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1、疟原虫的镜下形态疟原虫的镜下形态 及鉴别要点及鉴别要点授课内容1.4种疟原虫厚、薄血膜中各期形态结构及鉴别要点2.镜检示教疟原虫生活史简图(间日疟为例)疟原虫生活史简图(间日疟为例)人体疟原虫的基本结构人体疟原虫的基本结构疟原虫基本构造为细胞胞质(胞(胞浆)、核和)、核和疟色素色素这三要素。三要素。1.1.细胞胞浆 被染成蔚蔚蓝色或深色或深蓝色色,随着虫体发育长大,细胞浆逐渐增多。2.2.2.2.核核核核 即即细细胞核或染色胞核或染色质质粒。在正常情况下核粒。在正常情况下核呈呈鲜红鲜红色。色。色。色。3.3.3.3.疟疟色素色素色素色素 不着色,不着色,不着色,不着色,颜颜色和色和颗颗粒的形状
2、,因粒的形状,因疟疟原虫种原虫种类类而异。而异。间间日日疟疟原虫的色素原虫的色素颗颗粒呈短棒状,粒呈短棒状,黄褐色;黄褐色;黄褐色;黄褐色;恶恶性性疟疟原虫的色素原虫的色素颗颗粒呈粒呈细细砂状,砂状,黑褐黑褐黑褐黑褐色。色。色。色。薄血膜中常见的血液成分中性粒细胞嗜酸性粒细胞血小板单核细胞淋巴细胞红细胞如何确定血片为阴性如何确定血片为阴性 检查全部厚血膜未查见疟原虫。检查全部厚血膜未查见疟原虫。最少检查最少检查100个厚血膜油镜视野个厚血膜油镜视野 未查见疟原虫。未查见疟原虫。镜检时间应不低于镜检时间应不低于20分钟。分钟。疟原虫种、期英文缩写疟原虫种、期英文缩写间日疟Pv恶性疟Pf三日疟Pm
3、卵形疟Po环状体R大滋养体T裂殖体S配子体G薄血膜薄血膜Pf形态形态 恶性疟恶性疟环状体环状体感染的红细胞:大小正常,颜色较深。虫体大小:较小,约为红细胞直径1/5-1/6。胞浆:蓝色,环状,纤细,有时位于红细胞的边缘。常见多个原虫同寄生于一红细胞的现象。核:红色一个,常有二个。疟色素:无。恶性疟原虫-环状体环纤细,约为RBC直径的1/6,RBC不胀大核1个,但2个常见,红细胞常含2个以上原虫恶性疟环状体恶性疟环状体被寄生的红细胞形态正常,一个红细胞内有一个环状体,另一个红细胞内有三个环状体,其中一个环状体贴于红细胞上缘。(800)虫体大小已超过被寄生红细胞直径的1/2,空泡大,无阿米巴样伪足
4、,红细胞形态正常,不胀大,未见茂氏点。(1250)Pf鸟眼状环状体,一个细胞寄生鸟眼状环状体,一个细胞寄生2环状体环状体恶性疟厚血膜环状体恶性疟厚血膜环状体恶性疟裂殖体前期、裂殖体恶性疟裂殖体前期、裂殖体被寄生的红细胞不胀大,无茂氏点;虫体小于正常红细胞,核已分裂成7块,色素团块黑褐色。(900)被寄生的红细胞不胀大,虫体小于正常红细胞,内含20个裂殖子,色素团块位于左侧。(900 厚血膜)恶性疟成熟裂殖体红细胞红细胞:大小正常,颜色大小正常,颜色 较深,可见茂氏小点。较深,可见茂氏小点。大小大小:虫体较小。虫体较小。胞浆和核胞浆和核:裂殖子裂殖子832 个,通常为个,通常为818个,个,排排
