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1、第三章第三章细菌的分布与消毒灭菌细菌的分布与消毒灭菌 第一节第一节 细菌的分布细菌的分布一、细菌在自然界的分布一、细菌在自然界的分布1 1、土壤、土壤2 2、水中、水中3 3、空气、空气二、细菌在人体的分布二、细菌在人体的分布人体各部位正常细菌数量人体各部位正常细菌数量 三、人体正常菌群及其意义三、人体正常菌群及其意义（一）（一）正常菌群（正常菌群（normal floranormal flora）正正常常人人体体的的体体表表及及与与外外界界相相通通的的腔腔道道的的黏黏膜膜上上存存在在者者不不同同种种类类和和一一定定数数量量的的细细菌菌，这这些些细细菌菌通通常常对对人人体体是是无无害害的，称为
2、正常菌群。的，称为正常菌群。（二）（二）正常菌群的生理作用正常菌群的生理作用 1 1、拮抗作用拮抗作用：生物屏障：生物屏障 改变改变pHpH：抑制外来菌：抑制外来菌 占位性保护作用：生物膜占位性保护作用：生物膜 争夺营养争夺营养 抗生素与细菌素的作用抗生素与细菌素的作用2 2、营养作用、营养作用 代谢：蛋白质、糖、脂肪、代谢：蛋白质、糖、脂肪、胆汁、胆固醇胆汁、胆固醇 合成：维生素合成：维生素 乳酸杆菌乳酸杆菌 3 3、免疫作用、免疫作用 Ag Ag AbAb 4 4、抗癌作用、抗癌作用 激活巨噬细胞激活巨噬细胞（三）条件致病菌（机会致病菌）（三）条件致病菌（机会致病菌）正常情况下不致病，特殊
3、情况下能正常情况下不致病，特殊情况下能引起疾病的细菌。引起疾病的细菌。条件致病菌致病的条件：条件致病菌致病的条件：免疫功能下降免疫功能下降 寄生部位改变寄生部位改变 不适当的抗菌药物治疗所导致的不适当的抗菌药物治疗所导致的菌群失调菌群失调 （四）菌群失调及菌群失调症（四）菌群失调及菌群失调症 由于某种原因使正常菌群的种类、由于某种原因使正常菌群的种类、数量和比例发生较大幅度的改变，数量和比例发生较大幅度的改变，导致微生态失去平衡称为导致微生态失去平衡称为菌群失调菌群失调。由于菌群失调而使宿主发生一系由于菌群失调而使宿主发生一系列临床症状，则称为列临床症状，则称为菌群失调症菌群失调症。措施：停用
4、原来的抗生素措施：停用原来的抗生素 微生态制剂（微生态制剂（酪酸菌、双歧杆菌、乳酸菌素等）第二节、第二节、消毒与灭菌消毒与灭菌 消毒消毒：指杀死物体上病原微生物的：指杀死物体上病原微生物的方法，但不包括芽胞。方法，但不包括芽胞。灭菌灭菌：是指杀灭物体上所有微生物，：是指杀灭物体上所有微生物，包括繁殖体和芽胞。包括繁殖体和芽胞。无菌无菌：物品中没有活的微生物存在。：物品中没有活的微生物存在。无菌操作无菌操作：防止微生物进入机体或物：防止微生物进入机体或物体的操作技术。体的操作技术。防腐防腐：指防止或抑制微生物生长繁：指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。殖的方法。消毒剂：高浓度消毒剂：高浓度 防腐剂
5、：低浓度防腐剂：低浓度 消毒、灭菌的方法一般可分为：消毒、灭菌的方法一般可分为：热力灭菌法热力灭菌法 紫外线照射紫外线照射 物理学方法物理学方法 电离辐射杀菌法电离辐射杀菌法 滤过除菌法滤过除菌法 化学方法化学方法 （一）（一）热力灭菌法热力灭菌法分类：干热灭菌法分类：干热灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法湿热比干热灭菌好的原因：湿热比干热灭菌好的原因：、湿热穿透力强、湿热穿透力强、细菌蛋白质在有水的情况下易、细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固变性于凝固变性、湿热蒸气有潜热存在、湿热蒸气有潜热存在一、一、物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法1 1、湿热灭菌法、湿热灭菌法 A A 高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法:
