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1、1 检测检测细胞色素细胞色素P450 1A酶酶的的 高选择性比率高选择性比率双光子双光子荧光探荧光探针针文献出处:DOI:10.1021/jacs.5b09854 J.Am.Chem.Soc.2015,137,14488144952ContentsIntroduction 12 Experimental section1 234 Results and Representation31.IntroductionCYP1Al抗干扰差l成像效果差l毒性大人体药物新陈代谢酶,对致癌物质活性有重要影响活性腔中有丰富的羟基氨基酸,氢键和-相互作用可能对基底的组成产生作用传统单显微镜荧光探针NCMN的设计
2、依据:CYP1Ad的底物偏好 对位有较强的脱烷基化作用2.Experimental section3.表征表征结论:结论:NCMN作为作为检测检测CYP1A的的探针探针可行可行肉眼肉眼色色比比112nm红移红移机理机理3.表征表征结论:结论:NCMN的的脱脱甲基甲基化化具有具有良好良好的的反应性反应性和和理想理想的的动动力学力学行为,行为,有有潜潜能能对对复复杂杂生物生物体体中中的的CYP1A进行进行定量定量测定。测定。表征表征 人人肝肝微粒体微粒体中中CYP1A的的量化量化结论:(a)(b)(c)确定了NCMN的高选择性 (d)(e)(f)表面NCMN可以作为CYP1A调节器的筛选和表征活细
3、胞活细胞成像成像应用应用112 单光子 双光子未加抑制剂加CYP1A抑制剂结论:结论:荧光荧光响响应应是由于是由于CYP1A调节调节NCMN所致。所致。NCMN可以可以用用单单光子、光子、双双光子光子激发激发成像成像来来检测检测活细胞活细胞中中CYP1A的的活性。活性。NCMNe在在完整完整细胞细胞和和细胞细胞匀匀浆浆内内检测检测CYP1A的的量量 正常1nMTCDD10nMTCDD结论:结论:NCMN可以可以被被用于用于筛选筛选有效有效的的CYP1A诱导诱导剂,剂,并并检测检测活细胞活细胞中中生生 成成的的CYP1A的的酶酶活性活性小鼠肝组织中CYP1A的三维深度成像放放大图大图结论:结论:NCMN组织组织渗渗透透力力强,组织强,组织中中的的CYP1A适适合合用用双光双光子子深度荧光深度荧光成像成像153.Results and discussionCYP1A2CYP1A1亚铁亚铁血血红红素素铁铁原原子子结论:结论:三条三条H-bond表表明明-COOH在在识别识别和和对接对接CYP1A中中的的重要重要作用作用 催化催化效率效率CYP1A2大于大于CYP1A116Thank you for your attention!