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1、第十四章第十四章 实验动物与生物安全实验动物与生物安全第一节第一节 生物安全的基本概念生物安全的基本概念第二节第二节 实验动物生物危害的种类及控制实验动物生物危害的种类及控制第三节第三节 动物饲养和实验人员的安全防护动物饲养和实验人员的安全防护第四节第四节 重要的人兽共患病重要的人兽共患病东北农业大学生物安全事件回放东北农业大学生物安全事件回放2010年12月间，东北农业大学动物医学学院有关教师，从哈尔滨市郊区一家养殖场购入4只山羊，未按国家及黑龙江省实验动物管理规定要求养殖场出具检疫合格证明，并在以上述4只山羊进行5次动物实验前，未按规定对实验山羊进行现场检疫，同时在指导学生实验过程中未能切
2、实按照标准的实验规范，严格要求学生遵守操作规程，进行有效防护，共涉及4名教师、2名实验员、110名学生。由于上述违规行为，导致2011年3月至5月，学校27名学生及1名教师陆续确诊感染布病。经专家组认定该事故是一起因学校相关责任人在实验教学中违反有关规定造成的重大教学责任事故，学校对事故承担全部责任。“关节疼痛、全身乏力、多汗，甚至生活不能自理”的老龄状况。据广东省实验动物检测所所长黄韧透露，广东也曾查出布鲁氏菌病；而就在上半年，广东还发现了5家单位的实验鼠带菌。严重则严重则影响生育影响生育，伤痛伴随终身，伤痛伴随终身 布鲁氏菌病有多恐怖？布鲁氏菌病有多恐怖？实验告一段落，但病痛的阴霾却仍挥之
3、不去。同学们出现了浑身酸痛、乏力等症状，特别是到了阴雨天，腰部疼痛难忍，连平日身强力壮的高大男生也会疼得直哭。病情远比人们想象得严重。据南方医科大学实验动物中心主任顾为望教授介绍，感染布鲁氏菌病者常发低烧，很多组织器官受到病菌侵害，严重时甚至影响生殖能力。“转为慢性的话是很难治愈的。”他担忧地表示，每个人的抵抗力不同，接触以及防护措施不同，肯定会使一部分患者由急性转为慢性，这意味着这样的伤痛要伴随患者终身！然而，比肉体疼痛更可怕的是对前程的耽误。布鲁氏菌病与甲型H1N1流感、传染性非典型肺炎、艾滋病、人感染高致病性禽流感、炭疽病等20余种“大名鼎鼎”的传染病并列为乙类传染病，属于乙类职业病。根
4、据国家卫生部出台的职业病范围和职业病患者处理办法的规定，确诊患有职业病的人员，不宜继续从事原有害作业或工作的，将调离原工作岗位。第一节第一节 生物安全的基本概念生物安全的基本概念一、生物安全的定义一、生物安全的定义所谓生物安全（biosafety）一般指针对现代生物技术开发和应用的同时可能造成的对自然界生态环境、动物和人体健康产生的潜在危害所采取的一系列有效预防和控制措施。广义的生物安全是国家安全问题的组成部分，是指与生物有关的各种因素对社会、经济、自然界生态环境及人类健康及所产生的危害或潜在风险。包括人类的健康安全、人类赖以生存的农业生物安全以及与人类生存有关的环境生物安全3个方面。狭义的生
5、物安全是指在各学科领域中现代生物技术的研究、开发、应用可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在的不利影响。二、动物实验中的生物安全问题二、动物实验中的生物安全问题实验动物在生产、使用过程中，存在以下几方面的生物安全问题。1.实验动物的一些烈性传染病的流行和传播可造成大批动物的死亡，危及动物的健康；实验动物带有的一些人兽共患病病原微生物可感染人，危害人的健康。此外，用来做实验研究的野生动物也可能携带对人类产生严重威胁的人畜共患病病原体。2.动物实验过程中使用的一些有毒有害化学品、药品、消毒剂、杀虫剂、农药等，流入环境，造成环境污染，最终影响自然界和人类健康。3.实验动物的皮毛及排泄物对某些过
