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1、疟原虫的镜下疟原虫的镜下形态及鉴别形态及鉴别荣成市疾控中心荣成市疾控中心岳丽霞岳丽霞公共邮箱：公共邮箱：授课内容授课内容1.厚、薄血膜中间日疟、恶性疟各期疟原虫的形态结构及其鉴别。2.镜检示教。人体疟原虫的基本结构v疟原虫基本构造为细胞质（细胞质（胞浆胞浆）、核和疟）、核和疟色素色素这三要素。三要素。v1.1.细胞浆细胞浆 被染成蔚蓝色或深蓝色蔚蓝色或深蓝色，随着虫体发育长大，细胞浆逐渐增多。vv2.2.2.2.核核核核 即细胞核或染色质粒。在正常情况即细胞核或染色质粒。在正常情况下核呈下核呈鲜红色。鲜红色。鲜红色。鲜红色。vv3.3.3.3.疟色素疟色素疟色素疟色素 不着色，不着色，不着色，
2、不着色，颜色和颗粒的形状，颜色和颗粒的形状，因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒因疟原虫种类而异。间日疟原虫的色素颗粒呈短棒状，呈短棒状，黄褐色；黄褐色；黄褐色；黄褐色；恶性疟原虫的色素颗粒恶性疟原虫的色素颗粒呈细砂状，呈细砂状，黑褐色。黑褐色。黑褐色。黑褐色。薄血膜中间日疟、恶性疟薄血膜中间日疟、恶性疟各期疟原虫的形态结构特点各期疟原虫的形态结构特点薄血膜中常见的血液成分薄血膜中常见的血液成分中性粒细胞嗜酸性粒细胞血小板单核细胞淋巴细胞红细胞薄血膜疟原虫形态薄血膜疟原虫形态间日疟间日疟 环状体环状体感染的红细胞：感染的红细胞：胀大胀大不明显，基本正常。不明显，基本正常。虫体大小：虫体大小：
3、较大，约较大，约为红细胞直径为红细胞直径1/3。胞浆：胞浆：环状，浅蓝色。环状，浅蓝色。核：核：红色，一个，偶红色，一个，偶有二个。有二个。疟色素：疟色素：无。无。约占寄生红细胞的约占寄生红细胞的1/31/3，很少见到一个红细胞，很少见到一个红细胞寄生寄生2 2个环状体和一个环状体有个环状体和一个环状体有2 2个核。个核。薄血膜疟原虫形态 恶性疟恶性疟环状体环状体感染的红细胞：大小正常,颜色较深。虫体大小：较小，约为红细胞直径1/5-1/6。胞浆：蓝色，环状纤细,有时位于红细胞的边缘。常见多个原虫同寄生于一红细胞的现象。核：红色一个,常有二个。疟色素：无。恶性疟原虫恶性疟原虫-环状体环状体环纤
4、细,约为RBC直径的1/6，RBC不胀大核1个，但2个常见，红细胞常含2个以上原虫薄血膜间日疟大滋养体形态薄血膜间日疟大滋养体形态感染的红细胞：感染的红细胞：胀大褪色，胀大褪色，出现形状大小相等、分出现形状大小相等、分布均匀、数目较多、鲜布均匀、数目较多、鲜红色的薛氏小点。红色的薛氏小点。虫体大小：虫体大小：较大。较大。胞浆：胞浆：不规则，浅蓝色，不规则，浅蓝色，出现阿米巴伪足，有空出现阿米巴伪足，有空泡。泡。核：核：红色，一个。红色，一个。疟色素：疟色素：有，细小杆状，有，细小杆状，黄褐色，分布不均匀。黄褐色，分布不均匀。间间 日日 疟疟 大大 滋滋 养养 体体 虫体不规则，较大；阿虫体不规
5、则，较大；阿米巴样空泡明显；疟色米巴样空泡明显；疟色素细小，黄褐色。素细小，黄褐色。间日间日疟大疟大滋养体滋养体恶性疟大滋养体恶性疟大滋养体受感染红细胞：受感染红细胞：大小正常，颜色较深，可出现较粗、大小不一、分布不匀、数目较少红色茂氏小点。虫体大小：虫体大小：较小。胞浆：胞浆：蓝色，圆形，坚实，体积小。核：核：一个，红色。疟色素：疟色素：较细的黑褐色颗粒，常集成块。恶性疟大滋养体恶性疟大滋养体红细胞：胀大，褪色，可有薛氏小点。胞浆：较不规则，空泡小或消失，浅蓝色。核：红色，分裂为二个以上。色素：黄褐色，分布不均匀。间日疟间日疟未成熟裂殖体未成熟裂殖体薄血膜疟原虫形态薄血膜疟原虫形态间间日日疟
