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1、链专题十五 遗传的分子基础菌体表面菌落表面致病性S型细菌有多糖荚膜光滑使人和小鼠患肺炎,小鼠并发败血症死亡R型细菌无多糖荚膜粗糙无致病性一、肺炎链球菌转化实验 S型细菌的荚膜,可以抵抗吞噬细胞的吞噬,因此能在宿主体内生存。1、肺炎链球菌的体内转化实验(研究者:格里菲思)结论:加热致死的S型细菌,含有某种促使R型活菌转化为S型活细菌的活性物质转化因子。2、肺炎链球菌的体外转化实验(研究者:艾弗里)注意:艾弗里使用的细菌提取物是加热杀死的S型细菌,破碎细胞后去除了大部分糖类、蛋白质和脂质后剩余的物质。该提取物中还含有DNA、少量RNA以及微量的蛋白质和脂质。第二至四组实验分别加入不同酶,其中酯酶是
2、三丁酰甘油酯酯酶,而不是磷脂酶或脂肪酶。结论:DNA才是使R型细菌产生稳定遗传变化的物质。易错易混格里菲思的实验只能证明加热杀死的S型细菌中含有某种转化因子,不能证明DNA是遗传物质。艾弗里则证明了转化因子是S型细菌的DNA,即DNA是遗传物质。加热杀死的S型细菌,其蛋白质变性失活(不可逆),但DNA在加热过程中,双螺旋解开,氢键被打断,但缓慢冷却时,其结构可恢复。(断氢键,可恢复)R型细菌转化为S型细菌的实质:基因重组(可遗传变异)转化过程中并不是所有的R型细菌都被转化成S型细菌,而只是少部分R型细菌转化成S型细菌。艾弗里证明DNA是遗传物质的实验中,每个实验组都通过添加特定的酶特异性地去除
3、了一种物质,从而鉴定出DNA是遗传物质,这利用了自变量控制中的“减法原理”。(教材46页)3、肺炎链球菌体内转化实验与体外转化实验的比较二、噬菌体侵染细菌的实验1、科学家:赫尔希和蔡斯2、实验材料:T2噬菌体和大肠杆菌 T2噬菌体的结构:60%是蛋白质(含有特征元素S),40% 是DNA(含有特征元素P)。 T2噬菌体的生活方式:专门寄生在大肠杆菌体内(不能用 培养基直接培养病毒,只能用活细胞培养) T2噬菌体的增殖过程:吸附注入合成组装释放 T2噬菌体的增殖条件增殖需要的条件内容模板T2噬菌体的DNA合成T2噬菌体DNA的原料大肠杆菌提供的四种脱氧核苷酸合成T2噬菌体的蛋白质原料大肠杆菌的氨
4、基酸场所大肠杆菌的核糖体3、研究思路:将DNA和蛋白质分开,直接地单独地去观察它们各自的作用。4、实验方法:放射性同位素标记法(注意:不能用DNA和蛋白质的共有元素14C、3H等进行标记;不能用35S和32P标记同一个噬菌体,否则不能确定是何种元素的放射性。)5、实验过程(1)标记噬菌体(2)噬菌体侵染细菌(3)搅拌的目的:使吸附在大肠杆菌上的噬菌体与其分离 离心的目的:让上清液中析出质量较轻的T2噬菌体颗粒, 沉淀物中留下被侵染的大肠杆菌。(噬菌体与细菌分层)(4)实验结果:(5)结论:子代噬菌体的各种性状,是通过亲代的DNA遗传 的。DNA才是噬菌体的遗传物质。该实验可同时证明:DNA分子
5、具有相对稳定性。DNA能自我复制,使前后代保持一定的连续性。DNA能控制蛋白质的生物合成。(6)实验误差分析用32P标记的噬菌体侵染大肠杆菌,上清液中也含少量放射性。 保温时间过短,有一部分噬菌体还没有侵染到大肠杆菌 细胞内,经离心后分布于上清液中,上清液中出现放射性。 噬菌体和大肠杆菌混合培养到用离心机分离,这一段保 温时间过长,噬菌体在大肠杆菌内增殖后释放子代。经离 心后分布于上清液,也会使上清液中出现放射性。用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,沉淀物中也具一定放射性。 若用35S标记的噬菌体侵染大肠杆菌,理论上沉淀物中不 含放射性,但可能由于搅拌不充分,有少量含35S的噬菌体 蛋白质外壳吸
6、附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中,沉 淀物中出现很低的放射性。S6、艾弗里实验和赫尔希、蔡斯实验的比较噬菌体32P、35S31P、32S14C、3H12C、1H宿主细胞31P、32S32P、35S12C、1H14C、3H子代病毒32P、32S32P、35S14C-DNA 1H-蛋白3H-DNA 12C -蛋白14C-DNA 3H-DNA14C-蛋白 3H-蛋白(7)放射性元素的标记总结三、RNA是遗传物质的证据:烟草花叶病毒侵染实验1、烟草花叶病毒2、烟草花叶病毒侵染实验对照组:用烟草花叶病毒感染正常烟草,烟草产生花叶病。结论:烟草花叶病毒的遗传物质是RNA,蛋白质不是烟草花叶病毒的遗传物质(烟草花叶病毒的RNA进入细胞,可直接利用宿主细胞的酶系合成子代病毒,而细菌的DNA进入真核细胞,一般是不能表达的,因为真核和原核的基因表达系统不相同。)3、烟草花叶病毒重建实验四、DNA是主要的遗传物质绝大多数生物的遗传物质是DNA,只有极少数生物的遗传物质是RNA,所以说DNA是主要的遗传物质。(具体到某种生物,遗传物质要么是DNA,要么是RNA,不能加“主要”)生物类别核酸核苷酸碱基遗传物质举例原核生物真核生物DNA和RNA 85DNA细菌、人等病毒只含DNA44DNA噬菌体只含RNA44RNA烟草花叶病毒