免疫实验二:沉淀反应与溶血试验-陈玮琳、翁莉霞.ppt

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1、医学免疫学实验,实验二,(一)沉淀反应1、单向琼脂扩散试验(示教)2、双向琼脂扩散试验3、对流免疫电泳试验(二)补体参与的免疫反应1、溶血反应2、补体结合试验(原理),一定条件,Ag、Ab比例合适,(一)沉淀反应,可溶性Ag+Ab沉淀物,沉淀反应可在溶液中进行,也可在琼脂等凝胶中进行,1、单向琼脂扩散试验(定量),2、双向琼脂扩散试验(定性或半定量),Ag,Ab,Ab,?,Ag,Ab,?,Ag,Ab,?,Ag,:标本中无Ag,:标本中有Ag(相同抗原?),(在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线),标本,阳性对照,Ab,?,Ag,Ab,?,Ag,Ab,?,Ag,:标本中无Ag,:标本中有Ag(相同抗

2、原),标本,阳性对照,2、双向琼脂扩散试验(定性)(请按照实验指导讲义方法进行操作),Ab,Ag,Ag,?,?,?,?,Ab,?,Ag,1.Makeaagarplate(withoutAborAg),2.Punchwells,Addsamples:Anti-AFPpositivecontrol(AFP)Testsample(AFP?),Ab,Ag,?,Ab,?,Ag,Ab,?,Ag,:noAg(AFP)insampleserum,:sameAg(AFP)insampleserum,Result(1):,4.incubationandobserveresults,:noAg(AFP)insamp

3、leserum,:sameAg(AFP)insampleserum,Ab,Ag,Ag,Ag,Ag,?,?,?,?,Ab,Result(2):,sampleserum(AFP?),AFP,(positivecontrol),Anti-AFP,Ab,Ag,Ag,?,?,?,?,sampleserum(AFP?),Anti-AFP,Result(3):,Ab,?,Ag,AFP,(positivecontrol),明天下午看结果,,3、对流免疫电泳原理图:,Ab,Ag,pH8.6,电泳力:电渗力:合力:运动方向:,14,对流免疫电泳检测方法:,Ab,阳性对照(Ag),待测标本(?Ag)(有沉淀线:有Ag;无沉淀线:无Ag),?,对流免疫电泳检测方法(加样图):,Ab(抗AFP),阳性对照(Ag)(阳性血清,含AFP),待测标本(?Ag,?AFP)(有沉淀线:有Ag,AFP;无沉淀线:无Ag,无AFP),?,(二)补体参与的免疫反应1、溶血反应,补体SRBC+AbSRBC-Ab溶血(溶血素),请按照实验指导讲义方法进行操作2人/组注意观察溶血现象请分析:为何第3、4管不溶血,分别缺什么成分?,2、补体结合试验(检测原理),?,补体,Ab,?,Ab,补体,反应系统(待测系统),指示系统,溶血素,溶血素,SRBC,SRBC,有Ag,无Ag,不溶血,溶血,(标本中有Ag),(标本中无Ag),

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