2022年生物化学下册课后习题答案.docx

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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载糖蛋白中寡糖与多肽链的连接形式有几种类型?答:糖蛋白中寡糖与多肽链的,简称糖肽键;糖肽链的类型可以概况为:N-糖苷键型:寡糖链(GlcNAC的 -羟基)与 Asn 的酰胺基、 N-未端的 a-氨基、 Lys或 Arg 的 W-氨基相连; O-糖苷键型:寡糖链(GalNAC 的 -羟基)与Ser、 Thr 和羟基赖氨酸、羟脯氨酸的羟基相连; S-糖苷键型:以半胱氨酸为连接点的糖肽键; 酯糖苷键型:以天冬氨酸、谷氨酸的游离羧基为连接点;N-连寡糖和 O-连寡糖的生物合成有何特点?答:N-连寡糖和 O-连寡糖的生物合成特点分别是N-

2、糖链的合成是和肽链的生物合成同时进行的,而 O-糖链的合成是在肽链合成后,对肽链进行修饰加工时将糖基逐个连接上去的;第 34 章 DNA 的复制和修复生物的遗传信息如何由亲代传给子代?答:在细胞分裂间期,DNA 分子边 解旋边复制,分别以亲代 DNA 的两条母链为模板,以核中游离的脱氧核苷酸为原料,依据碱 基互补配对原就,合成两条子链,它们分别与相应的模板链螺旋化就形成了两个与亲代 DNA 一样的子代 DNA,在生物传种接代的过程中,亲代将复制出的一份 DNA 通过配子传给子代,从 而实现了亲子代间遗传信息的传递;接下来,在子代个体发育的过程中,将利用 DNAgene来指导自身蛋白质的合成,从

3、而表现出与 亲代相像的性状;也有一些生物如某些病毒,是通过将亲代的 递;RNA 复制后传给子代的方式进行遗传信息的传何谓 DNA 的半保留复制?是否全部的DNA 复制都以半保留的方式进行?(双链 DNA 通常都以半保留方式复制; )答: DNA 在复制时第一两条链之间的氢键断裂两条链分开,然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA 链,这样新合成的子代DNA 分子中一条链来自亲代DNA,另一条链是新合成的,这种复制方式为半保留复制semiconservative replication ;并非全部的 DNA 复制都以半保留的方式进行,但双链 DNA 通常都以半保留方式复制;如使 15N 标

4、记的大肠杆菌在 14N 培育基中生长三代, 提取 DNA,并用平稳沉降法测定 DNA密度,其 14N-DNA 分子与 14N-15N 杂合 DNA 分子之比应为多少?答:这两者之比为 1:3;比较 DNA 聚合酶、和性质的异同;意义?DNA 聚合酶和的功能是什么?有何生物学答:在 E.coli 中,共发觉了 3 种 DNA 聚合酶,即 DNA 聚合酶、;DNA 聚合酶是个多功能酶,具有 5- 3聚合功能; 3- 5外切功能以及 3- 5外切功能; DNA 聚合酶与 DNA 聚合酶功能相像,但没有 5- 3外切功能;DNA 聚合酶与 DNA 聚合酶功能相同,但其聚合活性比 DNA 聚合酶高 10

5、00 倍,是E.coliDNA 复制中的最主要酶;DNA 聚合酶和是在 1999 年才被发觉的 ,它涉及 DNA 的错误倾向修复 errorprone repair;当 DNA 受到较严峻损耗时 , 即可诱导产生这两个酶 ,使修复缺乏精确性 accuracy,因而显现高突变率;其生物学意义在于高突变率虽会杀死很多细胞 ,但至少可以克服复制障碍 , 使少数突变的细胞得以存活;名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 30 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载DNA 复制的精确性、连续性和协同性是通过怎样的机制实现的?答: DNA 聚合酶由10 个亚

