各种缓冲液的配制方法-.doc

《各种缓冲液的配制方法-.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《各种缓冲液的配制方法-.doc（7页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。

1、. .各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)2.20.419.65.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87

2、.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55Na2HPO4。2H2O，分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.61g/L柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液0.1mol/LPH0.1mol/L柠檬酸ml0.1mol/L柠檬酸钠mlPH0.1

3、mol/L柠檬酸ml0.1mol/L柠檬酸钠 (ml)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L醋酸缓

4、冲液0.2mol/L，18PH0.2mol/LNaAC(ml)0.2mol/LHAC(ml)PH0.2mol/LNaAC(ml)0.2mol/LHAC(ml)3.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60NaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L1醋酸盐溶液的配制：醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀

5、释至250ml,即得。 醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸6080ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。 醋酸醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。

6、 醋酸醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lgC(NaAc)/C(HAc)在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-51.8乘10的-5次方，PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。假设是配制C(HAc)=0.1mol/L，那么C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量

7、为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸参加1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。当然假设想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否那么缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液PH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L苯二甲酸氢钾ml加水至(ml)4.00.4025.00100.004.23.6525.00100.004.47.3525.00100.004.612.0025.00100.004.817.5025.00100.005.023.6525.00100.005.2

8、29.7525.00100.005.435.2525.00100.005.639.7025.00100.005.843.1025.00100.006.045.4025.00100.006.247.0025.00100.000.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸枯燥器中枯燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml。磷酸缓冲液0.2mol/LPH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.2mol/LNaH2PO4 (ml)PH0.2mol/LNa2HPO4 (ml)0.2mol/LNaH2PO4 (ml)588.092.07.061.039.06.012.387.77

9、.272.028.06.218.581.57.481.019.06.426.573.57.687.013.06.637.562.57.891.58.56.849.051.08.094.75.3Na2HPO4 .2 H2O ,分子量=178.05， 0.2mol/L溶液含35.61g/LNaH2PO4 . 2 H2O ,分子量=156.03， 0.2mol/L溶液含31.21g/LNaH2PO4 . H2O,分子量=138.03， 0.2mol/L溶液含27.6g/LNa2HPO4 .12 H2O,分子量=358.22， 0.2mol/L溶液含71.64g/L磷酸盐缓冲液PBS配制方法0.01M

10、 PBS PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)PBS缓冲液pH7.27.4：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4冰箱中即可。需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有

11、的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1M PBPH=7.4：取 500ml 0.2M

12、 PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PB PH=7.4：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PB PH=7.4：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。假设需要 NaCl的话，参加 NaCl 至0.9%g/100ml即可。另：其它各种另 PH值的 0.2M PB100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4ml 0.2M Na2HPO4ml5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.

13、56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液PBS配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034105Pa)高

14、压下蒸气灭菌至少20分钟，保存存于室温或4冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，那么需要在配置的时候分别参加100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经历来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，

15、可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变我亲自测过偏酸。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl 0.2g，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBST缓冲液取300l Tween-20 参加PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。

16、如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次 PH8.0的PBS配方详细1. NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 2. 向烧杯中参加约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后参加去离子水将溶液定容至1 L。4. 高温高压灭菌后，室温保存。注

17、意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸馏水至1000ml ;乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH 甲液ml 乙液mI 5.29 2.5 9

18、7.5 5.59 5.0 95.0 5.91 10.0 90.0 6.24 20.0 80.0 6.47 30.0 70.0 6.64 40.0 60.0 6.81 50.0 50.0 6.98 60.0 40.0 7.17 70.0 30.0 7.38 80.0 20.0 7.73 90.0 10.0 8.04 95.0 5.0 你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可。硼酸缓冲液0.2mol/L硼酸盐PH0.05mol/L硼砂ml0.2mol/L硼酸mlPH0.05mol/L硼砂ml0.2mol/L硼酸ml7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.

19、55.57.82.08.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0硼砂Na2B4O7.10H2O,分子量=381.43,0.05mol/L溶液=0.2mol/L硼砂含19.07g/L硼酸，分子量=61.84,0.2mol/L溶液含12.37g/L硼砂易失去结晶水，必须在带塞得瓶中保存；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替盐酸-氯化钾缓冲液PH0.1mol/LHCl(ml)0.02mol/LKCl(ml)加水至(ml)PH0.1mol/LHCl(ml)0.02mol/LKCl(ml)加水至ml1.194.562.701001.723.7638.101001.275.1012.451

20、001.818.6840.601001.359.6820.151001.914.9842.501001.447.4026.301002.011.9044.051001.537.6431.201002.19.4645.031001.629.9035.001002.27.5246.251000.02mol/LKCl溶液：溶7.455g氯化钾于水中，稀释至500ml苯二甲酸氢钾-盐酸缓冲液PH0.1mol/LHCl (ml)0.02mol/L苯二甲酸氢钾ml加水至miPH0.1mol/LHCl (ml)0.02mol/L苯二甲酸氢钾ml加水至mi2.246.6025.001003.214.8025.

21、001002.439.6025.001003.49.9525.001002.633.0025.001003.66.0025.001002.826.5025.001003.82.6525.001003.020.4025.001000.02mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸枯燥器中枯燥过24小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液PH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L磷酸二氢钾(ml)加水至mlPH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L磷酸二氢钾(ml)加水至ml5.83.6625.001007.029.5425.001006.

22、05.6425.001007.234.9025.001006.28.5525.001007.439.3425.001006.412.6025.001007.642.7425.001006.617.7425.001007.845.1725.001006.823.6025001008.046.8525.001000.2mol/L磷酸二氢钾溶液：溶13.616g磷酸二氢钾于水中，稀释至500ml硼酸-氯化钾-氢氧化钠缓冲液PH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L硼酸-氯化钾ml加水至mlPH0.1mol/LNaOH(ml)0.2mol/L硼酸-氯化钾ml加水至ml7.82.6525.001009.021.4025.001008.04.0025.001009.226.7025.001008.25.9025.001009.432.0025.001008.48.5525.001009.636.8525.001008.612.0025.001009.840.8025.001008.816.4025.0010010.048.9025.001000.02mol/L硼酸-氯化钾溶液：溶6.202g硼酸和7.456g氯化钾于水中稀释至500ml. .word.