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1、采样与送样方案牛羊脑样品既可以按甲醛固定处理，也可以按冷冻保 存处理，然后运送至国家认定的检测实验室进行检测。具 体方法见“方案一：新奇牛羊脑样品的采集与运送方案 和“方案二：甲醛固定的牛羊脑样品的采集与运送方 案。参考实验室建议采纳方案一进行采样和运送，该方 案也是当前国际上广泛采纳的方案。方案一：新奇牛羊脑样品的采集与运送方案一、专用采样工具采集牛羊脑样品的特点国家疯牛病病参考实验室依据国际上通用的牛羊脑采 样工具设计了我国的牛羊脑样品采样工具。该工具为塑料 制品，呈勺子形状，前端带有锐利的齿，便于切断脑组 织。这种采样方法有着非常明显的优点，如使用简单、节 约本钱、工作效率高、机动性强、
2、采样平安。二、采样物品打算数码照相机或数码摄像机）、专用的采样勺一把 勺子最多可以采集三份样品，牛脑采样勺为蓝色，羊脑采 样勺为黄色、医用剪刀一把，长10cm左右）、一次性 手套、橡胶检查手套即乳胶手套、口罩、工作服、样 品杯可向参考实验室索取、记号笔、冰袋至少3块 大号的冰袋、大号的透明胶带、带盖泡沫箱有厚度， 无破损，大小适中、签字笔或圆珠笔、采样单、吸水纸 等。三、采样步骤1 .如果有比较典型的疯牛病疑似牛，那么要拍照或摄像 留下证据。每市至少要对20%的临床疑似牛进行拍照或摄 像，并且临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临床 疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方法弄清该病牛的 其他情况，
3、问询内容可以包含喂养历史、来源、流动等情 况。这些证据材料必须存档和备份，运送样品时一并寄送 至检测实验室。2 .每次采样至少有两人在场，其中一人戴好一次性手 套和橡胶检查手套，其它一人特意登记和开启样品杯而不 需要戴手套。通过观察牙齿检查牛羊的年龄，大于3岁的 牛第二对X门齿长出）和大于18月龄的羊第一对X门 齿长出）才可以采样，但如果该动物为疯牛病或痒病风险 动物那么没有年龄限制。3 .在平坦地面倒置牛/羊头，即牛/羊头的两角和鼻子 靠地放置。同时，其它一人开始填写采样单，并且在样品 杯上标记上对应的样品编号以县/市名+序号，如青岛1 号。一个样品杯只能装一个脑样品。4 .在枕骨大孔处用剪
4、刀剪开脑硬膜，目的是便于插入 采样勺。然后用一个手指伸入枕骨大孔中，沿着延脑延 髓）转一周，目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血 管，以便于脑组织顺利挖出。5 .从延脑腹侧也即勺子从枕骨大孔的上面进入）将 采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁，以免损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5-7cm （采羊脑时插入深度约为4 cm）,然后向上一扳勺子手柄，同时往外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。注意：尽量保护好延脑三叉口处脑闩部的组 织的完整性。6 .将脑组织放入编好号的样品杯中，拧紧杯盖，然后 放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明胶带将泡沫箱的盖子 绑紧。注意：采好的样品必须在5
5、小时之内放入冰柜中冷冻 上，以防腐败；样品至少要冷冻24小时才能往疯牛病检测 实验室运送。四、样品运送打算好带盖的结实的泡沫箱，该泡沫箱必须无任何破损, 并且大小适中依据样品的量来决定）。先在泡沫箱的底部铺 上一层吸水纸，之后放入冷冻好的样品，然后在侧面放入几 块冷冻好的冰袋，最后在样品的上面放入几块冷冻好的冰袋, 盖紧箱盖。用大号的透明胶带封好箱口，再横向打好包，箱 子外面用记号笔写上“易碎勿压以及向上的“箭头等字 样，然后由市动物疫病预防操纵中心统一运送到国家疯牛病 参考实验室中国动物卫生与流行病学中心），并确保4天之 内运送至检测实验室。提示：（一这种包裹最好通过航空途径运送或由专 人运