6、基组成,这些亚基将催化DNA 合成、校对和夹位DNA 等功能有机地组合在一起,保证了DNA 复制的精确性、连续性和协同性;何谓 DNA 的半不连续复制?何谓冈崎片断?试述冈崎片断合成的过程?答: DNA 的双螺旋结构中的两条链是反向平行的,当复制开头解链时,亲代 DNA 分子中一条母链的方向为 5 3 ,另一条母链的方向为 3 5 ;DNA 聚合酶只能催化 5 3合成方向;在以 3 5 方向的母链为模板时,复制合成出一条 5 3 方向的前导链,前导链的前进方向与复制叉的行进方向一样,前导链的合成是连续进行的;而另一条母链仍以 3 5 方向作为模板,复制合成一条5 3 方向的随从链,因此随从链会

7、成方向是与复制叉的行进方向相反的;随从链的合成是不连续进行的,先合成很多片段, 即冈崎片段;最终各段再连接成为一条长链;由于前导链的合成连续进行的,而随从链的合成是不连续进行的,所以从总体上看 DNA 的复制是半不连续复制;DNA 复制时,在滞后链上,较短的 DNA 片段(大约 1000-2000 个核苷酸)是在分段合成引物的基础上,非连续合成的,这些不连续的DNA 片段最先由日本科学家冈崎在电子显微镜下发觉,故称为冈崎片断 Okazaki fragment ;引发体在滞后链上沿 53方向不停的移动 这是一种相对移动,也可能是滞后链模板在移动,在肯定距离上反复合成 RNA 引物; DNA 聚合

8、酶从 RNA 引物的 3,-OH 端合成冈崎片段;DNA 复制时双链是如何解开的?比较类型和类型拓扑异构酶的作用特点和生理功能;答: DNA 复制起始的体外试验说明需要 6 种蛋白 ,Dna A、Dna B、Dna C、组蛋白样蛋白 HU回旋酶及单链结合蛋白 SSB形成起始复合物;Dna A 单体第一结合到复制起始点上 4 个含 9 bp 的重复次序上;然后 2040 个 Dna A 单体结合到复制起始点形成一个核心;在 Dna A 蛋白的作用下位于复制起始点右侧的 3 个含 13 bp 的重复次序开头解链形成开放复合体;Dna B/Dna C 在复制起始区充当了起始的引发体( primoso

9、me );Dna B.Dna C复合体转变为 Dna B六聚物,形成复制叉;Dna B 供应解旋酶( helicase)活性,使 DNA 解旋,可能它识别复制叉上潜在的单链结构,从 13 bp 的重复次序上取代出 Dna A,并开头解螺旋;Dna B 在复制起始区域以很少的量(1 2 六聚物)担负着催化作用;在那儿 Dna B 仍具有激活 Dna G 引发酶的才能;解旋反应仍需要另外两种蛋白,旋转酶(Gyrase)和 SSB(单链结合蛋白) ;旋转酶也就是 Top ,其作用是解旋,即让一条链围着另一条链旋转;如没有这步反应,解开双链就会产生 DNA 的扭曲; SSB可使已形成的单链处于稳固状态

10、;拓扑异构酶(Topo ),将环状双链 DNA 的一条链切开一个口,切口处链的末端绕螺旋轴依据放松超螺旋的方向转动,然后再将切口封起;拓扑酶 I 放松超螺旋不需 ATP参加;拓扑异构酶(Topo ),它的作用特点是切开环状双链 DNA 的两条链,分子中的断端经切口穿过而旋转,然后封闭切口;Topo 在 ATP参加下,将 DNA 分子从放松状态转变为负超螺旋,为 DNA 分子解链后进行复制及转录作好预备;自然双链闭环 DNAcccDNA的比超螺旋 为-0.05,复制时解螺旋酶将双链撑开,假如反应系统中无旋转酶,当比超螺旋达到+0.05 时, DNA 的扭曲张力将阻挡双链解开,此时已解开的双链占

11、DNA 分子的百分数是多少?答:此时已解开的双链占 DNA 分子的百分数是 9.52%;何谓复制体?试述其主要成分的功能;名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 30 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载答:与 DNA 复制有关的酶和蛋白质因子由30 多种,他们在复制叉上形成离散的复合物,彼此协作,进行高度精确的复制,这种结构称为复制体;复制体的主要成分有 ,Dna A、Dna B、Dna C、组蛋白样蛋白 HU回旋酶、单链结合蛋白 SSB、引物合成酶、 RNA聚合酶、 DNA 旋转酶, Dam 甲基化酶以及 DNA 聚合酶等;复制体在 DNA