6、敏体质的人是致敏原，可引起过敏性鼻炎、支气管哮喘、皮疹等。4.由重组DNA技术发展形成的遗传工程细菌和动物可能造成以目前科学水平和知识所无法预见的危害，如重组DNA操作过程中大量使用的抗药性标记基因氨苄青霉素抗性基因和新霉素抗性基因导入到细菌和动物中。在上述生物安全问题中，由动物感染人兽共患病而引起有关人员感染的安全问题最为直接，后果最为严重，因而最受到人们的普遍重视。三、生物安全的相关术语三、生物安全的相关术语1.1.实验室生物安全（实验室生物安全（laboratory laboratory biosafetybiosafety）是指从事生命科学研究和教学的实验室为避免各种生物危害而采取包括
7、建立规范的管理体系、配备必要的物理、生物防护设施和设备等综合措施。2.2.生物安全实验室（生物安全实验室（biosafetybiosafety laboratory,BSL laboratory,BSL）是指专门从事病原微生物的实验室，为避免病原微生物对工作人员、公众的危害以及对环境的污染，保证试验研究的科学性或保护被试验因子免受污染，通过防护屏障和管理措施，达到生物安全要求的生物实验室。实验室的生物安全水平可以分为：基础实验室-一级生物安全水平基础实验室-二级生物安全水平防护实验室-三级生物安全水平最高防护实验室-四级生物安全水平。3 3实验动物生物安全实验室（实验动物生物安全实验室（Ani
8、mal Animal BiosafetyBiosafety Laboratory,ABSL Laboratory,ABSL）将不同级别的病原微生物感染动物，进行动物试验研究，用于动物传染病或动物模型的临床诊断、治疗、预防，以及未知病原体的鉴定研究等工作，需要在相应级别的ABSL中进行，如一、二、三、四级病原微生物的动物实验应在ABSL-1、2、3、4中进行。级别越高，硬件防护设施和软件管理要求就越严。危害等级防护水平实验室操作和安全设施ABSL-1限制出入，穿戴防护服和手套。ABSL-2在达到ABSL-1条件的基础上，还应具备生物危害警告标志，可产生气溶胶的操作应使用生物安全柜。废弃物和饲养笼
9、舍在清洗前先清除污染。ABSL-3在达到ABSL-2条件的基础上，还应有准入控制。所有操作应使用生物安全柜，并穿着特殊的防护服，离开时淋浴。ABSL-4在达到ABSL-3条件的基础上，还应严格控制出入。进入前更衣。配备级生物安全柜或正压防护服。离开时化学淋浴（正压服型）。所有废弃物在清除出设施前，应先清除污染。动物生物安全实验室操作和安全设施四、国内外生物安全的法规及标准四、国内外生物安全的法规及标准（一）国外实验室生物安全的法规及标准（一）国外实验室生物安全的法规及标准世界卫生组织：实验室生物安全手册（2004年第三版）美国疾病预防控制中心微生物学及生物医学实验室生物安全准则（1999年第四
10、版）欧洲经济共同体委员会指令93/88（二）我国实验室生物安全的法规及标准（二）我国实验室生物安全的法规及标准1.病原微生物实验室生物安全管理条例及配套文件国务院第424号国务院令：病原微生物实验室生物安全管理条例（2004年11月12日）农业部：动物病原微生物分类名录、致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范和高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法。卫生部：包括人间传染的病原微生物名录和可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定。2.医疗废物管理条例及配套文件国务院第380号令医疗废物管理条例（2003年6月4日）卫生部和国家环境保护总局：医疗废物分类目录
11、、医疗废物管理行政处罚办法。卫生部：医疗卫生机构医疗废物管理办法（2003年8月14日）国家环保总局：医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定(环发2003188号)和医疗废物集中处置技术规范（试行）（环发2003206号）。3.中华人民共和国国家标准实验室生物安全通用要求（GB194892008）4.建设部：生物安全实验室建筑技术规范（GB 503462004）5.农业部：兽医实验室生物安全管理规范（2003年10月15日）第二节第二节 实验动物生物危害的种类及控制实验动物生物危害的种类及控制一、废弃物一、废弃物1.废弃垫料2.医疗及实验废弃物3.废液 废弃物管理的总体原则是对从实验室废弃
