检验科生化室操作规程.docx

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1、检验科生化室操作规程ISO15189质量管理体系范本文件第五册生化室作业指导书文件编号：XXX-3-SF-0161第A版生效日期：2006年8月8日XXX人民医院检验科目录修订页血清总胆红素(T-BIL)测定1.实验原理血清中的胆红素分为直接结合胆红素和间接未结合胆红素。大多数方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法胆红素测量法1，一些改进的方法已被用来增进反响。这些改进的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反响，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一种溶剂，如外表活性剂后才能进行反响。申能总胆红素试剂是改进的重氮法。使用一种稳定的重氮盐，2,4-二氯苯胺重氮盐DCA，与胆红素反响，

2、构成红色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。胆红素+DCA红色偶氮化合物外表活性剂2.标本：2.1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3.标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4.标本运输：常温条件下避光保存运输。5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6.实验材料6.1试剂：申能总胆红素试剂盒14108171701试剂1试剂26.1.1试剂组成试剂1：664ml磷酸缓

3、冲液40mmol/L氯化钠9g/L外表活性剂,稳定剂适量试剂2：616ml2,4-二氯苯胺重氮盐1mmol/L盐酸30mmol/L外表活性剂适量6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与储存试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，假如接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2校准品：使用Dia

4、Sys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件。8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件。9.检验结果的判定与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判定能否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方

5、法：以TruCalU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。手工测定计算方法为：Au总胆红素(mol/L)=校准液浓度As12.参考值范围：婴儿：出生24小时内150mol/L出生第2天22-193mol/L出生第3天12-217mol/L出生第46天1.7-216mol/L儿童：一个月3.4-17mol/L成年人：1.7-21mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差异。根据好的实验室经历，每个实验室应建立本人的参考值。13.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白

6、构成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血肝前黄疸、本质的肝损伤肝性黄疸和胆管堵塞肝后黄疸都会导致血液胆红素增高，构成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增加，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因而能够根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14.操作性能14.1线性范围：1.2513mol/L14.2精细度：精细度的评估是根据NCCL

7、S推荐的标准方法5，AU1000批内精细度小于3%或SD0.07，总精细度小于5%或SD0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。T-BIL检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=1.00x-0.00mol/L；r=1.000。14.4灵敏度：本试剂的检测限为1.2mol/L。14.5病人结果可报告范围：1.2513mol/L15.超出范围结果处理：本法线性上限为513mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.病危报警值的处理当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/L时，在经过复查等确认手段处

8、理后应及时向临床主管医生汇报。17.方法局限性17.1本法线性上限为513mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。18.弥补措施：当仪器发生故障时，迅速联络仪器厂家进行维修。19.参考文献1.ThomasLed.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.192-202.2.Tolman

9、KG,RejR.Liverfunction.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.1125-77.3.RandRN,diPasquaA.Anewdiazomethodforthedeterminationofbilirubin.ClinChem1962;6:570-8.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中采集后按（检验科废物处置管理规定）执行。血清直接胆红素D-BIL测定1.实验原理直接胆红素与2,4-二氯

10、苯胺重氮盐构成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。2.标本：2.1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。3.标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4.标本运输：常温条件下避光保存运输。5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6.实验材料6.1试剂：申能总胆红素试剂盒：14108271701试剂试剂26.1.1试剂组成试剂1：1664mlEDTA-Na20.07mmol/L氯化钠6.6g/L氨基磺酸70mmol/L试剂2：616ml2,4

11、-二氯苯胺重氮盐0.09mmol/L盐酸130mmol/LEDTA-Na20.02mmol/L6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与储存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。假如接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校

12、准品和质控品.SOP文件6.3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判定与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判定能否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法以TruCalU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠

13、的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。手工测定计算方法为：Au直接胆红素(mol/L)=-校准液浓度As12.参考值范围：6.8mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差异。根据好的实验室经历，每个实验室应建立本人的参考值。13.临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白构成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血肝前黄疸、本质的肝损伤肝性黄疸和胆管堵塞肝后黄疸都会导致血液胆红素增高，构成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由

