与复制叉移动的方向相同） ，移到一定位置上即可引发RNA引物的合成。（2）DNA 链的延伸前导链只需要一个RNA引物，后随链的每一个冈崎片段都需要一个RNA 引物，链的延长反应由 DNA pol.催化。复制体沿着复制叉方向前进合成DNA。DNA pol的 5，3，外切活力，切除RNA 引物。DNApol的 5，3，合成活性补齐缺口。DNA ligase，动物、真核由A
13、TP供能，原核由NAD 供能。（3）DNA 合成的终止环状 DNA、线性 DNA，复制叉相遇即终止。DNA 复制的调控主要是起始阶段的调控。原核生物DNA 复制的调控与其生长环境有关，真核生物DNA 复制的调控与细胞周期蛋白等多种蛋白质因子有关，机制十分复杂，但复制起始点必须全甲基化后复制才能发生。真核生物DNA 聚合酶有哪几种?它们主要功能是什么？答：真核生物DNA聚合酶有 、 等五种。真核生物的DNA 复制是在DNA 聚合酶 与 DNA 聚合酶 互配合下催化进行的，还有一些酶及蛋白质因子参与反应。DNA Pol与引发酶共同起引发作用，然后由 DNA Pol催化前导链及随从链的合成。在链的延
14、长中，有PCNA （增殖细胞核抗原）参与，保障连续性DNA Pol 的性质与DNA Pol有相似之处，在有些情况下，它可代替DNA Pol起作用，例如在DNA 损伤时，催化修复合成。DNA Pol是线粒体中DNA 复制酶。DNA Pol53外切酶活性可能在切除引物RNA中有作用。真核生物DNA 聚合酶的主要功能见下表：5 3聚合作用3 5外切作用e + - + 细胞内定位功能核复制、引发核修复线粒体精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 30 页学习必备欢迎下载复制核复制核复制- + + + + + 真核生物染色体DNA 的端粒
15、有何功能？它们是如何合成的？答：真核生物线形染色体的末端具有一种特殊的结构，称为端区或端粒。端区结构中有核苷酸重复序列，一般在一条链上为TxGy，互补链为CyAx，x 与 y 大约在 1-4 范围内，人的端粒区含有TTAGGG重复序列。端区具有保护DNA双链末端，使其免遭降解及彼此融合的功能。端区的平均长度随着细胞分裂次数的增多及年龄的增长而变短，可导致核生物染色体稳定性下降，并导致衰老。其分子机制在于，线形DNA 分子不能从末端核苷酸外合成RNA引物，如此染色体将逐代缩短。但是在生殖细胞、胚胎细胞和肿瘤细胞中，由于有端粒酶，所以并不出现这种情况。端粒酶是一种由RNA 和蛋白质组成的酶，RNA
16、和蛋白质都是酶活性必不可少的组分。可看作是一种反转录酶。此酶组成中的RNA可作为模板，催化合成端区的DNA 片段。端粒酶催化合成端区，在保证染色体复制的完整性上有重要意义。哪些因素能引起DNA损伤？生物机体是如何修复的？这些机制对生物机体有何意义？答：一些物理化学因子如紫外线、电离辐射和化学诱变剂均可引起DNA 损伤，破坏其结构与功能。然而在一定条件下，生物机体能使这种损伤得到修复。紫外线可使DNA 分子中同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶碱基之间形成二聚体（TT） ，两个 T以共价键形成环丁烷结构。CT、CC间也可形成少量二聚体（CT、CC ） ，使复制、转录受阻。细胞内具有一系列起修复作用的酶系
17、统，可以除去 DNA 上的损伤， 恢复 DNA的双螺旋结构。目前已知有4 种酶修复系统：光复活、切除修复、重组修复、SOS反应诱导的修复，后三种不需要光，又称为暗修复。1.直接修复1949 年已发现光复活现象，可见光（最有效400nm）可激活光复活酶，此酶能分解由于紫外线形成的嘧啶二聚体。高等哺乳动物没有此酶。2.切除修复在一系列酶的作用下，将DNA 分子中受损伤部分切除，并以完整的那一条链为模板，合成出切去部分， DNA 恢复正常结构。3.结构缺陷的修复：（1）核酸内切酶识别DNA 损伤部位，在其附近将其切开。（2）核酸外切酶切除损伤的DNA。（3）DNA 聚合酶修复。（4）DNA 连接酶连