12、物的产生、分类收集、警示标记、密闭包装与运输、贮存、集中统一无害化处置的整个流程实行全过程严格控制，确保使感染性、损伤性废物得到有效安全处理。二、动物粪便二、动物粪便三、动物尸体三、动物尸体四、野生动物和昆虫四、野生动物和昆虫五、动物致敏原五、动物致敏原六、有害气体六、有害气体 第三节第三节 动物饲养和实验人员的安全防护动物饲养和实验人员的安全防护一、动物实验前人员的安全教育一、动物实验前人员的安全教育我国的实验动物法规规定，从事实验动物和动物实验工作的人员必须经过培训，了解和掌握相关的法规条例及操作规范、实验动物知识、动物实验基本技术，其中也包括了安全意识教育，了解和掌握生物危害的防护知识。
13、动物实验前人员的安全教育可形式多样，如参加实验动物从业人员的岗位培训、选修医学实验动物学课程，对初入实验动物室的实验人员进行现场介绍、指导等。生物安全的许多内容包含在实验动物室的各种管理制度中，因此实验人员熟悉并严格遵守这些规章制度是生物安全的保证。二、动物实验中的个人安全防护二、动物实验中的个人安全防护(一)个人防护用品的穿戴最基本的防护就是要穿着合适的防护工作服和戴口罩、帽子和手套，避免身体与动物直接接触。不同级别的环境要求着装也不同。当进行特殊实验时应根据需要选择相应特殊防护装置，如ABSL-3除要求穿特制的无菌隔离服外，在处理病原体时还须戴防护面罩，离开时淋浴；ABSL-4要求穿具有生
14、命维持系统的正压防护服，离开时淋浴。隔离服穿着方法。（二）健康检查及疫苗接种直接接触实验动物的工作人员定期组织体格检查。对患有传染性疾病，不宜承担所做工作的人员，应当及时调换工作。进行已知的传染性实验，要在实验前对工作人员进行特异性血清抗体检测并留存，以后要进行定期特异抗体检测，以便了解工作人员是否在工作中受到了感染。进行强传染性病原体研究的人员，有条件者要进行药物和血清抗体预防治疗或备用，有疫苗的要进行预防免疫。建议长期饲养犬饲养人员预防接种狂犬疫苗，饲养灵长类动物饲养人员预防接种甲型肝炎疫苗，并定期进行结核菌素试验。三、意外损伤的防护三、意外损伤的防护 1.动物咬、抓伤被SPF大小鼠抓伤皮
15、肤较表浅时，可在伤处局部皮肤区涂抹红汞即可；如被大小鼠咬伤出血，可先挤出伤口处血液，再用0.3%双氧水棉球消毒伤口，用干棉球擦干后再外贴创可贴。被普通级豚鼠、兔抓伤时，先清洗局部皮肤，再在伤处局部皮肤区涂抹红汞即可。被普通级比格犬咬伤时，视咬伤时伤口的大小和深浅、出血的多少而定。伤口较小，出血较少的伤口可先挤出伤口处血液，再用0.3%双氧水棉球消毒伤口，用干棉球擦干后再外贴创可贴；伤口较大、出血较多时，应送医院进行治疗。对被非标准化实验动物如草犬、猫、羊、猪等咬伤时，除了进行上述创口处理外，应详细了解供应商的诚信程度、该批犬的来源和疫苗接种情况，确信原始个体档案的真实可靠。如无法对上述资料的真
16、实性作出判断时，视咬伤程度决定是否应注射狂犬疫苗。应对咬人非标准化实验动物进行至少二周的密切观察，观察的内容包括一般状态、精神行为、摄食和饮水、大小便等。如有疑似狂犬病或其它重要人兽共患病症状时，应立即捕杀，局部消毒，动物尸体焚烧处理。被咬人应送医院进行紧急处理。2.注射针头、手术刀、锐利的器械损伤如果这些锐器已接触动物组织或血液，处理方法同动物咬伤；如果未接触动物则消毒包扎即可。创口较大、出血较多时，应送医院进行治疗。3.有毒有害、感染性材料污染身体有毒有害试剂污染皮肤时，应用适量自来水冲刷，用肥皂洗涤即可。当感染性病原体污染皮肤时，皮肤局部用碘酒消毒，再用75%酒精去碘消毒。当有毒有害、感染性材料溅入眼睛时，应立即用洗眼机冲洗眼睛，用抗菌素眼药水滴眼，并视情况送医院作进一步检查和治疗。思考题1.什么叫生物安全？2.实验动物生产和动物实验中可能存在那些生物安全问题？3.动物实验中如何做好个人安全防护？