12、复制叉上进行的基本活动包括:双链的解开, RNA 引物的合成, DNA 链的延长, 切除引物,填补缺口,连接相邻的 DNA 片断,切除和修复尿嘧啶和错配碱基;DNA 的复制过程可分为哪几个阶段?其主要特点是什么?复制的起始是怎样掌握的?答: DNA 的复制过程包括复制的起始、延长和终止三个阶段;(1)复制的起始 引发:当 DNA 的双螺旋解开后,合成 RNA 引物;方向移动(与冈崎片段合成的方向正好相反,而与复制叉移动 引发体沿着模板链 5 3的方向相同) ,移到肯定位置上即可引发 RNA 引物的合成;(2)DNA 链的延长前导链只需要一个RNA 引物,后随链的每一个冈崎片段都需要一个RNA

13、引物,链的延长反应由 DNA pol.催化;复制体沿着复制叉方向前进合成 DNA;DNA pol的 5, 3,外切活力,切除 RNA 引物;DNApol的 5,3,合成活性补齐缺口;DNA ligase,动物、真核由 ATP供能,原核由 NAD 供能;(3)DNA 合成的终止 环状 DNA、线性 DNA,复制叉相遇即终止;DNA 复制的调控主要是起始阶段的调控;原核生物DNA 复制的调控与其生长环境有关,真核生物 DNA 复制的调控与细胞周期蛋白等多种蛋白质因子有关,机制特别复杂,但复制起始点必需全甲基化后复制才能发生;真核生物 DNA 聚合酶有哪几种 .它们主要功能是什么?答:真核生物 DN

14、A 聚合酶有 、 、 、 等五种;真核生物的 DNA 复制是在 DNA 聚合酶 与 DNA 聚合酶 互协作下催化进行的,仍有一些酶及蛋白质因子参加反应;DNA Pol 与引发酶共同起引发作用,然后由 DNA Pol 催化前导链及随从链的合成;在链的延长中,有 PCNA(增殖细胞核抗原)参加,保证连续性 DNA Pol 的性质与 DNA Pol 有相像之处,在有些情形下,它可代替 DNA Pol 起作用,例如在DNA 损耗时,催化修复合成;DNA Pol 是线粒体中 DNA 复制酶;DNA Pol 5 3 外切酶活性可能在切除引物 RNA 中有作用;真核生物 DNA 聚合酶的主要功能见下表:5

15、3 聚合作用3 5 外切作用e + 名师归纳总结 - + 核第 3 页,共 30 页细胞内定位功能复制、引发核修复线粒体- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 复制核学习必备欢迎下载复制 核复制- + + + + + 真核生物染色体 DNA 的端粒有何功能?它们是如何合成的?答:真核生物线形染色体的末端具有一种特殊的结构,称为端区或端粒; 端区结构中有核苷酸重复序列,一般在一条链上为 TxGy,互补链为 CyAx,x 与 y 大约在 1-4 范畴内,人的端粒区含有 TTAGGG重复序列;端区具有爱护 DNA 双链末端,使其免遭降解及彼此融合的功能;端区的平均

16、长度随着细胞分裂次数的增多及年龄的增长而变短,可导致核生物染色体稳固性下降,并导致衰老;其分子机制在于,线形DNA 分子不能从末端核苷酸外合成RNA 引物,如此染色体将逐代缩短;但是在生殖细胞、胚胎细胞和肿瘤细胞中,由于有端粒酶,所以并不显现这种情形;端粒酶是一种由 RNA 和蛋白质组成的酶,RNA 和蛋白质都是酶活性必不行少的组分;可看作是一种反转录酶;此酶组成中的 RNA 可作为模板,催化合成端区的 DNA 片段;端粒酶催化合成端区,在保证染色体复制的完整性上有重要意义;哪些因素能引起 DNA 损耗?生物机体是如何修复的?这些机制对生物机体有何意义?答:一些物理化学因子如紫外线、电离辐射和

