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1、.PBS 缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS 缓冲液，下面是我们实验室的配方，供大家参考。我们实验室的配方：A 液：0.1mol/L 磷酸二氢钾：磷酸二氢钾（KH2PO4，MW136.09）1.361g，加双蒸水至 100ml。B 液：0.1mol/L 磷酸氢二钠：酸酸氢二钠（Na2HPO4.2H2O，MW177.99）1.78g，加双蒸水至 100ml。或者酸酸氢二钠（Na2HPO4.12H2O，MW358.14）3.58g，加双蒸水至100ml。pH A 液（ml）B 液（ml）5.60 9.50 0.255.91 9.00 1.006.24 8.00 2.006.47
2、 7.00 3.006.64 6.00 4.006.81 5.00 5.006.98 4.00 6.007.17 3.00 7.007.38 2.00 8.007.73 1.00 9.008.04 0.50 9.50.下载可编辑.一般免疫组化用 PBS 都只包含 Na2HPO4 12H2O（磷酸氢二钠）NaH2PO4 2H2O（磷酸二氢钠）Nacl用于细胞培养的 PBS 需含有氯化钾称取 8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4 和 0.24g KH2PO4,溶于 800ml蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4，最后加蒸馏水定容至 1L即可 0.01MPBS
3、 缓冲液称取NaCl8g，KCl0.2g，Na2HPO4 12H2O3.63g,KH2PO40.24g，溶于 900ml 双蒸水中，用盐酸调 pH 值至 7.4，加水定容至 1L，常温保存备用。PBS 是最普遍不过的实验室缓冲液，但其配方各异。以下是我的总结：母液的配制：0.2MNa2HPO4：称取71.6gNa2HPO4-12H2O，溶于1000ml水0.2MNaH2PO4：称取31.2gNaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml水各种浓度 PB(pH=7.4)的配制：先 配0.2MPB(pH=7.4，100ml)：取19ml0.2mol/L的NaH2PO4，81ml0.2mol/L的Na
4、2HPO4,即可。.下载可编辑.然后只需将 0.2MPB(pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：0.1MPB（PH=7.4）：取500ml0.2MPB，加 水 稀 释至1000ml即可。0.01MPB（PH=7.4）：取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。0.02MPB（PH=7.4）：取100ml0.2MPB，加 水 稀 释至1000ml即可。若需要NaCL的话，加入NaCL至 0.9%（g/100ml）即可。另：其它各种另PH 值的0.2MPB（100ml)配方：pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2MNa2HPO4（ml）5.793.56.55.89285.99010
5、6.087.712.36.18515.下载可编辑.6.281.518.56.377.522.56.473.56.56.66.76.86.97.07.17.2.下载可编辑.26.568.531.562.537.556.543.551494555386233672872.7.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer,PB），磷酸氢二钠和磷酸二氢钠缓冲液配方磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer,PB）试剂：NaH2PO42H2ONa2HPO412H2O配
6、制方法：配制时，常先配制 0.2mol/L 的 NaH2PO4 和 0.2mol/L 的.下载可编辑.Na2HPO4，两者按一定比例混合即成 0.2mol/L 的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的 PB 和 PBS。（1）0.2mol/L 的Na2HPO4；称 取 Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4H2O 27.6g)加重蒸水至 1000ml 溶解。（2）0.2mol/L 的 Na2HPO4：称取 NaHPO4.12H2O 71.632g（或Na2HPO47H2O 53.6g 或 Na2HPO42H2O 35.6g）加重蒸水至 1000ml溶解。（3）0.2m
7、ol/L pH7.4 的 PB 的配制：取 19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4和 81ml 0.2mol/L的 Na2HPO412H2O,充分混合即为 0.2mol/L 的 PB（pH 约为 7.47.5）。若 pH 偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。0.2mol/L 磷酸盐缓冲液（pH5.78.0）pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.5 18.56.3 77.5 22.
8、5.下载可编辑.6.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.97.07.17.27.37.47.57.67.77.8 91.57.9 93.08.0 94.7.下载可编辑.8.57.05.3 45.0 55.0 39.0 61.0 33.0 67.0 28.0 72.0 23.0 67.0 19.0 81.0 16.0 84.0 13.0 87.0 10.5 89.5.关于磷酸缓冲溶液的知识，我在网上搜索了好多帖子，但是还是不能确定正确的答案。现在把他们链接过来，希望有高手们参与讨论，我会把最终的正确解答
9、整理出来，提供给大家。PBS 可以为三种溶液的英文缩写，分别是1.磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、2.磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及3.磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH 值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的 PBS 是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）。无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）（0.15Mol/L PH 7.2）NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g（如为
10、Na2HPO412H2O，则为 2.89g）KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于 1 000ml 去离子水中，完全溶解后，115高压.下载可编辑.灭菌 10min15min，存在 4冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。我们用的都是第二种问题 1：磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered sodium），为什么用第三种或第一种呢:这么多年以来我都以为 PBS 就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。不同的汉语翻译倒是第一次听说。我们公司用的 PBS 有很多种，抗体组用的中和 PBS 配方就比较简单，没有 K+
11、离子，只起到缓冲 PH 的作用；Na2HPO4+KH2PO4 按照不同比例混匀，可以得到不同 PH 的缓冲液，用于不同目的，这个在分子生物学中用得很多；用于活细胞或者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是 NaCl 和 KCl 调节离子浓度。以上是个人的理解，欢迎批评。:问题 2：既然抗体组的 PBS 是起到缓冲 PH 的作用，那加入 80G 的 NACL 作用是什么？需要平衡渗透压吗？还有加入 K 离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一说啊？我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢了，血清里面又没有细胞，何来 NA-
12、K 泵一说啊？我没说血清撒。我们用的又没加 K，我是说加了 K 的的.下载可编辑.问题 3：不加 NACL 会怎么样啊？多省钱啊在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl 的主要作用应当是保持一定的离子浓度，以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白质都会变性，抗体当然不例外。ps:哺乳类需用生理盐水浓度是 0.9%。称取 0.9 克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到 100 毫升。鸟类需用的生理盐水浓度是 0.75%。称取 0.75 克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。两栖类需用的生理盐水浓度是 0.65%。称取 0.65 克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。/size/font.下载可编辑.