18、接。4.无嘌呤无嘧啶碱基缺陷或错配脱碱基（N-糖苷酶）：甲基磺酸甲酯可使鸟嘌呤第7 位氮原子烷基化，活化-糖苷键，造成脱嘌呤作用；酸也能使 DNA 脱嘌呤。DNA 复制时， DNA 聚合酶对dTTP和 dUTP 分辨力不高，有少量dUTP 掺入 DNA 链。细胞中的尿嘧啶 -N-糖苷酶可以切掉尿嘧啶。腺嘌呤脱氨形成次黄嘌呤时也可以被次黄嘌呤-N-糖苷酶切掉次黄嘌呤。对于无嘌呤无嘧啶的损伤有两种修复方法：（1）AP核酸内切酶切开，核酸外切酶切除，DNA 聚合酶修复，DNA 连接酶连接。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 30
19、页学习必备欢迎下载（2）插入酶插入正确碱基。5.重组修复切除修复发生在DNA 复制之前，而当DNA 发动复制时尚未修复的损伤部位，可以先复制，再重组修复。在重组修复过程中，DNA 链的损伤并未除去。重组修复至少需要4 种酶组分。重组基因recA 编码一种分子量为40000 的蛋白质，它具有交换 DNA 链的活力。 RecA蛋白被认为在DNA 重组和重组修复中均起关键作用。recB、 recC基因分别编码核酸外切酶V 的两个亚基。此外，修复合成还需要DNA 聚合酶和连接酶。6.易错修复和应急反应（SOS反应）诱导修复是细胞DNA 受到严重损伤或DNA 复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出
20、现的一系列诱导性修复。SOS反应诱导的修复系统包括避免差错的修复（无差错修复）和易错的修复。避免差错的修复：SOS 反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生，从而加强光复活切除修复和重组修复的能力，这属于避免差错的修复。易错的修复： SOS反应还能诱导产生缺乏校对功能的DNA 聚合酶，它能在DNA 损伤部位进行复制而避免了死亡，可是却带来了高的突变率，这属于易错的修复。SOS反应是由RecA蛋白和 LexA阻遏物相互作用引起的。RecA蛋白不仅在同源重组中起重要作用，而且它也是SOS反应的最初发动因子。在有单链DNA和 ATP存在时， RecA蛋白被激活而表现出蛋白水解酶的
21、活力，它能分解 噬菌体的阻遏蛋白和LexA蛋白。 LexA蛋白 （22Kd）许多基因的阻遏物，当它被RecA的蛋白水解酶分解后就可以使一系列基因得到表达其中包括紫外线损伤的修复基因uvrA、uvrB、uvrC（分别编码核酸内切酶的亚基）以及 recA 和 lexA基因本身，还有单链结合蛋白基因ssb，与 噬菌体 DNA 整合有关的基因himA、与诱变作用有关的基因umuDC，与细胞分裂有关的基因sulA，ruv，和 lon，以及一些功能不清楚的基因 dinA，B，D，F等。DNA 的修复机制对保证遗传信息在传递过程中的忠实性，连续性具有重要的意义。何谓应急反应(SOS) 和易错修复？它们之间是
22、什么关系？SOS反应对生物机体有何意义？答：诱导修复是细胞DNA 受到严重损伤或DNA复制系统受到抑制的紧急情况下，为求得生存而出现的一系列诱导性修复。SOS反应诱导的修复系统包括避免差错的修复（无差错修复）和易错的修复。避免差错的修复：SOS 反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生，从而加强光复活切除修复和重组修复的能力，这属于避免差错的修复。易错的修复： SOS反应还能诱导产生缺乏校对功能的DNA 聚合酶，它能在DNA 损伤部位进行复制而避免了死亡，可是却带来了高的突变率，这属于易错的修复。易错修复是应急反应(SOS) 中的一种。SOS反应广泛存在于原核生物和真核生物
