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1、研考点重点难点探究悟高考真题演练固考基双基体系优化目录ONTENTSC课时作业第十二单元 生物技术实践第1讲微生物的培养与应用固考基固考基双基体系优化双基体系优化研考点研考点重点难点探究重点难点探究考点研析考点研析营营养要素养要素来源来源功能功能碳碳源源无机无机碳源碳源CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物等含碳无机物构成构成细细胞物胞物质质和一和一些代些代谢产谢产物物既是碳源又是能源既是碳源又是能源(有机碳源有机碳源)有机有机碳源碳源糖糖类类、脂、脂质质、蛋白、蛋白质质、有、有机酸、石油、花生粉机酸、石油、花生粉饼饼等等营营养要素养要素来源来源功能功能氮氮源源无机无机氮源氮源无机氮：无
2、机氮：NH3、铵盐铵盐、硝酸硝酸盐盐、N2等等合成含氮的代合成含氮的代谢产谢产物物有机有机氮源氮源牛肉膏、蛋白牛肉膏、蛋白胨胨、核酸、核酸、尿素、氨基酸尿素、氨基酸合成蛋白合成蛋白质质、核酸及含、核酸及含氮的代氮的代谢产谢产物物生生长长因子因子维维生素、氨基酸、碱基生素、氨基酸、碱基酶酶和核酸的和核酸的组组成成分成成分参与代参与代谢过谢过程中的程中的酶酶促反促反应应培养基种培养基种类类特点特点用途用途液体培养基液体培养基不加凝固不加凝固剂剂工工业业生生产产固体培养基固体培养基加凝固加凝固剂剂(如如琼琼脂脂)微生物分离、微生物分离、鉴鉴定，定，_，菌种保藏，菌种保藏半固体培养基半固体培养基观观察
3、微生物的运察微生物的运动动、_、鉴鉴定定活菌计数活菌计数分类分类种种类类制制备备方法方法原理原理用途用途举举例例选择选择培养培养基基培养基中加入培养基中加入某些某些_依据某些微生依据某些微生物物对对某些物某些物质质的的_或抗性而或抗性而设计设计从众多微从众多微生物中生物中_所需所需的微生物的微生物加入青霉加入青霉素分离得素分离得到酵母菌到酵母菌和霉菌和霉菌鉴别鉴别培养培养基基培养基中加入培养基中加入某种某种_或或化学化学药药品品产产生特定的生特定的_或其他或其他变变化化_不同不同种种类类的微的微生物生物用伊用伊红红美美蓝蓝培养培养基基鉴别鉴别大大肠肠杆菌杆菌化学物质化学物质特殊需求特殊需求分离
4、分离指示剂指示剂颜色颜色鉴别鉴别条件条件结结果果常用方法常用方法应应用范用范围围消消毒毒较为较为_的的物理或物理或化学方化学方法法仅杀仅杀死物体死物体表面或内部表面或内部的部分的部分对对人人体体 的的微生物微生物煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温的液体不耐高温的液体化学化学药剂药剂消毒法消毒法用酒精擦拭双手，用酒精擦拭双手，用用氯氯气消毒水源气消毒水源灭灭菌菌强强烈的烈的理化因理化因素素杀杀死物体内死物体内外所有的外所有的_，包括，包括芽芽孢孢和和孢孢子子灼灼烧灭烧灭菌法菌法接种工具接种工具干干热灭热灭菌法菌法玻璃器皿、金属玻璃器皿、金属工具工具高高压压蒸汽蒸汽灭
5、灭菌法菌法培养基及容器培养基及容器温和温和有害有害微微生物生物比比较项较项目目 平板划平板划线线法法稀稀释释涂布平板法涂布平板法关关键键操作操作接种接种环环在固体平板培在固体平板培养基表面养基表面 划划线线一系列的一系列的_；涂布平板法操作涂布平板法操作注意事注意事项项每次划每次划线线前后均需前后均需_接种接种环环_要足要足够够高，高，为为确保确保实验实验成功可以增加稀成功可以增加稀释释度度菌体菌体获获取取在具有在具有显显著的著的_的菌落中挑取菌体的菌落中挑取菌体从适宜稀从适宜稀释释度的度的_上的上的菌落中挑取菌体菌落中挑取菌体优优点点可以根据菌落的特点可以根据菌落的特点获获得某种微生物的得某
