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1、一、实验目的1、熟悉HPLC仪的基本结构,初步掌握其使用方法；2、通过实验，加深对色谱分离分析原理的理解，了解最佳实验条件的选择；3、掌握依据保留时间定性和归一化法定量的分析方法。流程图流程图六通阀六通阀紫外检测器紫外检测器高压输液泵高压输液泵三、仪器和试剂1.高效液相色谱仪（LC-200)、C-18烷基键合相柱2.紫外检测器（254nm）3.样品：苯、萘、甲苯的混合物4.纯苯、萘、甲苯（均为色谱纯、各含10微克/L的正己烷溶液）5.流动相：甲醇：H2O为83：17四、实验步骤1.流动相的准备（配制、过滤、超声波脱气）。2.苯、萘、甲苯纯物质保留时间的测定。3.混合物的分析。五、数据及处理1、
2、记录实验条件：色谱柱与固定相流动相与流量进样量2、测量各色谱峰中苯、萘，甲苯等的保留时间tR及相应色谱峰的半峰宽W1/2,计算各对应的理论塔板数n、分离度R等（也可用软件直接操作）六、思考题 高效液相色谱采用3-10微米的固定相有何优点，同时它有给实验带来什么问题，如何克服？ 若实验中的色谱峰无法完全分离，应如何改善实验条件？ 高效液相色谱仪由哪几大部分组成？4.预测本实验三种物质的流出顺序。七 、讨论学习1、什么叫做程序升温？什么叫梯度洗脱？2、如何选择最佳的实验条件？3、紫外光度检测器是否适用于所有的有机化合物，为什么？4、何谓反相键合相色谱？何谓正相键合相色谱？ 八、拓展学习1、探讨液相色谱分离分析的特点和应用？试比较气相色谱法与高效液相色谱法的相同点和区别。2、何谓化学键合相色谱？请查阅资料了解C18键合固定相的制备与性能特点。