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1、1 检测检测细胞色素细胞色素P450 1A酶酶的的 高选择性比率高选择性比率双光子双光子荧光探荧光探针针文献出处：DOI:10.1021/jacs.5b09854 J.Am.Chem.Soc.2015,137,144881449512ContentsIntroduction 12 Experimental section1 234 Results and Representation231.IntroductionCYP1Al抗干扰差l成像效果差l毒性大人体药物新陈代谢酶，对致癌物质活性有重要影响活性腔中有丰富的羟基氨基酸，氢键和-相互作用可能对基底的组成产生作用传统单显微镜荧光探针3NCMN
2、的设计依据:CYP1Ad的底物偏好 对位有较强的脱烷基化作用2.Experimental section43.表征表征结论：结论：NCMN作为检测作为检测CYP1A的探针可行的探针可行肉眼色比肉眼色比112nm红移红移5机理机理63.表征表征7结论：结论：NCMN的脱甲基化具有良好的反应性和理想的动的脱甲基化具有良好的反应性和理想的动力学行为，有潜能对复杂生物体中的力学行为，有潜能对复杂生物体中的CYP1A进行定量进行定量测定。测定。8表征表征 人肝微粒体中人肝微粒体中CYP1A的量化的量化结论：(a)(b)(c)确定了NCMN的高选择性 (d)(e)(f)表面NCMN可以作为CYP1A调节器
3、的筛选和表征9活细胞成像应用活细胞成像应用10112 单光子 双光子未加抑制剂加CYP1A抑制剂结论：荧光响应是由于结论：荧光响应是由于CYP1A调节调节NCMN所致。所致。NCMN可以可以用单光子、双光子激发成像来检测活细胞中用单光子、双光子激发成像来检测活细胞中CYP1A的活性。的活性。11NCMNe在完整细胞和细胞匀浆内检测在完整细胞和细胞匀浆内检测CYP1A的量的量 正常1nMTCDD10nMTCDD12结论：结论：NCMN可以被用于筛选有效的可以被用于筛选有效的CYP1A诱导剂，诱导剂，并检测活细胞中生并检测活细胞中生 成的成的CYP1A的酶活性的酶活性13小鼠肝组织中CYP1A的三维深度成像放大图放大图结论：结论：NCMN组织渗透力强，组织中的组织渗透力强，组织中的CYP1A适适合用双光子深度荧光成像合用双光子深度荧光成像14153.Results and discussionCYP1A2CYP1A1亚铁血红亚铁血红素素铁原子铁原子结论：三条结论：三条H-bond表明表明-COOH在识别和对接在识别和对接CYP1A中的重要作用中的重要作用 催化效率催化效率CYP1A2大于大于CYP1A11516Thank you for your attention!16