23、，它为生物在极为不利的环境中求得生存提供了机会。何谓突变？突变与细胞癌变有何联系？答：基因突变是指由于DNA 碱基对的置换、增添或缺失而引起的基因结构的变化，亦称点突变。在自然条件下发生的突变叫自发突变，由人工利用物理因素或化学药剂诱发的突变叫诱发突变。 基因突变是生物变异的主要原因，是生物进化的主要因素。在生产上人工诱变是产生生物新品种的重要方法。根据基因结构的改变方式，基因突变可分为碱基置换突变和移码突变两种类型。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 30 页学习必备欢迎下载基因突变有可能破坏DNA 复制和细胞分裂的正常调
24、控机制，引起细胞癌变。DNA 复制时两条链发生错配的概率是否相等？两条链错配修复的概率是否相等？答： DNA 复制时两条链发生错配的概率不相等。两条链错配修复的概率也不相等。为什么引起SOS反应的化合物通常都是致癌剂？答：由于癌变有可能是通过SOS反应诱变造成的，因此能引起SOS反应的化合物通常都具有致癌作用。试述 Ames 试验的原理。答： BNAmes 等经十余年努力，于1975 年建立并不断发展完善的沙门氏菌回复突变试验，亦称 Ames 试验。该法比较快速、简便、敏感、经济，且适用于测试混合物，反映多种污染物的综合效应。Ames 试验的原理是：鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typ
25、himurium ）的组氨酸营养缺陷型（his）菌株，在含微量组氨酸的培养基中，除极少数自发回复突变的细胞外，一般只能分裂几次，形成在显微镜下才能见到的微菌落。受诱变剂作用后，大量细胞发生回复突变，自行合成组氨酸，发育成肉眼可见的菌落。 某些化学物质需经代谢活化才有致变作用，在测试系统中加入哺乳动物微粒体酶，可弥补体外试验缺乏代谢活化系统之不足。鉴于化学物质的致突变作用与致癌作用之间密切相关，故此法现广泛应用于致癌物的筛选。第 35 章 DNA 的重组DNA 重组有何生物学意义？是否可以说没有DNA 重组就没有生物进化？答： DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合，称为遗传重组。DNA
26、重组能迅速增加群体的遗传多样性，使有利突变与不利突变分开，通过优化组合积累有意义的信息。DNA 重组参与许多重要的生物化学过程，为DNA 损伤或自制障碍提供修复机制。某些基因的表达受DNA 重组的调节。基因发育过程也受到基因加工的控制。另外，DNA 重组对生物进化起着关键性作用。可以说没有DNA 重组就没有生物进化。是分析DNA 复制、修复和重组三者之间的关系。答： DNA 复制是 DNA 修复和重组的基础，修复保证了DNA 复制的准确性，重组是修复的方式之一。DNA 重组可分为哪几种类型？它们的主要特点是什么？答： DNA 重组有 3 种类型，分别是同源重组、特异位点重组和转座重组。同源重组
27、发生是依赖大范围的DNA同源序列的联会。重组过程中，两个染色体或DNA分子交换对等的部分。其特点是：需要重组的蛋白质参与；蛋白质因子对DNA 碱基序列的特异性要求不高；真核生物染色质的状态影响重组的频率。特异位点重组的特点：重组依赖于小范围同源序列的联会，发生精确的断裂、连接，DNA分子并不对等交换。转座重组的特点：完全不依赖于序列间的同源性而使一段DNA 序列插入另一段中，但在形成重组分子时往往是依赖于DNA 复制而完成重组过程。什么是同源重组？它有何功能？精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页，共 30 页学习必备欢迎下载答：同
28、源重组又叫一般性重组，它是由两条同源区的DNA 分子，通过配对、链的断裂和再连接，而产生片段交换的过程。同源重组的功能是在减数分裂中使四联体某些位置的非姊妹染色单体之间可以发生交换。简要说明Holliday 模型。答：一对同源染色体有4 个染色单体，每一染色单体是一条DNA 双链，所以一对同源染色体有 4 条 DNA 双链。在晚偶线期和早粗线期染色体配对时，同源非姊妹染色单体的DNA分子配合在一起；核酸内切酶识别DNA 分子上的相应断裂点（breakage point） ，在断裂点的地方把磷酸二酯键切断，使两个非姊妹DNA 分子各有一条链断裂；两断链从断裂点脱开，螺旋局部放松， 单链交换准备重