14、于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增加，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因而能够根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14.操作性能14.1线性范围：1.7171mol/L14.2精细度：精细度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精细度小于4%或SD0.04，总精细度小于5%或SD0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。14.3方法学比拟：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对85个样品进行DBIL检测，将检测结果

15、作方法学比拟，其统计结果如下：y=0.95x+0.68mol/L；r=0.995。14.4灵敏度：1.7mol/L。14.5病人结果可报告范围：1.7171mol/L15超出范围结果处理本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.病危报警值的处理无。17.方法局限性17.1本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。血红蛋白浓度0.50g/

16、L将产生干扰。18.弥补措施：当仪器发生故障时，迅速联络仪器厂家进行维修。19.参考文献：Tietz,N.W.(Ed),FundamentalsofClinicalChemistry,3rdEdition,W.B.Saunders,1987.VandenBergh,A.andMueller,P.,BiochemZ,77:90,1916NCCLS,InterferenceTestinginClinicalChemistry,EP7-P,1986.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClinicalLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995

17、.NCCLS,EvaluationProtocolEP5-T2,1992.Rand,R.N.,DIPasque,A.,ClinChem1962;8:570Henry,J.,Cannon,D.C.,Winkelmann,J.V.,Clinicalchemistry,principlesandtechnics,Harper&RowPublishersIns.,HagerstownMaryland,1974:1042Thomas,L.:Laboranddiagnose,4thedition,DieMedizinischeVerlagsgesellschaft,Marburg,1992:23520.其

18、他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中采集后按（检验科废物处置管理规定）执行。血清总蛋白液体(TP)双缩脲法测定1.实验原理双缩脲比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。OH蛋白质+Cu2+-紫红色复合物2.标本收集2.1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2类型：血清或血浆。3.标本存放2025保存可稳定6天；48保存可稳定4周；-20保存至少可稳定1年。4.标本运输室温条件下运输5.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6.实验材料:6.1上海申能总蛋白测定试剂盒货号：14223171701试剂1试剂26.1.1试剂组成试剂

19、1R1：664ml氢氧化钠80mmol/L酒石酸钾钠12.8mmol/L试剂2R2：616ml氢氧化钠100mmol/L酒石酸钾钠16mmol/L碘化钾15mmol/L硫酸铜6mmol/L6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与储存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自

20、动分析仪进行校准，详细参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品：详细参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判定与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判定能否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以TruCalU复合校准品总

21、蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。12.参考值范围g/L成人：6688儿童/青少男女年：130天4262416316个月446647676个月1岁56795570118岁57805780注：各实验室应有本人的参考范围。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差异。根据好的实验室经历，每个实验室应建立本人的参考值。13.临床意义：总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。14.操作性能14.1线性范围：

22、0.5150g/L14.2精细度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内重复性小于3%，总不精细度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。14.3方法学比拟：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对68个样品进行TP检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=1.00x-0.7g/L；r=0.997。14.4灵敏度：本试剂的检测限为0.5g/L。14.5病人结果可报告范围0150g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。15.超出范围结果处理：本法线性上限为150g/L。如样品测

23、定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.病危报警值的处理无。17.方法局限性17.1本法线性上限为150g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显增高，请选用其它方法如凯氏定氮法；当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度5.00g/L，甘油三酯浓度11.3mmol/L时没有观察到干扰18.弥补措施：当仪器发生故障时，迅速联络仪器厂家进行维修。19.参考文献1.ThomasL,

24、editor.Clinicallaboratorydiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.644-7.2.JohnsonAm,RohlfsEM,SilvermanLM.Proteins.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.Tietztextbookofclinicalchemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.p.477-540.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中采集后按（检验科废物处置管理规定）执行。血清白蛋