6、种微生物的单单细细胞菌落胞菌落既可以既可以获获得得单细单细胞菌落，胞菌落，又能又能对对微生物微生物计计数数缺点缺点不能不能对对微生物微生物计计数数操作复操作复杂杂，需要涂布多个，需要涂布多个平板平板连续连续梯度稀释梯度稀释灼烧灼烧稀释度稀释度菌落特菌落特征征平板平板第一次操作第一次操作每次划每次划线线之之间间划划线结线结束束目目的的杀杀死接种死接种环环上原有的微上原有的微生物生物杀杀死上次划死上次划线线后接种后接种环环上上残留的菌种，使下次划残留的菌种，使下次划线线的菌种直接来源于上次划的菌种直接来源于上次划线线的末端，使每次划的末端，使每次划线线菌菌种数目减少种数目减少杀杀死接种死接种环环上
7、上残存的菌种，残存的菌种，避免避免细细菌菌污污染染环环境和感染操境和感染操作者作者针对训练针对训练考点研析考点研析比比较较项项目目土壤中分解尿素的土壤中分解尿素的细细菌的分菌的分离离分解分解纤维纤维素的微生物的分素的微生物的分离离方法方法利用以利用以 为为唯一氮源的唯一氮源的选择选择培养基培养基进进行行选择选择培养培养利用富含利用富含 的的选择选择培养基培养基进进行行选择选择培养培养原理原理只有分解尿素的只有分解尿素的细细菌能菌能够够合合成成 ，才能在以尿素，才能在以尿素为为唯一氮源的培养基上生唯一氮源的培养基上生长长因因为为培养基中含有丰富的培养基中含有丰富的纤维纤维素，因此能素，因此能够够
8、分解分解纤纤维维素的微生物具有更多的素的微生物具有更多的生存机会而大量繁殖生存机会而大量繁殖鉴别鉴别在培养基中加入在培养基中加入 指示指示剂剂，指示，指示剂变红说剂变红说明菌落中明菌落中的菌体的菌体为为分解尿素的分解尿素的细细菌菌_染色法，周染色法，周围围出出现现_的菌落的菌落为为分解分解纤维纤维素的微生物的菌落素的微生物的菌落尿素尿素纤维素纤维素脲酶脲酶酚红酚红刚果红刚果红透明圈透明圈比比较较项项目目间间接接计计数法数法(稀稀释释涂布平板法涂布平板法)直接直接计计数法数法(显显微微计计数法数法)原理原理当当样样品的稀品的稀释释度足度足够够高高时时，培养，培养基表面生基表面生长长的一个菌落，来
9、源于的一个菌落，来源于样样品稀品稀释释液中的液中的 活菌，通活菌，通过过统计统计平板上的平板上的 ，就能推，就能推测测出出样样品中大品中大约约含有多少活菌含有多少活菌利用特定利用特定细细菌菌计计数板数板或血或血细细胞胞计计数板，在数板，在显显微微镜镜下下计计算一定容算一定容积积的的样样品中微生物的品中微生物的数量数量一个一个菌落数菌落数比比较较项项目目间间接接计计数法数法(稀稀释释涂布平板法涂布平板法)直接直接计计数法数法(显显微微计计数法数法)公式公式每克每克样样品中的菌落数品中的菌落数(CV)M C：某稀：某稀释释度下平板上生度下平板上生长长的平的平均菌落数；均菌落数；V：涂布平板：涂布平
10、板时时所用的稀所用的稀释释液的液的体体积积(mL)；M：稀：稀释释倍数倍数每毫升原液所含每毫升原液所含细细菌菌数：每小格平均数：每小格平均细细菌菌数数400104稀稀释释倍倍数数缺点缺点当两个或多个菌体当两个或多个菌体连连在一起在一起时时，平板上平板上观观察到的只是一个菌落察到的只是一个菌落不能区分不能区分细细胞死活胞死活结结果果比比实际值实际值偏小偏小比比实际值实际值偏大偏大比比较项较项目目对对照照重复重复目的目的排除非排除非测试测试因素因素对实对实验结验结果的影响果的影响排除偶然因素排除偶然因素对实验对实验结结果的影响果的影响实实例例空白空白对对照：确定培养照：确定培养基制作是否合格基制作是否合格同一稀同一稀释释度涂布至少度涂布至少3个平板个平板针对训练针对训练组别组别平板数平板数统计统计的菌落数的菌落数取平均取平均值值甲甲组组两个两个250和和220235乙乙组组三个三个160、240和和110170丙丙组组四个四个280、200、340和和160245丁丁组组五个五个120、60、270、220和和130160悟高考悟高考真题演练真题演练酵母膏酵母膏 无机无机盐盐 淀粉淀粉 纤维纤维素粉素粉 琼琼脂脂 CR溶液溶液水水培养基甲培养基甲培养基乙培养基乙