17、化学诱变剂均可引起 与功能;然而在肯定条件下,生物机体能使这种损耗得到修复;DNA 损耗,破坏其结构紫外线可使 DNA 分子中同一条链上两个相邻的胸腺嘧啶碱基之间形成二聚体(TT),两个 T以共价键形成环丁烷结构;CT、CC间也可形成少量二聚体(CT、CC),使复制、转录受阻;细胞内具有一系列起修复作用的酶系统,可以除去 DNA 上的损耗, 复原 DNA 的双螺旋结构;目前已知有4 种酶修复系统:光复活、切除修复、重组修复、SOS反应诱导的修复,后三种不需要光,又称为暗修复;1.直接修复1949 年已发觉光复活现象,可见光(最有效400nm)可激活光复活酶,此酶能分解由于紫外线形成的嘧啶二聚体

18、;高等哺乳动物没有此酶;2.切除修复 在一系列酶的作用下,将 DNA 分子中受损耗部分切除,并以完整的那一条链为模板,合成 出切去部分, DNA 复原正常结构;3.结构缺陷的修复:(1)核酸内切酶识别 DNA 损耗部位,在其邻近将其切开;(2)核酸外切酶切除损耗的 DNA;(3)DNA 聚合酶修复;(4)DNA 连接酶连接;4.无嘌呤无嘧啶碱基缺陷或错配脱碱基(N-糖苷酶):甲基磺酸甲酯可使鸟嘌呤第 7 位氮原子烷基化,活化 -糖苷键,造成脱嘌呤作用;酸也能 使 DNA 脱嘌呤;DNA 复制时, DNA 聚合酶对 dTTP和 dUTP 辨论力不高,有少量dUTP 掺入 DNA 链;细胞中的尿嘧

19、啶 -N-糖苷酶可以切掉尿嘧啶;腺嘌呤脱氨形成次黄嘌呤时也可以被次黄嘌呤-N-糖苷酶切掉次黄嘌呤;对于无嘌呤无嘧啶的损耗有两种修复方法:(1)AP 核酸内切酶切开,核酸外切酶切除,DNA 聚合酶修复, DNA 连接酶连接;名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 30 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载(2)插入酶插入正确碱基;5.重组修复切除修复发生在DNA 复制之前,而当DNA 发动复制时尚未修复的损耗部位,可以先复制,再重组修复;在重组修复过程中,DNA 链的损耗并未除去;重组修复至少需要 4 种酶组分;重组基因 recA 编码一种分子量

20、为 40000 的蛋白质,它具有交换 DNA 链的活力; RecA 蛋白被认为在 DNA 重组和重组修复中均起关键作用;recB、 recC基因分别编码核酸外切酶 V 的两个亚基;此外,修复合成仍需要 DNA 聚合酶和连接酶;6.易错修复和应急反应(SOS反应)诱导修复是细胞 DNA 受到严峻损耗或 DNA 复制系统受到抑制的紧急情形下,为求得生存而显现的一系列诱导性修复;SOS反应诱导的修复系统包括防止差错的修复(无差错修复)和易错的修复;防止差错的修复:SOS 反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生,从而加强光复活切除修复和重组修复的才能,这属于防止差错的修复;易错的

21、修复: SOS反应仍能诱导产生缺乏校对功能的DNA 聚合酶,它能在DNA 损耗部位进行复制而防止了死亡,可是却带来了高的突变率,这属于易错的修复;SOS反应是由 RecA 蛋白和 LexA阻遏物相互作用引起的;RecA 蛋白不仅在同源重组中起重要作用,而且它也是 SOS反应的最初发动因子;在有单链 DNA 和 ATP存在时, RecA 蛋白被激活而表现出蛋白水解酶的活力,它能分解 噬菌体的阻遏蛋白和 LexA 蛋白;LexA蛋白(22Kd)很多基因的阻遏物,当它被RecA 的蛋白水解酶分解后就可以使一系列基因得到表达其中包括紫外线损耗的修复基因 uvrA、uvrB、uvrC(分别编码核酸内切酶