25、白ALB溴甲酚绿BCG法测定1.实验原理在pH值4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm处比色，颜色的深度与白蛋白浓度成正比。pH4.2白蛋白+溴甲酚绿-绿色化合物2.标本收集2.1病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆。3.标本存放留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下1525能够稳定一周，在冰箱保存的条件下28稳定一个月，-20保存至少能够稳定3个月。4.标本运输室温条件下运输5.标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。6.实验材料:6.1上海申能白蛋白测定试剂盒货号：11202271701，870ml6.1

26、.1试剂组成柠檬酸盐缓冲液pH4.230mmol/L溴甲酚绿(BCG)0.26mmol/L外表活性剂适量6.1.2试剂准备：试剂为即用式。6.1.3试剂稳定性与储存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.5注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。6.2校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项

27、目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判定与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判定能否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以TruCalU复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为：Au白蛋白(g/L)=校准液浓度As12.参考值范围成人3552g/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差异。根据好的实

28、验室经历，每个实验室应建立本人的参考值。13.临床意义：白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆浸透压的主要组分。血清白蛋白可用于诸多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因而可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。14.操作性能14.1线性范围260g/L14.2精细度：重复性的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内重复性小于3%，总不精细度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理

29、符合以上的NCCLS的规则。14.3方法学比拟：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对59个样品进行ALB检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=1.00x-1.1g/L；r=0.99814.4灵敏度：2g/L。14.5病人结果可报告范围：260g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。15.超出范围结果处理本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16.病危报警值的处理17.方法局限性17.1本法线性上限为60g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品

30、用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度4.00g/L，甘油三酯浓度5.63mmol/L时没有观察到干扰。18.弥补措施：当仪器发生故障时，迅速联络仪器厂家进行维修。19.参考文献1.DOUMAS,B.,WATSON,W.A.,BIGGS,H.G.,CLINCHIMACTA1971;31:87-962.WEBSTER,D.,CLINCHIMACTA1974;53:109-1153.TIETZ,N.W.:TEXTBOOKOFCLINICALCHEMISTRY,2NDEDITION,W.

31、B.SAUNDERSCOMPANY,PHILADELPHIA,1994:7034.AACCPressFriendman,R.B.,andYoung,D.S.,EffectsofDiseaseonClinicalLaboratoryTests,2ndEdition,1989.5.Rodkey,F.L.,ClinChem,2:478;19656.Doumas,B.T.,Watson,W.A.andBiggs,H.G.,ClinChemActa31:87-96,1971.7.Tietz,N.W.,ClinicalGuidetoLaboratoryTests,2ndEdition,W.B.Saunde

32、rs,1990.8.NCCLS,InterferenceTestinginClinicalChemistry,EP7-P,1986.9.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClinicalLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995.10.NCCLS,GuidelineEP5-T2,1992.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中采集后按（检验科废物处置管理规定）执行。血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。ALTL-丙氨酸+-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDH乳酸脱氢酶

33、丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD+H2O参加磷酸吡哆醛P-5-P是为了稳定ALT活性，避免样品中因内源性磷酸吡哆醛缺乏造成测定结果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和十分监护病人的结果)12.标本：2.1病人准备：12小时禁食。2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。3.标本存放：3天内的活性损失：28保存：6.1.3试剂稳定性与储存：试剂保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含叠氮钠0.95g/L为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必

34、要的预防措施使用试剂。6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，详细参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品：详细参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7.仪器：奥林巴斯AU1000生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判定与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判定能否在控。质控规

35、则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以TruCalU复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。12.参考值范围4不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性1和严重肝病有关，常见慢性肝病。14.操作性能14.1线性范围4800U/L14.2精细度：精细度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精细度小于3%，总精细度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛14.3方法学比拟：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对78个样品进

36、行ALT活力检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对80个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.994。14.4灵敏度：本试剂的检测限为4U/L。14.5病人结果可报告范围4U/L-800U/L15.超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。16.病