6、疟未未成成熟熟裂裂殖殖体体 恶性疟未成熟裂殖体红细胞：红细胞：大小正常，颜色较大小正常，颜色较深，可有茂氏小点。深，可有茂氏小点。大小：大小：较小。较小。胞浆：胞浆：规则，圆形或卵圆形，规则，圆形或卵圆形，蓝色。蓝色。核：核：分裂为二个以上，红色分裂为二个以上，红色。色素：色素：黄褐色颗粒，常集成黄褐色颗粒，常集成黑褐色团块。黑褐色团块。间日疟间日疟成熟裂殖体成熟裂殖体红细胞红细胞：胀大，褪色，可见：胀大，褪色，可见薛氏小点。薛氏小点。大小大小：个体较大。：个体较大。胞浆和核胞浆和核：裂殖：裂殖子子1224个，个，通常为通常为1618个，排列不规个，排列不规则，核红色，胞浆浅蓝色。则，核红色，
7、胞浆浅蓝色。疟色素疟色素：黄褐色，常集于疟：黄褐色，常集于疟原虫的一边。原虫的一边。间日疟裂殖体间日疟裂殖体恶性疟恶性疟成熟裂殖体成熟裂殖体红细胞红细胞：大小正常，颜色大小正常，颜色 较深，可见茂氏小点。较深，可见茂氏小点。大小大小：虫体较小。虫体较小。胞浆和核胞浆和核：裂殖子裂殖子832 个，通常为个，通常为818个，个，排列不规则，核红色，胞排列不规则，核红色，胞浆蓝色。浆蓝色。色素色素：黑褐色，集中于中央黑褐色，集中于中央或一侧。或一侧。恶性疟成熟裂殖体恶性疟成熟裂殖体 v裂殖子裂殖子8 83232个，通常个，通常8 81818个，个，排列不规则排列不规则v疟色素集中成团块状疟色素集中成
8、团块状v虫体占红细胞体积的虫体占红细胞体积的2/32/3至至3/4 3/4 薄血膜薄血膜间日疟雌（大）配子体间日疟雌（大）配子体形态形态形状大小形状大小：圆形或椭圆形，较大。胞浆胞浆：深蓝色。核核：一个，较小，深红色，常偏于一边，核周可见明显不染色带。疟色素疟色素：黄褐色，均匀散在，数目较多。间日疟原虫雌配子体间日疟雄（小）配子体形态形状大小形状大小：圆形，虫体较大。胞浆胞浆：浅蓝色。核核：一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，周围有明显不着色带。疟色素疟色素：黄褐色，散在分布。间日疟原虫雄配子体恶性疟恶性疟雌（大）配子体雌（大）配子体形态形态形状形状：新月形，两端稍尖。胞浆胞浆：深蓝色。核核：
9、一个，较小，致密，深红色，位于中央，核周可见透明不染色带。疟色素疟色素：黑褐色，密布于核的周围。薄血膜薄血膜恶性疟雄（小）配子体恶性疟雄（小）配子体形态形态形状：形状：腊肠形，两端钝腊肠形，两端钝圆。圆。胞浆：胞浆：浅蓝色或淡紫红浅蓝色或淡紫红色。色。核：核：一个，较大，疏松，一个，较大，疏松，位于中央，浅红色，位于中央，浅红色，核周可见不染色带。核周可见不染色带。疟色素：疟色素：黑褐色，松散黑褐色，松散分布于核周围。分布于核周围。将（未）成熟雌配子体将（未）成熟雌配子体与与成熟大滋养体成熟大滋养体(核分裂前，刚要进入裂殖体前期)的形态鉴别的形态鉴别虫体大小:几乎充满被寄生的红细胞v核:一个，
10、较大且致密，周围有一圈空白的不染色带v胞浆:边缘清楚，不含空泡v疟色素:颗粒较多较粗，均匀散在虫体大小:不超过被寄生红细胞的3/4v核:一个，延长呈带状，周围无明显的不染色带v胞浆:边缘不整齐，多有空泡v疟色素:颗粒较少较细，分布不均匀厚血膜中间日疟、恶性疟厚血膜中间日疟、恶性疟各期疟原虫的形态结构特点各期疟原虫的形态结构特点厚血膜中疟原虫的形态厚血膜中疟原虫的形态 厚血膜由于用血量较多，涂制的血膜小，红细胞重叠且干燥慢，致使虫体皱缩，空泡消失，胞浆变形，各期疟原虫的体积都略微缩小，其中只有大、小滋养体的形态有较大改变，而裂殖体和配子体的形态则无明显变化。厚血厚血膜环状体体形态膜环状体体形态
