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1、川北医学院检验系临床检验免疫学实验大纲临床免疫学和免疫检验实验教学大纲 (供五年制检验本科用)医学检验系临床免疫学和免疫检验教学组2007-01-01前 言临床免疫学和免疫检验是医学检验专业的一门重要专业课,本课程力求培养学生具有较扎实的理论基础和临床实践技能,能适应社会实际临床工作的需要。临床免疫学和免疫检验实验课的宗旨是让学生理论结合实践,以实际工作中常用检验项目为基础有选择性安排好实验课,对实验课内容所测样本来源指教师要有意安排些临床病人阳性血样及有干扰的特殊样本,让学生在实验中多思考多总结多观察,以激发学生兴趣,培养学生的应用思维能力,为将来临床实验工作打下良好的基础。临床免疫学和免疫
2、检验实验课的教学环节,主要包括技能的培训,掌握实验方法、实验原理、仪器使用等各环节的注意事项,与临床疾病相结合对实验结果进行分析,掌握室内质控的目的和意义。在实验过程如有失利找出失败的原因,明确纠正方法,客观书写实验报告,严禁造假。通过实验课的考核了解学生掌握技能的程度,实验课的考核重在实验课课堂中,认真负责的态度是根本,熟练的技能是基石,教师应并重学生各方面的表现给分。在临床检验免疫学课程中,实验课占本学科总成绩的4,即总分40分,学生必须完成实验考核并达到24分以上方能参与理论考核。课程总学时学时分配:临床免疫学和免疫检验总学时为75学时,其中理论课40学时,实验课35学时实验内容及要求实
3、验一直接凝集实验目的要求:本实验主要锻练学生动手操作能力,理解阴性、阳性对照设置,标本连续倍比稀释等方法的掌握,引导学生认真观察实验结果。熟练掌握玻片法和试管法凝集试验的原理,掌握其方法和临床意义。实验内容:1.不加热血清反应素试验()2.肥达氏反应(试管法)学 时:2学时实验二单向/双向免疫扩散技术实验目的:本试验主要是让学生认识一种基本的免疫学方法,熟练掌握单扩/双扩实验的原理,了解操作方法。正确理解抗原抗体反应的一些基本特性,理解沉淀反应原理及判读方法。实验内容:人血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA测定学 时:3学时实验三 ELISA实验的配液、包被目的要求:让学生自己动手,从基础的试
4、验方法做起,了解抗体或抗原包被的过程,培养学生认真严谨的试验习惯。掌握实验液体配制的正确方法和操作,从实验的细小环节入手使实验结果准确可信。实验内容:乙肝表面抗原测定用包被孔制备 (包被抗体)学 时:3学时实验四ELISA乙肝两对半测定目的要求:验证“实验三 ”中自制的包被孔,了解在试验中影响实验结果的干扰因素,如类风湿因子、补体、异嗜性抗体、治疗性抗体、自身抗体、溶菌酶、磷脂、药物、小分子、溶血、细菌污染、标本贮存时间过长、凝固不全、反复冻融等。培养学生认真严谨的试验习惯和细心观察能力,提高学生生物安全防护意识。熟练掌握ELISA原理、方法和应用,掌握实验中仪器使用和正确判断结果。掌握双抗原
5、或双抗体夹心法试验原理及两种方法的区别,掌握竞争法试验原理及结果判断。实验内容:1.乙肝两对半测定(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)2用“实验三”中自制的包被孔测定HBsAg学 时:3学时实验五免疫印迹及胶体金试验目的要求:让学生理解免疫印迹试验的基本原理,了解金免疫试验方法和结果的观察,了解反应特点,比较两种实验的异同。熟练掌握免疫印迹及胶体金试验的原理,了解本次实验操作程序和临床意义实验内容:1.人绒毛膜促性腺激素试验()(胶体金法)2.抗可提取性核抗原(ENA)的抗体测定(印迹法)学 时:3学时实验六 外周血单个核细胞分离及细胞活力测定目的要求:掌握人外周血单
6、个核细胞分离计数原理及活力测定的原理。熟悉实验步骤及影响因素。实验内容:人外周血单个核细胞分离、计数、细胞活力鉴定学 时:3学时实验七 巨噬细胞吞噬功能检测及小鼠肝细胞组织片制备目的要求:培养学生处理小动力物的能力,掌握巨噬细胞功能测定的原理和方法,掌握组织片的制备和固定保存技术,同时为后续实验(实验八、实验九)准备鼠肝片。实验内容: 1小鼠巨噬细胞吞噬功能检测(体外法)2小鼠肝细胞组织片制备、固定及保存学 时:3学时实验八 酶免疫组织化学技术目的要求:掌握酶免疫组织化学技术的基本原理、技术应用。引导学生设计免疫组织化学实验方法,理解实验中阴阳性对照设置的意义,了解酶免疫组织化学技术与固相酶免
7、疫技术的异同。实验内容:酶免疫组织化学法检测抗核抗体(ANA)学 时:3学时实验九间接免疫荧光技术目的要求:让学生理解间接免疫荧光技术的实验特点,了解间接免疫荧光技术与酶免疫组织化学技术的异同。掌握免疫荧光技术的基本原理,熟悉荧光显微镜的操作使用和间接免疫荧光抗体法的技术流程。实验内容:间接免疫荧光法测抗核抗体(ANA)学 时:3学时实验十 综合实验设计及实验技能考核目的要求:开发学生综合应用知识的能力,最后通过教师点评增强学生理论联系实际的能力;考查学生实验基本技能,了解学生对技术操作要领的掌握程度。综合实验要求科学有据。实验内容:教师指定设计题目考核内容:设计方案。试验前的准备包括样本、试
8、剂、洗液、加样器、吸头等实验用品。学生试验过程(操作步骤、判断结果),最终报告(结果分析、注意事项)。最后给分标准、实验课占本专业的4即4分,实验课出勤占10分,实验课完成情况占20分,实验课考核成绩占分。学 时:6学时参考教材和参考书目:1临床免疫学和免疫检验实验指导自编2全国临床检验操作规程第三版 叶应妩 王毓三 申子瑜 2006年11月第三版第1次印刷课时分配实验名称学时实验一直接凝集实验2实验二单向/双向免疫扩散技术3实验三 ELISA实验的配液、包被3实验四ELISA测两对半3实验五免疫印迹及胶体金试验3实验六 外周血单个核细胞分离及细胞活力测定3实验七 巨噬细胞吞噬功能检测及小鼠肝细胞组织片制备3实验八 酶免疫组织化学技术3实验九间接免疫荧光技术3实验十 综合试验设计及技能考核6现场见习3总学时35第6页