37、危报警值的处理17.方法局限性17.1本法对ALT活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：9稀释，重新测定，结果乘以10。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，胆红素浓度684mol/L，血红蛋白浓度4.00g/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。18.弥补措施：当仪器发生故障时，迅速联络仪器厂家进行维修。19.参考文献1.ThomasL.Alanineaminotransferase(ALT),Aspartateaminotransferase(AST).I

38、n:ThomasL,editor.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt:TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.2.MossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology.In:BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia:W.B.SaundersCompany;1999.P.617-721.3.BergmeyerHU,HorderM,RejR.Internationa

39、lFederationofClinicalChemistry(IFCC)ScientificCommittee,Analyticalsection:approvedrecommendation(1985)onIFCCmethodsforthemeasurementofcatalyticconcentrationofenzymes.Part3.IFCCmethodforalanineaminotransferase(L-alanine:2-oxoglutarateaminotransferase,EC2.6.1.2).JClinChemClinBiochem1986;24:481-95.4.Lo

40、rentzK,RohleG,SiekmannL.EinfuhrungderneuenStandardmethoden1994zurBestimmungderkatalytischenEnzymkonzentrationenbei37.DGKlinischeChemieMitteilungen1995;26:190-2.20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中采集后按（检验科废物处置管理规定）执行。血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定1.实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。L-天门冬氨酸+-酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H+MDH苹果

41、酸脱氢酶L-苹果酸+NAD+H2O2.标本：2.1病人准备：12小时禁食。2.2类型：血清，肝素或EDTA血浆。3.标本存放：3天内的活性损失：28保存：6.1.4变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。6.1.5注意事项：试剂中含叠氮钠0.95g/L为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。6.2校准品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，详细参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。6.3质控品：详细参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7.仪器：奥林巴斯AU1000生

42、化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判定与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判定能否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。11.计算方法：以TruCalU复合校准品AST校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测，能够直接使用A/min均值乘以计算因子得到结果

43、，但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALT活力的计算因子见下表：A/min因子=AST活力U/L底物起始的反响37样品起始的反响37340nm21431745334nm21841780365nm3971323512.参考值范围4不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性称谷草转氨酶GOT。它们是氨基转移酶类的典型代表。氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反响。ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。因而同时进行ALT和AST的检测用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。AST/ALT比率可用于肝病的鉴别诊断。比率1和严重肝病有关

44、，常见慢性肝病。14.操作性能14.1线性范围2-800U/L。14.2精细度：精细度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精细度小于3%，总精细度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对78个样品进行AST活力检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=0.98x-0.51U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对80个样品进行AST活力检测，将检测结果作方法学比拟，其统计结果如下：y=0.97x-0.79U/L

45、；r=0.995。14.4灵敏度：本试剂的检测限为2U/L。14.5病人结果可报告范围2-800U/L。15.超出范围结果处理：本法对AST活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16，在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+9稀释，重新测定，结果乘以10。16.病危报警值的处理无。17.方法局限性17.1本法对AST活力检测的最大A/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1+9稀释，重新测定，结果乘以10。17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度1704mol/L，

46、胆红素浓度684mol/L，甘油三酯浓度22.6mmol/L时没有观察到干扰。红细胞内富含AST，因而溶血血清检测结果明显偏高。18.弥补措施：当仪器发生故障时，迅速联络仪器厂家进行维修。19.参考文献：1.ThomasL.Alanineaminotransferase(ALT),Aspartateaminotransferase(AST).In：ThomasL,editor.ClinicalLaboratoryDiagnostics.1sted.Frankfurt：TH-BooksVerlagsgesellschaft;1998.p.55-65.2.MossDW,HendersonAR.Clinicalenzymology.In：BurtisCA,AshwoodER.editors.TietzTextbookofClinicalChemistry.3rded.Philadelphia：W.B.SaundersCompany;1999.P.617-721.3.BergmeyerHU,HorderM,Rej