6、送，并切记要注明“易碎勿压。二切记在采样单上写明送样人及其联系方法，样品检测完后实验室要出 具检验汇报并寄给送样人。方案二：甲醛定的牛羊脑样品采集与运送方案一、材料1 .数码照相机或数码摄像机）、采样单、复写纸和 圆珠笔或铅笔2 .医用胶布用于捆装有样品的纱布，并在其上写上 样品编号）.电动骨锯或采样勺、骨钳、斧头3 .解剖刀、剪刀、乳胶手套.纱布、棉线、密封塑料桶容积不少于5000ml4 .固定液：即10%福尔马林甲醛生理盐水氯化钠8. 5g；水900ml； 40%福尔马林（甲醛）100ml 二、采样步骤一如果有比较典型的疯牛病疑似牛，那么要拍照或 摄像留下证据。每市至少要对20%的临床疑似
7、牛进行拍照或 摄像，并且临床疑似牛的其他材料如档案等。采集临 床疑似牛时，采样人员还需要通过问询等方法弄清该病牛 的其他情况，问询内容可以包含喂养历史、来源、流动等 情况。这些证据材料必须存档和备份，运送样品时一并寄 送至检测实验室。二填写采样单依据实际情况，按采样单要求认真填写。采样地点相 同的样品可以登记在同一张采样单上。（三）取样.电锯采样法1）用电锯沿两牛角根部到枕骨大孔上边缘的方向将 牛颅腔翻开。2）用手术刀将脑膜切开，骨钳翻开颅腔，然后把脑 神经和脑血管切断。3取出整个脑组织包含大脑、小脑和脑干间脑、 中脑、脑桥和延脑；注意千万不要把脑干损坏。（4将每头牛的脑组织用纱布松松地裹住（
8、纱布简单 透水），千万不能紧，肯定要松，然后将写有编号名称的医 用胶布用圆珠笔或铅笔将编号写在上面，编号：地名+序 号+样品类别名，如“青岛市10号牛）用棉线栓在纱布 口处，注意不让胶布脱落。处理好后放入10-20倍体积10% 福尔马林生理盐水中固定一周。注意标签编号与采样单的 编号相对应。5用新的福尔马林生理盐水更换旧的固定液，密封 在塑料桶中，桶外贴上桶中全部牛脑的编号，以便我们处 理牛脑时不开桶盖便可知桶中的牛脑情况。每个塑料桶可 依据大小放置相应数量的牛脑。1 .采样勺采集法11打算专用的采样勺一把或二把便可）、医用剪 刀一把）、一次性手套、橡胶检查手套即乳胶手套 以及其他采样用品如采
9、样单等。（2戴好一次性手套和橡胶检查手套，特意登记的人 员不需要戴手套。通过观察牙齿检查牛的年龄。3在平坦地面倒置牛头，即牛头的两角和鼻子靠地 放置。14）在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜，目的是便于插 入采样勺。然后用一个食指伸入枕骨大孔中，沿着延脑转 一周，目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血管，以 便于延脑的取出。15）从延脑腹侧（也即勺子从枕骨大孔的上面进入 将采样勺插入枕骨大孔中，插入时采样勺要紧贴枕骨大孔 的腔壁，以预防损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5- 7cm采羊脑时插入深度约为4 cm）,然后向上一扳勺子手 柄，同时往外抠出脑组织和勺子，延脑便可完整取出。6其余步骤见1中的4
10、和（5）。注：对于临床疑似牛羊，采下脑后，从脑中线一分为 二，一份用于甲醛固定，另一份用于一202冷冻并在低温 下运送至参考实验室。2 .样品的包装与运送1独将采样单邮寄给检测实验室，切不可与样品一 起邮寄，目的是预防采样单被污染。2将固定好的牛脑放在几个大的带内盖的塑料桶中 密封，注意每个牛脑都随身带有一个唯一的编号，桶外壁 上也标明桶内的全部牛脑编号。运送时桶里的固定液可以不按10-20倍体积的量，而保存适当的量便可，适当的量 是以浸没牛脑为准，不过运送时必须更换成新的固定液。3）运输时，将装有样品的塑料桶用木架子固定好， 以防运输途中颠倒。4）在木架子外面加两张不干胶标签，一张注明样品 名称、采样单位与地址及联系 ，另一张注明放置方 向、小心、易碎和切勿倒置等字样。5样品由专人专车运至国家疯牛病参考实验室中国 动物卫生与流行病学中心。