29、接；在连接酶的作用下，断裂以交替方式跟另一断裂点相互联结，形成一个交联桥（cross-bridge） ，这结构又称Holliday 中间体（ Holliday intermediate ） ；这交联桥不是静态的，可以靠拉链式活动沿着配对DNA 分子向左右移动，其中互补碱基间形成的氢键从一条亲本链改为另一条亲本链，于是移动后在两个亲本DNA 分子间留下较大片段的异源双链DNA，这种结构又称为Holliday 结构； 随后这交联桥的两臂环绕另外两臂旋转成为十字形， 并在交联部分断开， 消除交联体， 恢复为两个线性DNA 分子，即形成 Holliday结构的异构体； 断开方向或沿东西轴进行，或沿南北
30、方向进行；如沿东西方向切断，即上连、下连，则产生的两个异源双链的两侧基因为AB和 ab， 仍保持亲代类型， 如沿南北方向切割，即左连、 右连，则两侧基因为Ab 和 aB，产生两个重组类型，但不论是那种情况，即 Holliday结构断裂是否导致旁侧遗传标记的重组，它们都含有一个异源双链DNA 区，有关的两核苷酸区段分别来自不同的亲本，从而由原来的G-C、A-T配对变为G-A、C-T非配对。细菌基因转移有哪几种方式？它们有何生物学意义？答：细菌的基因转移方式有转化、转导、溶原性转换、接合和原生质体融合等五种方式。细菌可通过细胞间基因转移，并通过基因重组以适应随时改变的环境。参与同源重组主要的酶和辅
31、助因子有哪些?简要说明其作用机制。答：参与同源重组主要的酶和辅助因子有：Rec A蛋白、 Rec BCD酶、 Ruv A 蛋白、 Ruv B 蛋白、 Ruv C 蛋白、 DNA 聚合酶和DNA 连接酶。Rec A 蛋白，能促使两个同源DNA 分子的碱基配对，形成杂种分子。Rec A蛋白首先与单链DNA 结合（约每分子可结合个核苷酸），形成一条DNA蛋白质细丝（需消耗ATP ） 。于是Rec A蛋白即被活化而可将双螺旋解旋和分离，同时企图将它结合的单链与被解旋区域退火，如此继续下去，直到找到互补顺序。只要一旦有一小部份被真正“退火”，ATP 供应的能量就会继续驱使配对反应趋于完成，其方向是 （单
32、链部分） 。当新的杂交双链形成时，Rec A蛋白即从原来的单链掉下来。Rec BCD酶首先结合在又螺旋的游离端上，然后利用ATP供给的能量沿着双螺旋向前推进。在其行经之处， 一路上解旋并又复旋。但由于解旋的速度快于复旋速度，所以解旋的双链区就越来越长。Ruv A 蛋白识别Holliday 联结体的交叉点， Ruv A 蛋白四聚体结合其上形成四方平面的构象，使得分支点易于移动，Ruv A 蛋白还帮助Ruv B 蛋白六聚体环结合在双链DNA 上。 Ruv B是一种解旋酶，可推动分支移动。同源重组最后由Ruv C可将 Holliday 联结体切开，并由DNA 聚合酶和DNA 连接酶进行修复合成。何谓
33、特异位点重组？其作用特点是什么？答：位点专一性重组这类重组在原核生物中最为典型。它发生在特殊的序列对之间，这种精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 30 页学习必备欢迎下载重组依赖于小范围同源序列的联会。在重组对之间的短的同源序列是供重组蛋白识别用的，它对同源性的要求不象同源性重组那么重要，蛋白质和DNA、蛋白质和蛋白质之间的作用更为关键。重组时发生精确的切割、连接反应，DNA 不失去，不合成。两个DNA 分子并不交换对等的部分，有时是一个DNA 分子整合到另一个DNA 分子中，因此又将这种形式的重组称为整合式重组(integ