5、列不规则,核红色,胞浆列不规则,核红色,胞浆蓝色。蓝色。色素色素:黑褐色,集中于中央黑褐色,集中于中央或一侧。或一侧。恶性疟雌(大)配子体形态形状形状:新月形,两端稍尖。胞浆胞浆:深蓝色。核核:一个,较小,致密,深红色,位于中央,核周可见透明不染色带。疟色素疟色素:黑褐色,密布于核的周围。薄血膜恶性疟雄(小)配子体形态形状:形状:腊肠形,两端钝圆。腊肠形,两端钝圆。胞浆:胞浆:浅蓝色或淡紫红色。浅蓝色或淡紫红色。核:核:一个,较大,疏松,位一个,较大,疏松,位于中央,浅红色,核周于中央,浅红色,核周可见不染色带。可见不染色带。疟色素:疟色素:黑褐色,松散分布黑褐色,松散分布于核周围。于核周围。
6、薄血膜恶性疟雌、雄配子体薄血膜恶性疟雌、雄配子体雌配子体:半月形,两端较尖;核小致密,位于虫体上1/3部,色素围于核周;胞浆深蓝色。虫体外包有红细胞膜。(1250)雄配子体:腊肠形,两端钝圆;核大疏松,位于虫体中部,色素围于核周;胞浆淡红色。虫体外包有红细胞膜。(800)恶性疟厚薄血膜下环状体、配子体恶性疟厚薄血膜下环状体、配子体薄血膜Pv形态间日日疟 环状体状体感染的感染的红细胞:胞:胀大不明大不明显,基本正常。基本正常。虫体大小:虫体大小:较大,大,约为红细胞胞直径直径1/31/3。胞胞浆:环状,浅状,浅蓝色。色。核:核:红色,一个,偶有二个。色,一个,偶有二个。疟色素:色素:无。无。薄血
7、膜间日疟大滋养体形态感染的感染的红细胞:胞:胀大褪色,出大褪色,出现形状大小相等、分布均匀、形状大小相等、分布均匀、数目数目较多、多、鲜红色的薛氏小色的薛氏小点。点。虫体大小:虫体大小:较大。大。胞胞浆:不不规则,浅,浅蓝色,出色,出现阿米巴阿米巴伪足,有空泡。足,有空泡。核:核:红色,一个。色,一个。疟色素:色素:有,有,细小杆状,黄褐小杆状,黄褐色,分布不均匀。色,分布不均匀。间 日 疟 大 滋 养 体 虫体不虫体不规则,较大;阿米大;阿米巴巴样空泡明空泡明显;疟色素色素细小,黄褐色。小,黄褐色。间日疟大滋养体间日疟成熟裂殖体红细胞胞:胀大,褪色,大,褪色,可可见薛氏小点。薛氏小点。大小大
8、小:个体:个体较大。大。胞胞浆和核和核:裂殖子:裂殖子12122424个,个,通常通常为16 16 18 18个排列不个排列不规 则,核,核红色,胞色,胞浆浅浅蓝色。色。疟色素色素:黄褐色,常集于:黄褐色,常集于疟原原虫的一虫的一边。间日疟裂殖体薄血膜间日疟雌(大)配子体形态形状大小形状大小:圆形或椭圆型,较大。胞浆胞浆:深蓝色。核核:一个,较小,深红色,常偏于一边,核周可见明显不染色带。疟色素疟色素:黄褐色,均匀散在,数目较多。间日疟雄(小)配子体间日疟雄(小)配子体形态形态形状大小形状大小:圆形,虫体较 大。胞浆胞浆:浅蓝色。核核:一个,较大,疏松,位于中央,浅红色,周围有明显不着色带。疟
9、色素疟色素:黄褐色,散在分布。薄血膜薄血膜 Pv T、S1.被寄生的红细胞明显胀大,有薛氏点;滋养体胞浆有明显阿米巴样伪足。(1250)2.核已分裂成7块,黄褐色色素渐趋集中;被寄生的红细胞明显胀大。(800)3.核已分裂成18块,色素颗粒聚集成块状,位于虫体中部左下方,另一色素团块呈斜条状,位于虫体左上部;被寄生的红细胞明显胀大,有薛氏点。其左上方为一大滋养体。(1250)间日疟早期大滋养体,薛氏点明显间日疟早期大滋养体,薛氏点明显间日疟大滋养体间日疟大滋养体 厚血膜厚血膜 Pv1.Pv环状体(上右左各1个)、大滋养体(下1个)2.Pv大滋养体(4个)3.Pv大滋养体(上)、裂殖体(下)三日