11、环状体：胞浆呈环状或向核的一侧或两侧收缩，使环的中间断裂，或围绕核。间日疟原虫间日疟原虫的环较大，常呈分号“；”和感叹号“！”状；恶性疟原虫恶性疟原虫的环纤细，常呈冒号“：”、飞鸟“.”、V状和断环状。间日疟小滋养体恶性疟小滋养体厚血膜间日疟大滋养体形态厚血膜间日疟大滋养体形态 间间日日疟疟大大滋滋养养体体呈阿米巴样运动，胞浆常断裂几块或缩成圆形，核和疟色素均被包在胞浆之中，着色深，只隐约可见红色的核和黄绿色的疟色素。胞浆可皱缩断裂成几个块状，大小不一，似互不连接。核位于胞浆之中或外边。疟色素分布不均匀。有些仅见胞浆和疟色素而核看不清楚。大滋养体厚血膜恶性疟厚血膜恶性疟大滋养体形态大滋养体形态
12、 恶性疟原虫大滋恶性疟原虫大滋养体养体与薄血膜形态相似，常呈圆形，体小结实，疟色素细小，金黄色，结成块状后，呈黑褐色。大滋养体厚血膜裂殖体形态厚血膜裂殖体形态v裂殖体裂殖体 间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前间日疟原虫、恶性疟原虫的裂殖体前期及成熟裂殖体，除虫体略微缩小着色较深外，期及成熟裂殖体，除虫体略微缩小着色较深外，均与薄血膜相似。均与薄血膜相似。恶性疟裂殖体恶性疟裂殖体厚血膜间日疟配子体形态v间日疟原虫的配子体间日疟原虫的配子体呈圆形或卵圆形，除虫体略缩小且着色深外，均与薄血膜相似。雄配子体雄配子体核大，疏松，圆形或呈星状，胞浆较少，着色淡，疟色素颗粒大，数量较多，散在分布。v雌配子体雌
13、配子体与圆形成熟的大滋养体相似，但配子体疟色素颗粒粗大，多而散在分布。厚血膜恶性疟配子体厚血膜恶性疟配子体 形态形态 配子体配子体呈新月形或腊肠形，如血膜干燥较慢，则可缩成圆形，核居中，疟色素围在核周，外围一圈胞浆。此外，还可见配子体的胞浆部分或全部消失，只留下核和疟色素，或核和胞浆均消失，只留下一些疟色素。恶性疟原虫厚血膜厚薄血膜的优缺点及适用范围厚薄血膜的优缺点及适用范围薄薄血血膜膜：用血量少1-1.5ul，疟原虫的形态完整，便于疟原虫虫种的鉴定。为保证检测的敏感性，常耗时较多，不适用于大规模调查；常出现漏诊。厚血膜：厚血膜：用血量较多4-5ul，疟原虫胞浆和核有一定程度的固缩，较难识别；
14、但须查范围小，节省时间，阳性检出率较高。讲义讲义4343页倒数第二行厚血膜用页倒数第二行厚血膜用血量血量10ul-20ul10ul-20ul错误，应更正为错误，应更正为4-4-5ul5ul。1.红细胞通红细胞通常胀大常胀大 2.薛氏点明薛氏点明显显 3.成熟环状成熟环状体粗大体粗大4.滋养体有滋养体有阿米巴样阿米巴样伪足伪足5.可见不同可见不同发育期的发育期的原虫原虫 间日疟（间日疟（P.vivax）鉴定要点）鉴定要点1.环状体钎细环状体钎细,红红细胞不涨大细胞不涨大2.一个红细胞内一个红细胞内可有几个环状可有几个环状体体 3.环状体内可有环状体内可有2个核个核 4.环状体可贴在环状体可贴在红
15、细胞边缘红细胞边缘 5.血片中没有其血片中没有其他发育期滋养他发育期滋养体体 6.配子体呈新月配子体呈新月形或腊肠形形或腊肠形 7.可出现茂氏点可出现茂氏点恶性疟（恶性疟（P.falciparum）鉴定要点）鉴定要点三日疟（三日疟（P.malariae）鉴定要点）鉴定要点1.环状体可呈环状体可呈方形方形2.带状形大滋带状形大滋养体是其养体是其特点特点 3.成熟裂殖成熟裂殖体体呈菊花状，呈菊花状，内含内含612个裂殖子个裂殖子 4.红细胞不胀红细胞不胀大，略缩大，略缩小小5.有时有西门有时有西门氏点氏点卵形疟（卵形疟（P.ovale）鉴定要点）鉴定要点1.1.红细胞略胀红细胞略胀大或不变大大或不