34、rative recombination) 。 例如 l 噬菌体 DNA 通过其 att 位点和大肠杆菌DNA 的 attB 位点之间专一性重组而实现整合过程。在重组部分有一段15 bp 的同源序列， 这一同源序列是重组的必要条件，但不是充分条件，还须位点专一性的蛋白质因子参与催化。这些蛋白质因子不能催化其他任何两条不论是同源的还是非同源序列间的重组，这就保证了l 噬菌体 DNA 整合方式的专一性和高度保守性。这一重组不需要RecA蛋白质的参与。说明 噬菌体 DNA 的整合和切除过程。答：这是一种特异位点重组，其基本过程如下：attB 由称为BOB的序列组成，而attP 由POP组成。 O 是
35、核心序列，是attB 和 attP 所共同的。而其两侧的序列是B，B和 P，P ，被称为臂。噬菌体DNA 是环状的，重组时被整合入细菌染色体中，成为线性序列。前病毒的两侧是两个新的杂种att 位点，左侧称为attL，由 BOP组成，而右侧为attR，由 POB组成。可见，整合和切出并不涉及相同的一对序列：整合需要识别attP 和 attB，而切出要求识别 attL 和 attR。 因此，重组位点的识别就决定了位点专一性重组的方向整合或切出。虽然位点专一重组是可逆的，但反应的方向取决于不同环境条件，这对决定噬菌体的生命力周期是非常性重要的。整合的。整合酶和IHF对整合和切出都是是必需的，而切出酶
36、在控制反应方向上起重要作用它对切出是必须的，但能抑制整合。 在切除的环化过程中如果发生错误， 前噬菌体可能失去某些基因而代之以其相邻的细菌基因。因为整合位点处于细菌染色体的 gal 和 bio 基因之间，切除过程中噬菌体DNA 偶尔会带走gal 基因，生成 gal（或称db） 。gal 或bio 转导（感染）新的宿主时常常把gal 或 bio 基因带到新的宿主中去，所以把 gal或 bio 这些带有某些宿主基因的噬菌体称为转导噬菌体（transducing phage） 。何谓鞭毛相转变？它如何控制鞭毛基因的表达？答：鼠伤寒沙门杆菌由鞭毛蛋白决定的H 抗原有两种 ,分别为 H1 鞭毛蛋白和H2
37、 鞭毛蛋白。在单菌落的沙门氏菌中经常出现少数呈另一H 抗原的细菌 ,这种现象称为鞭毛相转变。沙门氏菌H 片段倒位决定鞭毛相转变hix 为反向重复序列,它们之间的H 片段可在Hin 控制下进行特异位点重组(倒位 )。H 片段上有两个启动子P ,其一驱动hin 基因表达 ,另一正向时驱动 H2 和 rH1 基因表达 ,反向 (倒位 )时 H2 和 rH1 不表达。试总结免疫球蛋白基因重组的规则。答：免疫球蛋白由两条轻链（L 链）和两条重链(H 链)组成，它们分别由三个独立的基因族编码，其中两个编码轻链(链和 链)，一个编码重链。重链基因的V-D-J 重排和轻链基因的 V-J重排均发生在特异位点上。
38、免疫球蛋白基因重组的规则如下：a） 链的重组：每个C片段前有J跟随；只在V 和 J-C之间发生一次重组(V 和 J的重组 )。b） 链的重组：一条轻链也由两部分组装而成，但在C 基因的组织过程中有所不同。一组 5 个 J 片段包含500-700 个碱基对并被C外显子上的一个2-3kb 的内显子所隔离。在鼠中，中心J片段是无功能的（J3） 。一个 V片段可以被连接到任何一条J片段上去。无论用的是哪个J片段，都可以成为原始可变外显子的终端部分。整合J 片段左边的每个J片段都会缺失掉。而右边的J片段都会被作为可变和不可变外显子之间的内显子的一部分。c) 重链基因 V、 D 和 J片段的重组 : 重链
39、的可变区由V和 J基因及第三个D 基因片段编码；V-D-J连接由两个阶段组成，第一个阶段是D 片段和一个JH片段重组，然后是一个VH片段精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页，共 30 页学习必备欢迎下载再和 DJH片段重组。这个重构导致了邻近的CH片段（包含几个外显子）的表达。重组只发生在间隔为12 bp 与间隔 23 bp 的不同信号序列之间，称为12-23 规则。免疫球蛋白基因重组过程中产生的P 核苷酸和N 核苷酸是如何来的？它们产生的意义和需要付出的代价是什么？答：免疫球蛋白基因在重组过程中，RAG1 /RAG2 复合物切开