6、最常用、最有效的最常用、最有效的灭菌方法。灭菌方法。压力：压力：103.4KPa103.4KPa；温度：温度：121.3121.3；作用时间作用时间 1515-30min30min 用途：凡耐高温、不怕潮湿的物品。用途：凡耐高温、不怕潮湿的物品。如：手术器械、敷料和一般的培养基。如：手术器械、敷料和一般的培养基。B B 煮沸消毒法煮沸消毒法：100100，5min-10min 5min-10min 用途用途:常用于食具、刀剪、注射器消毒常用于食具、刀剪、注射器消毒 芽胞芽胞 延长延长1 13 3小时小时 2 2碳酸氢钠碳酸氢钠 105105C C 流通蒸气消毒法流通蒸气消毒法：不超过不超过 1
7、00100，15-30min15-30min，3737孵箱孵箱过夜（过夜（3 3次）次）用途用途:不耐高温的营养丰富的培养基的不耐高温的营养丰富的培养基的灭菌灭菌D D 巴氏消毒法巴氏消毒法 61.1-62.861.1-62.8，30 min30 min 71.7 71.7，15-30sec15-30sec用途用途:不耐高温的如牛奶、酒类、饮料不耐高温的如牛奶、酒类、饮料等食品的消毒等食品的消毒2 2、干热灭菌法、干热灭菌法（1 1）焚烧与烧灼：焚烧与烧灼：用途：废器的物品、接种环、试管用途：废器的物品、接种环、试管口、瓶口等口、瓶口等（2 2）干烤：）干烤：160160170170，2h2h
8、 如：玻璃器皿、瓷器等耐高温的物如：玻璃器皿、瓷器等耐高温的物品品 （二）紫外线与电离辐射灭菌法（二）紫外线与电离辐射灭菌法 1 1、日光与紫外线、日光与紫外线波长波长265265266nm266nm杀菌最强杀菌最强 机理：损坏机理：损坏DNADNA构型构型 细菌死亡或变异细菌死亡或变异 特点：穿透力弱特点：穿透力弱 有效距离有效距离2 23m 3m 时间时间1 12h2h 主要用于空气及物体表面的消毒主要用于空气及物体表面的消毒2 2、电离辐射、电离辐射：包括包括X X射线和射线和射线射线 机制：干扰机制：干扰DNADNA的合成；破坏细的合成；破坏细胞膜；胞膜；产生过氧化氢等产生过氧化氢等
9、特点：穿透力强，不升高温度特点：穿透力强，不升高温度 主要用于一次性塑料制品的消毒主要用于一次性塑料制品的消毒（三）滤过除菌法（三）滤过除菌法 用用滤菌器滤菌器除去液体及空气中的细菌除去液体及空气中的细菌 用用于于不不耐耐热热的的血血清清、抗抗毒毒素素、抗抗生生素和药液等的除菌。素和药液等的除菌。二、化学消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒剂的种类、性质与用途（一）化学消毒剂的种类、性质与用途 酚类：酚类：3%3%5%5%石炭酸、石炭酸、2%2%来苏、来苏、0.01%0.01%0.05%0.05%洗必泰洗必泰醇类：醇类：70%70%75%75%乙醇乙醇重金属盐类：重金属盐类：2%2%红汞