16、变大 2.2.红细胞边缘红细胞边缘呈车轮状呈车轮状3.3.环状体有时环状体有时呈现呈现鱼眼状鱼眼状4.4.薛氏点明显薛氏点明显 5.5.成熟裂殖体成熟裂殖体呈菊花状呈菊花状,类似三日疟类似三日疟原虫原虫,但更但更粗大粗大6.6.原虫呈卵圆原虫呈卵圆形形 镜检示教与镜检示教与读片练习读片练习This is a thin film from a 27 year old female backpacker,with a recent history of trekking through Northern Thailand and high fever.A typical Plasmodium fa
17、lciparum presentation.Numerous fine ring forms(大量环状体)Double chromatin dots(双核)Red cells are not enlarged（红细胞大小正常）A thin film from a 22 year old male holidaying in Lombok(Indonesia)one month previously.Intermittent fevers since returning.A typical Plasmodium vivax presentationring forms（环状体）trophozoi
18、te（大滋养体）Enlarged red cells（红细胞胀大）Recent travel in Africa.Pyrexia of unknown origin.A typical Plasmodium ovale（卵形疟）卵形疟）presentationtrophozoite（大滋养体）Enlarged red cell（红细胞胀大）Female patient,arrived from Brazil two weeks previously.Flu like symptoms since arrival.A typical Plasmodium malariae（三日疟）三日疟）pre
19、sentationBroad band form of plasmodium（带状大滋养体）Red cells not enlarged（红细胞不胀大）This is a thick film prepared from a 32 year old male recently returned from Vietnam.The only definitive diagnosis that can be made from this film is that Malaria is present.Thin films would have to be examined for species i
20、dentification.（虫种需观察薄血膜来定）虫种需观察薄血膜来定）Numerous ring form of Plasmodium can be seen(as indicated by the arrows).大量环状体大量环状体（箭头所指处）（箭头所指处）Note size of neutrophils(for comparison).中性粒细胞中性粒细胞（作对照）（作对照）2.Intermittent fever;arrived from India 2 months ago.Trophozoite（大滋养体）3.History of round the world safari