22、的亚基)以及 recA 和 lexA基因本身,仍有单链结合蛋白基因 ssb,与 噬菌体 DNA 整合有关的基因 himA、与诱变作用有关的基因 umuDC,与细胞分裂有关的基因 sulA,ruv,和 lon,以及一些功能不清晰的基因 dinA,B,D,F 等;DNA 的修复机制对保证遗传信息在传递过程中的忠实性,连续性具有重要的意义;何谓应急反应 SOS和易错修复?它们之间是什么关系?SOS反应对生物机体有何意义?答:诱导修复是细胞 DNA 受到严峻损耗或 DNA 复制系统受到抑制的紧急情形下,为求得生存而显现的一系列诱导性修复;SOS反应诱导的修复系统包括防止差错的修复(无差错修复)和易错的

23、修复;防止差错的修复:SOS 反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生,从而加强光复活切除修复和重组修复的才能,这属于防止差错的修复;易错的修复: SOS反应仍能诱导产生缺乏校对功能的DNA 聚合酶,它能在DNA 损耗部位进行复制而防止了死亡,可是却带来了高的突变率,这属于易错的修复;易错修复是应急反应 SOS中的一种;SOS反应广泛存在于原核生物和真核生物,会;何谓突变?突变与细胞癌变有何联系?它为生物在极为不利的环境中求得生存供应了机答:基因突变是指由于 DNA 碱基对的置换、增加或缺失而引起的基因结构的变化,亦称点突变;在自然条件下发生的突变叫自发突变,由人工利用物理

24、因素或化学药剂诱发的突变叫诱发突变; 基因突变是生物变异的主要缘由,是生物进化的主要因素;在生产上人工诱变是产生生物新品种的重要方法;依据基因结构的转变方式,基因突变可分为碱基置换突变和移码突变两种类型;名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 30 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载基因突变有可能破坏 DNA 复制和细胞分裂的正常调控机制,引起细胞癌变;DNA 复制时两条链发生错配的概率是否相等?两条链错配修复的概率是否相等?答: DNA 复制时两条链发生错配的概率不相等;两条链错配修复的概率也不相等;为什么引起 SOS反应的化合物通常都是致

25、癌剂?答:由于癌变有可能是通过 SOS 反应诱变造成的,因此能引起 SOS反应的化合物通常都具有致癌作用;试述 Ames 试验的原理;答: BNAmes 等经十余年努力,于1975 年建立并不断进展完善的沙门氏菌回复突变试验,亦称 Ames 试验;该法比较快速、简便、敏锐、经济,且适用于测试混合物,反映多种污染物的综合效应;Ames 试验的原理是:鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium )的组氨酸养分缺陷型(his)菌株,在含微量组氨酸的培育基中,除极少数自发回复突变的细胞外,一般只能分裂几次,形成在显微镜下才能见到的微菌落;受诱变剂作用后,大量细胞发生回复突变,自行合成

26、组氨酸,发育成肉眼可见的菌落; 某些化学物质需经代谢活化才有致变作用,体酶,可补偿体外试验缺乏代谢活化系统之不足;在测试系统中加入哺乳动物微粒鉴于化学物质的致突变作用与致癌作用之间亲密相关,故此法现广泛应用于致癌物的选择;第 35 章 DNA 的重组DNA 重组有何生物学意义?是否可以说没有DNA 重组就没有生物进化?答: DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,称为遗传重组;DNA 重组能快速增加群体的遗传多样性,使有利突变与不利突变分开,通过优化组合积存有意义的信息;DNA 重组参加很多重要的生物化学过程,为 DNA 损耗或自制障碍供应修复机制;某些基因的表达受 DNA 重组的调剂;

27、基因发育过程也受到基因加工的掌握;另外,DNA 重组对生物进化起着关键性作用;可以说没有 DNA 重组就没有生物进化;是分析 DNA 复制 、修复和重组三者之间的关系;答: DNA 复制是 DNA 修复和重组的基础,修复保证了 式之一;DNA 复制的精确性,重组是修复的方DNA 重组可分为哪几种类型?它们的主要特点是什么?答: DNA 重组有 3 种类型,分别是同源重组、特异位点重组和转座重组;同源重组发生是依靠大范畴的DNA 同源序列的联会;重组过程中,两个染色体或DNA 分子交换对等的部分;其特点是:需要重组的蛋白质参加;蛋白质因子对 性要求不高;真核生物染色质的状态影响重组的频率;DNA