40、七核苷酸与基因接头处的一条链，形成3， OH、5， P 未端。游离的3， OH 攻击另一条链的酯键，在基因片段末端形成发夹结构。然后复合物进一步将发夹结构切开，单链切开的位置往往不是原来通过转酯反应连接的位置，多出的核苷酸与末端序列相同，但方向相反， 称为 P核苷酸。 末端可以被外切酶切除一些核苷酸，也可以由脱氧核苷酸转移酶外加一此核苷酸，称为N 核苷酸。在接头处随机插入或删除核苷酸可以增加抗体基因的多样性，但如果插入或删除核苷酸数不是 3 的倍数，就将改变阅读框架而使基因失活。何谓转座重组？它有何生物学意义？答：由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座重组。转座重组的生物学意义有：可引
41、起基因突变插入或切离；改变染色质的结构 （缺失、倒位等）； 可以插入新基 （ampR、terR 等） ；在靶序列上引入新的转座子序列，原来序列保持不变；在靶序列上造成同向重复序列；产生新的变异，有利于进化。细菌的转座因子有几种？它们的结构有何特点？答：微生物的某些DNA 片段作为一个独立单位可在染色体上移动，此种移动甚至可发生在不同种细胞之间。这种可移动的DNA 片段称之为转座因子。细菌的转座因子有两种类型：插入序列 (insert sequence ，IS)和转座子 (transposon，Tn)。插入序列不含任何宿主基因，是最简单的转座子，它们是细菌染色体或质粒DNA 的正常组成部分。所有
42、插入序列的两端都有反向重复。转座子除编码转座功能有关的基因外还携带抗性或其它标记基因。按结构可分为组合因子和复合因子。何谓 Shspiro 中间体？何谓共整合体？它们之间有何关系？答：转座酶识别转座子的末端反向重复序列并且在其3，端切开，同时在靶部位交错切开单链，它的5,端突出末端与转座子的3，端连接，形成Shspiro 中间体。在复制转座过程中，由转座酶分别切割转座子的供体和受体DNA 分子，转座子的末端与受体 DNA 分子连接，并将转座子复制一份拷贝，由此生成的中间体即共整合体(cointegrat ，)。共整合体可以理解为是一种特殊的Shspiro 中间体。为什么真核生物转座因子可分为自
43、主因子和非自主因子？它们转座的生物效应是否相同？答：真核生物由于有核存在，其转录和翻译在时空是的隔开的。因此，真核生物细胞内只要存在转座酶， 任何序列片段只要存在该酶识别的反向重复末端均可发生转移，而无需由转移序列自身编码这些酶。因此真核生物转座因子可分为自主因子和非自主因子。它们转座的生物效应是不同的。自主因子能自主发生转座，而非自主因子能抑制邻近基因的表达，它本身不能转座，但在自主因子存在时，可发生转座。比较玉米的Ac-Ds系统和 Smp-dSmp 系统的特点。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 9 页，共 30 页学习必备欢迎下载
44、答：在 Ds-Ac系统中，大部分自主因子AC的长度由含5 个外显子的单个基因组成，其产物是转座酶，它的末端有11bp 的 IR 和 8bp 的 DR，DR是由靶位点重复而成。各种 Ds因子的长度和序列都不相同，但和Ac相关。其末端同样有11bp 的 IR。Ds比 Ac短，其缺失的长度不同。Ac/Ds 发生的转座是通过非复制机制，并且伴随着它们从供体位置的消失。Spm 和 En 自主因子实际上是相同的。它们仅在不到10 个位置上有差异。就像其它的转座子一样，末端含有13bp 的 IR，此重复序列对于转座是必须的，末端缺失就会形成转座的缺陷型。与 Spm 相关的转座子在其它的植物中也有发现，它们的