21、 including S.America,Asia and Africa.General malaise.Plasmodiumvivax (间日疟)microgametocyte(雄配子体)4.Unspecified overseas travel.Presented with temperature 38.4C vPlasmodiumvivax (间日疟)vSchizont (裂殖体)5.Male recently returned to Australia after backpacking through Asia.History of flu like symptoms.vRingfo
22、rm(环状体)vTrophozoite（大滋养体）大滋养体）7.Aches and pains,with fever.?Glandular Fever,?malaria.vRingform (环状体)vSchizont (裂殖体)14.50 year old male patient presented with fever after holidaying in Viet Nam.vP.Falciparum (恶性疟)vRingform (环状体)21.A member of the UN forces in East Timor.Presented with high temperatur
23、e.P.Falciparum (恶性疟)Ringform (环状体)P.Falciparum(恶性疟)macrogametocyte(雌配子体)P PMalaraeMalarae (三日疟三日疟)Trophozoite（大滋养体）大滋养体）vPlasmodiumvivax(间日疟间日疟)vTrophozoite（大滋养体）大滋养体）vSchizont (裂殖体裂殖体)vTrophozoite（大滋养体）大滋养体）Plasmodiumvivax(间日疟)microgametocyte(雄配子体)P.Falciparum(恶性疟)microgametocyte(雄配子体)疟原虫与其它物体的鉴别疟原
24、虫与其它物体的鉴别v白细胞残骸和幼稚红细胞残骸白细胞残骸和幼稚红细胞残骸 白细胞破裂后散出的颗粒，易误认为环状体的核，但看不到胞浆；白细胞残骸和幼稚红细胞残骸常为蓝色，与疟原虫胞浆相似，有时与其它红点或与血小板巧合在一起，容易误认为疟疾原虫。鉴别时如果形同大滋养体，可根据疟色素来鉴别；如形同环状体，可根据虫体大小、折光是否均匀、核与胞浆是否在同一平面，其它视野内有无疟疾原虫等仔细分析判定。v灰尘和染色液的色素沉着灰尘和染色液的色素沉着 灰尘和染色液的色素沉着在血膜的表面上时，易被误认为是疟色素，可依据其颗粒的形状、大小、色泽、有无核与胞浆的结构来鉴别也可转动显微镜的微调，看是否在同一水平面上。
25、v细菌细菌 细菌尤其是球菌在厚血膜中常被染成红色小点，与疟原虫的核相似，最易混淆。球菌形体较大，边缘光滑，且与红细胞不在同一平面。v水中原虫水中原虫 水中原虫有时也可看到核、胞浆和空泡，与间日疟大滋养相似，但无疟色素，而空泡多如网眼v植物种子植物种子 有很清晰的厚薄一致的边界，染色较深、无疟色素，也看不到核，且有柄脱落时的痕迹小结：血片镜检中小结：血片镜检中鉴定是否为疟原虫的五条原则鉴定是否为疟原虫的五条原则1、疟原虫要有核有浆有核有浆（红核蓝浆）。2、疟原虫各期（除环状体外）均含有疟色素。均含有疟色素。3、疟原虫自然形态要像自然形态要像；疟原虫呈半透明状态呈半透明状态，模糊一团不透明者不是。4、体积最大最大的疟原虫也不不能超过中性粒细胞大。超过中性粒细胞大。5、数量极少，似是而非者判为可疑，应重新选择时机多次制片、多次检查，结合临床并交上级大夫鉴定或行药物试治。镜检要求v1.师资培训：一定掌握，负责培训乡镇v2.牢记三要素：红核、蓝浆、疟色素v3.厚血膜要求：至少能认出疟原虫，可不分种、期；最好能进行计数v4.薄血膜要求：能分出虫种、期