28、 碱基序列的特异特异位点重组的特点:重组依靠于小范畴同源序列的联会,发生精确的断裂、连接,DNA分子并不对等交换;转座重组的特点:完全不依靠于序列间的同源性而使一段DNA 序列插入另一段中,但在形成重组分子时往往是依靠于 DNA 复制而完成重组过程;什么是同源重组?它有何功能?名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 30 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载答:同源重组又叫一般性重组,它是由两条同源区的 连接,而产生片段交换的过程;DNA 分子,通过配对、链的断裂和再同源重组的功能是在减数分裂中使四联体某些位置的非姊妹染色单体之间可以发生交换;

29、简要说明 Holliday 模型;答:一对同源染色体有 4 个染色单体,每一染色单体是一条 DNA 双链,所以一对同源染色体有 4 条 DNA 双链;在晚偶线期和早粗线期染色体配对时,同源非姊妹染色单体的 DNA分子协作在一起;核酸内切酶识别 DNA 分子上的相应断裂点(breakage point ),在断裂点的地方把磷酸二酯键切断,使两个非姊妹DNA 分子各有一条链断裂;两断链从断裂点脱开,螺旋局部放松, 单链交换预备重接;在连接酶的作用下,断裂以交替方式跟另一断裂点相互联结,形成一个交联桥(cross-bridge),这结构又称 Holliday 中间体( Holliday interm

30、ediate );这交联桥不是静态的,可以靠拉链式活动沿着配对DNA 分子向左右移动,其中互补碱基间形成的氢键从一条亲本链改为另一条亲本链,于是移动后在两个亲本 DNA 分子间留下较大片段的异源双链 DNA,这种结构又称为 Holliday 结构; 随后这交联桥的两臂围绕另外两臂旋转成为十字形, 并在交联部分断开, 排除交联体, 复原为两个线性DNA 分子,即形成 Holliday结构的异构体; 断开方向或沿东西轴进行,或沿南北方向进行;如沿东西方向切断,即上连、下连,就产生的两个异源双链的两侧基由于AB 和 ab,仍保持亲代类型, 如沿南北方向切割,即左连、 右连,就两侧基由于Ab 和 aB

31、,产生两个重组类型,但不论是那种情形,即 Holliday结构断裂是否导致旁侧遗传标记的重组,它们都含有一个异源双链DNA 区,有关的两核苷酸区段分别来自不同的亲本,从而由原先的 G-C、A-T 配对变为 G-A、C-T非配对;细菌基因转移有哪几种方式?它们有何生物学意义?答:细菌的基因转移方式有转化、转导、溶原性转换、接合和原生质体融合等五种方式;细菌可通过细胞间基因转移,并通过基因重组以适应随时转变的环境;参加同源重组主要的酶和帮助因子有哪些 .简要说明其作用机制;答:参加同源重组主要的酶和帮助因子有:Rec A蛋白、 Rec BCD酶、 Ruv A 蛋白、 Ruv B 蛋白、 Ruv C

32、 蛋白、 DNA 聚合酶和 DNA 连接酶;Rec A 蛋白,能促使两个同源 DNA 分子的碱基配对,形成杂种分子;Rec A蛋白第一与单链DNA 结合(约每分子可结合个核苷酸),形成一条 DNA蛋白质细丝(需消耗 ATP);于是Rec A蛋白即被活化而可将双螺旋解旋和分别,同时妄想将它结合的单链与被解旋区域退火,如此连续下去,直到找到互补次序;只要一旦有一小部份被真正“ 退火”,ATP 供应的能量就会连续促使配对反应趋于完成,其方向是 (单链部分) ;当新的杂交双链形成时,Rec A蛋白即从原先的单链掉下来;Rec BCD酶第一结合在又螺旋的游离端上,然后利用ATP供应的能量沿着双螺旋向前推