10、疟大滋养体、裂殖体三日疟大滋养体、裂殖体被寄生红细胞不胀大,无点彩;虫体较大,斜列于红细胞中,呈带状,核条状,色素颗粒粗大,主要分布于虫体边缘部分。(800)裂殖子8个,呈花瓣状排列,色素聚于虫体中部。(800)三日疟裂殖体三日疟裂殖体1.裂殖子6个,排列成菊花状,色素居中。薄血膜2.裂殖子8个,排列成菊花状,色素居中。薄血膜3.裂殖子6个,排列成菊花状,色素居中。厚血膜三日疟雌、雄配子体三日疟雌、雄配子体雌配子体:虫体已充满寄生红细胞,核三角形,较致密,位于虫体下端;色素颗粒粗大,砂粒状,散于胞浆中。(800)雄配子体:虫体已充满寄生红细胞,核大疏松,几乎占满左侧半个红细胞;色素粗大,散在;
11、红细胞不胀大。(800)三日疟厚血膜裂殖体,裂殖子三日疟厚血膜裂殖体,裂殖子6个个卵形疟环状体、大滋养体卵形疟环状体、大滋养体被寄生红细胞稍胀大,早期出现粗大薛氏点。(1250)被寄生红细胞稍胀大,有粗大薛氏点及伞状边缘;虫体小于正常红细胞,不呈阿米巴状。(800)卵形疟雌、雄配子体卵形疟雌、雄配子体雌配子体:寄生虫细胞稍胀大,有粗大薛氏点;虫体小于正常红细胞,核1个,致密;色素颗粒状,散在虫体内。(800)雄配子体:寄生虫细胞稍胀大,薛氏点粗大明显;虫体小于正常红细胞,核大,疏松,位于虫体中部;色素粗大、粒状、散在(1250)卵形疟大滋养体(卵形疟大滋养体(2个)、雄配子体个)、雄配子体卵形
12、疟卵形疟 厚、薄血膜裂殖体,裂殖子分别为厚、薄血膜裂殖体,裂殖子分别为10个、个、12个个卵形疟配子体,红细胞扫把状边缘卵形疟配子体,红细胞扫把状边缘厚薄血膜的优缺点及适用范围厚薄血膜的优缺点及适用范围薄薄血血膜膜:用血量少1-1.5ul,疟原虫的形态完整,便于疟原虫虫种的鉴定。为保证检测的敏感性,常耗时较多,不适用于大规模调查;常出现漏诊。厚血膜:厚血膜:用血量较多4-5ul,疟原虫胞浆和核有一定程度的固缩,较难识别;但须查范围小,节省时间,阳性检出率较高。1.红细胞通常红细胞通常胀大胀大 2.薛氏点明显薛氏点明显 3.成熟环状体成熟环状体粗大粗大4.滋养体有阿滋养体有阿米巴样伪足米巴样伪足
13、5.可见不同发可见不同发育期的原虫育期的原虫 间日疟(间日疟(P.vivax)鉴定要点)鉴定要点1.环状体纤细环状体纤细,红细红细胞不涨大胞不涨大2.一个红细胞内可一个红细胞内可有几个环状体有几个环状体 3.一个环状体可有一个环状体可有2个核个核 4.幼稚环状体可贴幼稚环状体可贴在红细胞边缘在红细胞边缘 5.配子体呈新月形配子体呈新月形或腊肠形或腊肠形 6.可出现茂氏点可出现茂氏点恶性疟(恶性疟(P.falciparum)鉴定要点)鉴定要点三日疟(三日疟(P.malariae)鉴定要点)鉴定要点1.环状体可呈环状体可呈方形方形2.带状形大滋带状形大滋养体是其养体是其特点特点 3.成熟裂殖成熟裂