45、结构相似，属于同一个家族。它们末端IR都邻接着靶DNA 重复而产生的3bp 的 DR。末端的IR称为转座的CACTA群。这个家族所有的非自主因子（dSpm 是缺陷的Spm）都和 Spm 因子本身的结构密切相关。它们是 tnpA 缺失了外显子。Spm 的插入能控制位点基因的表达，受体位点可能受到正的的或负的调控。一个Spm-可抑制基因座（ Spm- suppressible locus）受到抑制而不能表达。一个spm- 依赖性座位（spm- dependent locus ）只有在 spm 的帮组下才表达。当被插入的因子是一个dSpm 时，对转移功能的抑制或依赖由一个自主性Spm来提供。这两个相
46、反作用的基础是什么呢？一个 dSpm-可抑制等位基因中其外显子内插入了一个dSpm，人们对这个结构会立即产生疑问，一个基因其外显子中插入了一个dSpm 它怎么能表达！这个dSpm 序列能在转录本中利用这个序列的末端被剪切掉。这个剪切事件可以使mRNA 序列中留下一个变化。这样，就解释了它所编码的蛋白性质发生改变的原因。同样某些插入的Ds 也可从转录本中被剪切掉。TnpA 为原称为Spm 因子，它提供了抑制功能。缺陷型因子的存在可能使它所插入的基因表达减少，但并不消失。然而诱导一个具有一个有功能的tnpA 基因的自发因子可能会抑制靶基因的表达。抑制作用是TnpA 结合于缺陷因子中的靶位点的能力产
47、生的，从而阻断了正在进行的转录。一个 dSpm-依赖性等位基因在其附近（而不在基因中）含有一个插入序列。这个插入序列提供了一个增强子，它可以激活位于受体座位的基因的启动子。在 dSpm 因子上的抑制和依赖的存在取决于一个自主因子Spm 因子 tnpA 基因的反式作用产物与这个因子末端的顺式作用位点间的相互作用。因此在蛋白质和此因子末端之间的单个相互作用不是抑制就是激活受体基因上游或者受体基因中的靶座位。无论靶座位点否依赖这种因子。Spm 因子从完全活化到隐蔽在此范围内以各种状态存在。隐蔽因子是沉默的，既不转座也不激活 dspm 因子。一个潜伏的因子可以通过和完全活化的Spm 因子的相互作用而转
48、变或恢复成活性状态。失活是由于在转录起始是附近的序列被甲基化而导致的。果蝇 P因子在杂种不育中起何作用？杂种不育与物种形成有何关系？答：在和M 雌果蝇杂交中P型雄果蝇的任何一条染色体都能导致不育。重组染色体的贡献表明，在每条P 型雄果蝇染色体中的各区域也都导致不育。这表明P 雄果蝇具有大量的P因子（P factors） ，这个因子存在于很多不同的染色体位置上。这些位置在P品系的个体之间也是不同的。而在M 雌果蝇的染色体上都没有这种P因子。通过对杂种不育果蝇的W 突变体的 DNA 作图发现，不育是P 因子的存在所致导的。所有的突变都是由于W 位点插入了DNA 片段。这个插入顺序被称为P 因子（
49、P element） 。杂种不育减少了品种间的杂交，是新种形成途径的一个步骤。如果杂种不育系统是在某些地理位置通过转座产生的。另一些因子可能是在其它某些地理位置产生的不同系统。两个不同区域的果蝇同是两个不同的系统而将产生杂种不育。若这一表现使它们之间杂种不育那么群体将出现隔离，进一步的隔离可能还会发生，多个杂种不育系精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页，共 30 页学习必备欢迎下载统导致它们之间不能交配而形成新种。第 36 章 RNA的生物合成和加工比较四类聚合酶性质和作用的异同（四类聚合酶是：DNA 指导的 DNA 聚合酶，
50、DNA 指导的 RNA聚合酶， RNA指导的 RNA聚合酶， RNA指导的 DNA 聚合酶）答： DNA 指导的 DNA 聚合酶是以 DNA 为复制模板，从将DNA由 5端点开始复制到3端的酶。DNA 指导的 DNA 聚合酶的共同特点是： （1）需要提供合成模板； （2）不能起始新的DNA链，必须要有引物提供3OH； （3）合成的方向都是53（4）除聚合 DNA 外还有其它功能。所有原核和真核的DNA 聚合酶都具有相同的合成活性，都可以在3OH 上加核苷酸使链延伸， 其速率为1000 Nt/min 。加什么核苷酸是根据和模板链上的碱基互补的原则而定的。DNA 指导的 RNA聚合酶（ RNA p