33、动;在其行经之处, 一路上解旋并又复旋;但由于解旋的速度快于复旋速度,所以解旋的双链区就越来越长;Ruv A 蛋白识别 Holliday 联结体的交叉点, Ruv A 蛋白四聚体结合其上形成四方平面的构象,使得分支点易于移动,Ruv A 蛋白仍帮忙 Ruv B 蛋白六聚体环结合在双链 DNA 上; Ruv B是一种解旋酶,可推动分支移动;同源重组最终由 Ruv C可将 Holliday 联结体切开,并由 DNA 聚合酶和 DNA 连接酶进行修复合成;何谓特异位点重组?其作用特点是什么?名师归纳总结 答:位点专一性重组这类重组在原核生物中最为典型;它发生在特殊的序列对之间,这种第 7 页,共 3

34、0 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载重组依靠于小范畴同源序列的联会;在重组对之间的短的同源序列是供重组蛋白识别用的,它对同源性的要求不象同源性重组那么重要,蛋白质和DNA、蛋白质和蛋白质之间的作用更为关键;重组时发生精确的切割、连接反应,DNA 不失去,不合成;两个 DNA 分子并不交换对等的部分,有时是一个 DNA 分子整合到另一个 DNA 分子中,因此又将这种形式的重组称为整合式重组 integrative recombination ;例如 l 噬菌体 DNA 通过其 att 位点和大肠杆菌DNA 的 attB 位点之间专一

35、性重组而实现整合过程;在重组部分有一段 15 bp 的同源序列, 这一同源序列是重组的必要条件,但不是充分条件,仍须位点专一性的蛋白质因子参加催化;这些蛋白质因子不能催化其他任何两条不论是同源的仍是非同源序列间的重组,这就保证了l 噬菌体 DNA 整合方式的专一性和高度保守性;这一重组不需要 说明 噬菌体 DNA 的整合和切除过程;RecA蛋白质的参加;答:这是一种特异位点重组,其基本过程如下:attB 由称为 BOB的序列组成,而 attP 由POP组成; O 是核心序列,是 attB 和 attP 所共同的;而其两侧的序列是 B,B和 P,P ,被称为臂;噬菌体 DNA 是环状的,重组时被

36、整合入细菌染色体中,成为线性序列;前病毒的两侧是两个新的杂种 att 位点,左侧称为 attL,由 BOP组成,而右侧为 attR,由 POB组成;可见,整合和切出并不涉及相同的一对序列:整合需要识别attP 和 attB,而切出要求识别 attL 和 attR;因此,重组位点的识别就打算了位点专一性重组的方向 整合或切出;虽然位点专一重组是可逆的,但反应的方向取决于不同环境条件,这对打算噬菌体的生命力周期是特别性重要的;整合的;整合酶和IHF 对整合和切出都是是必需的,而切出酶在掌握反应方向上起重要作用 它对切出是必需的,但能抑制整合; 在切除的环化过程中假如发生错误, 前噬菌体可能失去某些

37、基因而代之以其相邻的细菌基因;由于整合位点处于细菌染色体的 gal 和 bio 基因之间,切除过程中噬菌体 DNA 有时会带走 gal 基因,生成 gal(或称 db ); gal 或 bio 转导(感染)新的宿主经常常把gal 或 bio 基因带到新的宿主中去,所以把 gal 或 bio 这些带有某些宿主基因的噬菌体称为转导噬菌体(transducing phage);何谓鞭毛相转变?它如何掌握鞭毛基因的表达?答:鼠伤寒沙门杆菌由鞭毛蛋白打算的H 抗原有两种 ,分别为 H1 鞭毛蛋白和H2 鞭毛蛋白;在单菌落的沙门氏菌中常常显现少数呈另一H 抗原的细菌 ,这种现象称为鞭毛相转变;沙门氏菌 H

38、 片段倒位打算鞭毛相转变 hix 为反向重复序列 ,它们之间的 H 片段可在 Hin 掌握下进行特异位点重组 倒位 ;H 片段上有两个启动子 P,其一驱动 hin 基因表达 ,另一正向时驱动 H2 和 rH1 基因表达 ,反向 倒位 时 H2 和 rH1 不表达;试总结免疫球蛋白基因重组的规章;答:免疫球蛋白由两条轻链(L 链)和两条重链 H 链组成,它们分别由三个独立的基因族编码,其中两个编码轻链 链和 链,一个编码重链;重链基因的 V-D-J 重排和轻链基因的 V-J重排均发生在特异位点上;免疫球蛋白基因重组的规章如下:a) 链的重组:每个 C片段前有 J跟随;只在 V 和 J-C之间发生