14、殖体体呈菊花状,呈菊花状,内含内含612个裂殖子个裂殖子 4.红细胞不胀红细胞不胀大,略缩大,略缩小小5.有时有西门有时有西门氏点氏点卵形疟(卵形疟(P.ovale)鉴定要点)鉴定要点1.1.红细胞略胀红细胞略胀大或不变大大或不变大 2.2.红细胞边缘红细胞边缘呈车轮状呈车轮状3.3.环状体有时环状体有时呈现呈现鱼眼状鱼眼状4.4.薛氏点明显薛氏点明显 5.5.成熟裂殖体成熟裂殖体呈菊花状呈菊花状,类类似三日疟原似三日疟原虫虫,但更粗大但更粗大6.6.原虫呈卵圆原虫呈卵圆形形 疟原虫与其它物体的鉴别白白细胞残骸和幼稚胞残骸和幼稚红细胞残骸胞残骸 白细胞破裂后散出的颗粒,易误认为环状体的核,但看
15、不到胞浆;白细胞残骸和幼稚红细胞残骸常为蓝色,与疟原虫胞浆相似,有时与其它红点或与血小板巧合在一起,容易误认为疟疾原虫。鉴别时如果形同大滋养体,可根据疟色素来鉴别;如形同环状体,可根据虫体大小、折光是否均匀、核与胞浆是否在同一平面,其它视野内有无疟疾原虫等仔细分析判定。灰灰尘和染色液的色素沉着和染色液的色素沉着 灰尘和染色液的色素沉着在血膜的表面上时,易被误认为是疟色素,可依据其颗粒的形状、大小、色泽、有无核与胞浆的结构来鉴别也可转动显微镜的微调,看是否在同一水平面上。细菌菌 细菌尤其是球菌在厚血膜中常被染成红色小点,与疟原虫的核相似,最易混淆。球菌形体较大,边缘光滑,且与红细胞不在同一平面。
16、水中原虫水中原虫 水中原虫有时也可看到核、胞浆和空泡,与间日疟大滋养相似,但无疟色素,而空泡多如网眼植物种子植物种子 有很清晰的厚薄一致的边界,染色较深、无疟色素,也看不到核,且有柄脱落时的痕迹疟原虫镜下形态疟原虫镜下形态镜检示教Pf,环状体:双核多见,幼稚环状体,环状体:双核多见,幼稚环状体常贴于红细胞边缘常贴于红细胞边缘A member of the UN forces in East Timor.Presented with high temperature.P.Falciparum (恶性疟)Ringform (环状体)Pf,雌配子体,雌配子体Pf,配子体、环状体,配子体、环状体Pv,
17、环状体,环状体3个,左侧为个,左侧为3个个MP寄生同寄生同一红细胞一红细胞Pv,2个环状体寄生同一红细胞,少见;个环状体寄生同一红细胞,少见;中部中部2个大滋养体个大滋养体Pv,左上为未成熟裂殖体,右下为大,左上为未成熟裂殖体,右下为大滋养体滋养体Pv,雄配子体,雄配子体Pv,雄配子体,雄配子体Pf,环状体,数量多,环状体,数量多Pv,环状体,大滋养体(厚血膜中不,环状体,大滋养体(厚血膜中不易区分,主要看胞浆多少)易区分,主要看胞浆多少)P PMalarae Malarae(三日疟三日疟)Trophozoite(大滋养体)(大滋养体)Pm带状大滋养体带状大滋养体(带状大滋养体)(红细胞不胀大)卵形疟裂殖体卵形疟裂殖体小结:血片镜检中鉴定是否为疟原虫的五条原则1、疟原虫要有核有有核有浆(红核蓝浆)。2、疟原虫各期(除环状体外)均含有均含有疟色素。色素。3、疟原虫自然形自然形态要像要像;疟原虫呈半透明状呈半透明状态,模糊一团不透明者不是。4、体积最大最大的疟原虫也不能超不能超过中性粒中性粒细胞大。胞大。5、数量极少,似是而非者判为可疑,应重新选择时机多次制片、多次检查,结合临床表现并交上级大夫鉴定或行药物试治。