10、、红汞、0.1%0.1%硫柳汞、硫柳汞、1%1%硝酸银硝酸银氧化剂：氧化剂：0.1%0.1%高锰酸钾、高锰酸钾、3%3%过氧化氢、过氧化氢、0.2%-0.3%0.2%-0.3%过氧乙酸、过氧乙酸、2%2%2.5%2.5%碘伏碘伏表面活性剂等等表面活性剂等等（二）常用消毒剂的作用机制：（二）常用消毒剂的作用机制：使菌体蛋白质变性或凝固使菌体蛋白质变性或凝固 干扰或破坏细菌的酶系统或代谢干扰或破坏细菌的酶系统或代谢 改变细胞壁或细胞膜的通透性改变细胞壁或细胞膜的通透性（三）影响消毒灭菌的因素（三）影响消毒灭菌的因素消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间微生物的种类与数量与状态微生
11、物的种类与数量与状态环境因素环境因素 有机物有机物温度和酸碱度温度和酸碱度（四）防腐剂（四）防腐剂 某些低浓度的消毒剂可用作防腐剂。某些低浓度的消毒剂可用作防腐剂。第三节第三节 生物安全生物安全一、实验室生物安全及其重要意义一、实验室生物安全及其重要意义 实验室生物安全（实验室生物安全（laboratory laboratory biosafetybiosafety）是指在从事病原生物实验活动的实验是指在从事病原生物实验活动的实验室中避免病原体对工作人员和相关人员的室中避免病原体对工作人员和相关人员的危害，避免对环境的污染和公众的危害，危害，避免对环境的污染和公众的危害，为了保证实验研究的科学
12、性还要保护实验为了保证实验研究的科学性还要保护实验因子免受污染。因子免受污染。建立生物安全实验室的重要意义：建立生物安全实验室的重要意义：1.1.保证研究人员不受伤害，保护环境和保证研究人员不受伤害，保护环境和公众健康，保护实验因子公众健康，保护实验因子2.2.预防与控制传染病预防与控制传染病3.3.面临新的环境、生物恐怖面临新的环境、生物恐怖4.4.提高实验室检测能力提高实验室检测能力5.5.检测医院感染检测医院感染6.6.抵御突发传染病的全球传播抵御突发传染病的全球传播二、病原微生物危害程度分级二、病原微生物危害程度分级危害等级危害等级 危害性危害性1 1级级 危害最低危害最低 不大可能致
13、病不大可能致病2 2级级 能致病能致病 危害不严重危害不严重 传播有限传播有限3 3级级 能严重致病能严重致病 不易发生个体间传播不易发生个体间传播4 4级级 能严重致病能严重致病 易发生个体间传播易发生个体间传播三、生物安全水平分级及实验室设备要求三、生物安全水平分级及实验室设备要求生物安全实验室分级生物安全实验室分级 根据实验室的设计特点、建筑结构根据实验室的设计特点、建筑结构和屏障设施等可将生物安全实验室分为和屏障设施等可将生物安全实验室分为四个安全防护等级，即生物安全防护水四个安全防护等级，即生物安全防护水平一级（平一级（biosafetybiosafety level,BSL-1 l
14、evel,BSL-1）生生物安全防护水平四级（物安全防护水平四级（biosafetybiosafety level,BSL-4level,BSL-4）。）。BSL-1BSL-1防护水平和隔离要求最低，防护水平和隔离要求最低，BSL-4BSL-4防护水平和隔离要求最高。防护水平和隔离要求最高。BSL-1BSL-1、BSL-2BSL-2实验室属基础实验室，实验室属基础实验室，BSL-3BSL-3实验实验室为屏障实验室，室为屏障实验室，BSL-4BSL-4实验室为高度屏实验室为高度屏障实验室。障实验室。但使用频率最高，最频繁的是但使用频率最高，最频繁的是BSL-2BSL-2级级实验室。实验室。四、对生物恐怖活动防范四、对生物恐怖活动防范 利用强致病力的细菌、病毒等微生利用强致病力的细菌、病毒等微生物攻击人群。物攻击人群。日军侵华使用大量生物武器，造成日军侵华使用大量生物武器，造成平民伤亡。平民伤亡。（二）防腐剂（三）化学疗剂