39、一次重组 V 和 J 的重组 ;b) 链的重组:一条 轻链也由两部分组装而成,但在 C 基因的组织过程中有所不同;一组 5 个 J 片段包含 500-700 个碱基对并被 C 外显子上的一个 2-3kb 的内显子所隔离;在鼠中,中心 J 片段是无功能的( J3);一个 V 片段可以被连接到任何一条 J 片段上去;无论用的是哪个 J 片段,都可以成为原始可变外显子的终端部分;整合 J 片段左边的每个 J片段都会缺失掉;而右边的J 片段都会被作为可变和不行变外显子之间的内显子的一部分;名师归纳总结 c 重链基因 V、D 和 J片段的重组 : 重链的可变区由V 和 J基因及第三个D 基因片段编码;第

40、 8 页,共 30 页V-D-J连接由两个阶段组成,第一个阶段是D 片段和一个JH片段重组,然后是一个VH片段- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载再和 DJH片段重组;这个重构导致了邻近的CH 片段(包含几个外显子)的表达;重组只发生在间隔为 12 bp 与间隔 23 bp 的不同信号序列之间,称为 12-23 规章;免疫球蛋白基因重组过程中产生的 P 核苷酸和 N 核苷酸是如何来的?它们产生的意义和需要付出的代价是什么?答:免疫球蛋白基因在重组过程中,RAG1/RAG2 复合物切开七核苷酸与基因接头处的一条链,形成 3, OH、5,

41、P 未端;游离的 3, OH 攻击 另一条链的酯键,在基因片段末端形成发夹结构;然后复合物进一步将发夹结构切开,单链切开的位置往往不是原先通过转酯反应连接的位置,多出的核苷酸与末端序列相同,但方向相反, 称为 P 核苷酸; 末端可以被外切酶切除一些核苷酸,也可以由脱氧核苷酸转移酶外加一此核苷酸,称为 N 核苷酸;在接头处随机插入或删除核苷酸可以增加抗体基因的多样性,是 3 的倍数,就将转变阅读框架而使基因失活;何谓转座重组?它有何生物学意义?但假如插入或删除核苷酸数不答:由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座重组;转座重组的生物学意义有:可引起基因突变插入或切离;转变染色质的结构 (缺

42、失、倒位等);可以插入新基 (ampR、terR 等);在靶序列上引入新的转座子序列,原先序列保持不变;在靶序列上造成同向重复 序列;产生新的变异,有利于进化;细菌的转座因子有几种?它们的结构有何特点?答:微生物的某些 DNA 片段作为一个独立单位可在染色体上移动,此种移动甚至可发生在不同种细胞之间;这种可移动的DNA 片段称之为转座因子;细菌的转座因子有两种类型:插入序列 insert sequence ,IS和转座子 transposon,Tn;插入序列不含任何宿主基因,是最简洁的转座子,它们是细菌染色体或质粒 DNA 的正常组 成部分;全部插入序列的两端都有反向重复;转座子除编码转座功能

43、有关的基因外仍携带抗性或其它标记基因;复合因子;何谓 Shspiro 中间体?何谓共整合体?它们之间有何关系?按结构可分为组合因子和答:转座酶识别转座子的末端反向重复序列并且在其 3,端切开,同时在靶部位交叉切开单链,它的 5,端突出末端与转座子的 3,端连接,形成 Shspiro 中间体;在复制转座过程中,由转座酶分别切割转座子的供体和受体DNA 分子,转座子的末端与受体 DNA 分子连接,并将转座子复制一份拷贝,由此生成的中间体即共整合体 cointegrat ,;共整合体可以懂得为是一种特殊的 Shspiro 中间体;为什么真核生物转座因子可分为自主因子和非自主因子?它们转座的生物效应是否相 同?答:真核生物由于有核存在,其转录和翻译在时空是的隔开的;因此,真核生物细胞内只要 存在转座酶

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